牙周病是發(fā)生在牙周支持組織的慢性感染性疾病,目前,臨床上尚無有效的治療方法。隨著組織工程技術(shù)和基因治療技術(shù)的興起和發(fā)展,在治療牙周病時(shí)可通過手術(shù)去除致病因素,再利用基因治療技術(shù)表達(dá)細(xì)胞因子以促進(jìn)組織的修復(fù)和再生,研究發(fā)現(xiàn)同時(shí)轉(zhuǎn)移并表達(dá)多個(gè)外源性基因在基因治療領(lǐng)域的應(yīng)用價(jià)值較單個(gè)基因更高。 本項(xiàng)目從骨吸收-重建及組織再生機(jī)制入手探討治療牙周病的有效方法：通過擴(kuò)增具有抑制破骨細(xì)胞功能的骨保護(hù)素(osteoprotegerin, OPG)和促進(jìn)組織增生的堿性成纖維細(xì)胞生長因子(basic fibroblast growth factor, bFGF)基因,構(gòu)建出含有OPG和bFGF基因的重組腺病毒。利用雙表達(dá)重組腺病毒技術(shù),增加病變牙周組織中OPG的分泌,從而抑制RANKL功能,阻斷破骨細(xì)胞增殖、分化與成熟；同時(shí)應(yīng)用促進(jìn)細(xì)胞增殖的bFGF,來治療重癥牙周病牙周組織缺損。 目的 以含有OPG和bFGF的共表達(dá)重組腺病毒感染牙齦及牙周膜成纖維細(xì)胞,觀察OPG與bFGF分別在這兩種細(xì)胞中表達(dá)的情況；并以重組腺病毒結(jié)合膠原膜置入犬牙槽骨缺損處,觀察其對(duì)牙槽骨缺損修復(fù)的影響。 方法 培養(yǎng)牙齦及牙周膜成纖維細(xì)胞,感染重組腺病毒,運(yùn)用Western blot和RT-PCR的方法分別檢測兩種細(xì)胞中OPG及bFGF的表達(dá),并以正常培養(yǎng)的牙齦及牙周膜成纖維細(xì)胞作為對(duì)照組；制造犬下頜前磨牙根分叉處牙槽骨缺損模型,左側(cè)作為實(shí)驗(yàn)組,右側(cè)作為空白對(duì)照組和材料對(duì)照組。實(shí)驗(yàn)組(n=6)：將滴加重組腺病毒的膠原膜置于骨缺損區(qū),縫合齦瓣；材料對(duì)照組(n=4)：將未滴加重組腺病毒的膠原膜置于骨缺損區(qū),縫合齦瓣；空白對(duì)照組(n=2)：直接縫合齦瓣。光鏡觀察骨缺損處牙槽骨新生情況并用免疫組織化學(xué)方法檢測OPG和bFGF在犬牙周組織中的表達(dá)。 結(jié)果 細(xì)胞培養(yǎng)結(jié)果顯示,感染了重組腺病毒的牙齦和牙周膜成纖維細(xì)胞,OPG及bFGF的表達(dá)在蛋白和基因水平上均明顯高于正常對(duì)照組；動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,實(shí)驗(yàn)組骨缺損處有多量新生牙槽骨生長,其OPG和bFGF較材料對(duì)照組和空白對(duì)照組均有較強(qiáng)的表達(dá)。 結(jié)論 OPG和bFGF共表達(dá)的重組腺病毒可提高牙齦及牙周膜成纖維細(xì)胞OPG和bFGF的表達(dá),對(duì)牙槽骨缺損修復(fù)起促進(jìn)作用。
【學(xué)位單位】：安徽醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2012
【中圖分類】：R781.4
【文章目錄】：
中英文縮寫詞對(duì)照
中文摘要
Abstract
前言
材料與方法
結(jié)果
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附錄
致謝
綜述
    參考文獻(xiàn)

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 王云鵬;馬建群;;急性冠狀動(dòng)脈綜合征與血清骨保護(hù)素的相關(guān)性研究進(jìn)展[J];濱州醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2011年03期

2 孫雙雙;陳紅;唐敏;施瓊;黎玉葉;王建偉;周蘭;何通川;左國偉;;結(jié)締組織生長因子全長及其缺失突變體重組腺病毒的構(gòu)建和鑒定[J];重慶醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2011年08期

3 周蕊;付穎;李新;;rhBMP-2對(duì)兔下頜骨牽引成骨區(qū)骨保護(hù)素表達(dá)的影響[J];口腔醫(yī)學(xué)研究;2011年08期

4 徐琳;葛永玲;鄭宇浩;韓璐榮;馬建華;賀志莉;;H89抑制降鈣素基因相關(guān)肽促兔成骨細(xì)胞OPG表達(dá)的實(shí)驗(yàn)研究[J];西北國防醫(yī)學(xué)雜志;2011年04期

5 羅助榮;張克己;鄭磊磊;徐高陽;謝菁菁;林毅;蓋曉波;;血清骨保護(hù)素、可溶性核因子κB受體活化因子配體與急性冠狀動(dòng)脈綜合征相關(guān)性研究[J];中華臨床醫(yī)師雜志(電子版);2011年10期

6 段斌斌;萬全增;李春雯;史曉林;;骨碎補(bǔ)對(duì)OPG/RANKL表達(dá)影響的研究進(jìn)展[J];中醫(yī)正骨;2011年06期

7 蘇方;劉世森;劉洪臣;;骨保護(hù)素的生物學(xué)特性及其在口腔領(lǐng)域的研究進(jìn)展[J];中華老年口腔醫(yī)學(xué)雜志;2011年02期

8 陸斌;李廣琪;李建武;謝延;丁宏;楊艷;;近β鈦合金對(duì)人成骨細(xì)胞骨保護(hù)素/核因子-κB受體活化因子配體mRNA表達(dá)影響的研究[J];中國矯形外科雜志;2011年11期

9 李昂;趙俊杰;郭寧;石建峰;饒國洲;魏虹;茍建重;;黃芩苷對(duì)人牙周膜細(xì)胞功能活性調(diào)節(jié)的實(shí)驗(yàn)研究[J];口腔生物醫(yī)學(xué);2011年02期

10 陶燕華;侯建明;;絕經(jīng)后女性骨密度及骨保護(hù)素與頸動(dòng)脈粥樣斑塊形成的關(guān)系[J];福建醫(yī)藥雜志;2011年02期

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 丁振宇;端粒酶催化亞單位重組腺病毒疫苗的抗腫瘤作用的實(shí)驗(yàn)研究[D];四川大學(xué);2004年

2 劉志華;用腺病毒載體介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)移研究HBV/C區(qū)熱點(diǎn)變異對(duì)小鼠免疫應(yīng)答的影響[D];第一軍醫(yī)大學(xué);2002年

3 侯建梅;巨噬細(xì)胞炎癥蛋白3β（Mip3β）重組腺病毒疫苗抗腫瘤實(shí)驗(yàn)研究[D];四川大學(xué);2005年

4 彭方興;鋅指蛋白A20保護(hù)大鼠肝移植急性排斥模型中供肝內(nèi)皮細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)研究[D];四川大學(xué);2005年

5 夏冬;重組腺病毒介導(dǎo)人TIMP-1基因抑制肝癌侵襲和轉(zhuǎn)移的實(shí)驗(yàn)研究[D];四川大學(xué);2006年

6 梁蔚芳;聚乙二醇化干擾素α-2a與干擾素α-2a在體內(nèi)和體外的抗乙型肝炎病毒活性研究[D];第一軍醫(yī)大學(xué);2007年

7 何向東;膀胱上皮特異性重組腺病毒的構(gòu)建及其抑制作用[D];蘭州大學(xué);2008年

8 張國鵬;兩種核素報(bào)告基因系統(tǒng)用于監(jiān)測治療基因VEGF165表達(dá)的基礎(chǔ)研究[D];華中科技大學(xué);2010年

9 馮志新;豬圓環(huán)病毒2型致病機(jī)理和重組腺病毒介導(dǎo)shRNA抑制PCV2在體內(nèi)外復(fù)制的研究[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2007年

10 王敏;基因優(yōu)化的表達(dá)人輪狀病毒重組腺病毒免疫效果研究[D];中國疾病預(yù)防控制中心;2008年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 沈棟林;重組腺病毒心肌營養(yǎng)素-1轉(zhuǎn)染對(duì)神經(jīng)干細(xì)胞的作用[D];遵義醫(yī)學(xué)院;2010年

2 孫健;含CDglyES的雙功能融合基因的重組腺病毒對(duì)放療增敏作用的實(shí)驗(yàn)研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2003年

3 李雯;共表達(dá)骨保護(hù)素和堿性成纖維細(xì)胞生長因子的重組腺病毒對(duì)牙槽骨缺損修復(fù)的實(shí)驗(yàn)研究[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2012年

4 郭麗;含有HIV-1 vpr基因的重組腺病毒的制備[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2002年

5 劉靜;腺病毒介導(dǎo)的人TLR2和TLR4基因聯(lián)合抗炎作用研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2010年

6 蔡永君;叉頭狀轉(zhuǎn)錄因子Foxp3重組腺病毒的構(gòu)建及鑒定[D];浙江大學(xué);2006年

7 陳杰;重組腺病毒介導(dǎo)的IDO高表達(dá)DC對(duì)同種反應(yīng)T細(xì)胞亞群分化的影響[D];華中科技大學(xué);2009年

8 李玉峰;豬繁殖與呼吸綜合征（PRRS）病毒GP5蛋白重組腺病毒的構(gòu)建與鑒定[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2003年

9 陳建威;重組腺病毒三突變型低氧誘導(dǎo)因子-1α治療兔后肢缺血的安全性初步研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2010年

10 李菲;含CD和ES融合基因重組腺病毒的構(gòu)建和體外抑瘤作用的研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2002年

本文編號(hào)：2860679