牙周病是發(fā)生在牙周支持組織的慢性感染性疾病,目前,臨床上尚無有效的治療方法。隨著組織工程技術和基因治療技術的興起和發(fā)展,在治療牙周病時可通過手術去除致病因素,再利用基因治療技術表達細胞因子以促進組織的修復和再生,研究發(fā)現(xiàn)同時轉(zhuǎn)移并表達多個外源性基因在基因治療領域的應用價值較單個基因更高。 本項目從骨吸收-重建及組織再生機制入手探討治療牙周病的有效方法：通過擴增具有抑制破骨細胞功能的骨保護素(osteoprotegerin, OPG)和促進組織增生的堿性成纖維細胞生長因子(basic fibroblast growth factor, bFGF)基因,構(gòu)建出含有OPG和bFGF基因的重組腺病毒。利用雙表達重組腺病毒技術,增加病變牙周組織中OPG的分泌,從而抑制RANKL功能,阻斷破骨細胞增殖、分化與成熟；同時應用促進細胞增殖的bFGF,來治療重癥牙周病牙周組織缺損。 目的 以含有OPG和bFGF的共表達重組腺病毒感染牙齦及牙周膜成纖維細胞,觀察OPG與bFGF分別在這兩種細胞中表達的情況；并以重組腺病毒結(jié)合膠原膜置入犬牙槽骨缺損處,觀察其對牙槽骨缺損修復的影響。 方法 培養(yǎng)牙齦及牙周膜成纖維細胞,感染重組腺病毒,運用Western blot和RT-PCR的方法分別檢測兩種細胞中OPG及bFGF的表達,并以正常培養(yǎng)的牙齦及牙周膜成纖維細胞作為對照組；制造犬下頜前磨牙根分叉處牙槽骨缺損模型,左側(cè)作為實驗組,右側(cè)作為空白對照組和材料對照組。實驗組(n=6)：將滴加重組腺病毒的膠原膜置于骨缺損區(qū),縫合齦瓣；材料對照組(n=4)：將未滴加重組腺病毒的膠原膜置于骨缺損區(qū),縫合齦瓣；空白對照組(n=2)：直接縫合齦瓣。光鏡觀察骨缺損處牙槽骨新生情況并用免疫組織化學方法檢測OPG和bFGF在犬牙周組織中的表達。 結(jié)果 細胞培養(yǎng)結(jié)果顯示,感染了重組腺病毒的牙齦和牙周膜成纖維細胞,OPG及bFGF的表達在蛋白和基因水平上均明顯高于正常對照組；動物實驗結(jié)果顯示,實驗組骨缺損處有多量新生牙槽骨生長,其OPG和bFGF較材料對照組和空白對照組均有較強的表達。 結(jié)論 OPG和bFGF共表達的重組腺病毒可提高牙齦及牙周膜成纖維細胞OPG和bFGF的表達,對牙槽骨缺損修復起促進作用。
【學位單位】：安徽醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位年份】：2012
【中圖分類】：R781.4
【文章目錄】：
中英文縮寫詞對照
中文摘要
Abstract
前言
材料與方法
結(jié)果
討論
結(jié)論
參考文獻
附錄
致謝
綜述
    參考文獻

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本文編號：2860679