目的 建立大鼠實驗性牙周炎模型，與此同時對大鼠予以心理應激刺激，觀察并比較大鼠的牙周組織學改變，同時檢測應激指標，包括血糖、血清促腎上腺皮質激素(adrenocorticotrophic hormone，ACTH)的水平，探討心理應激對牙周炎的影響；運用免疫組織化學法檢測牙周組織白介素-1β（interleukin-1β，IL-1β）、白介素-17（interleukin-17，IL-17）的表達水平，探討心理應激對牙周免疫功能的影響；通過檢測大鼠血清乳酸脫氫酶(lactic dehydrogenase，LDH)及其同工酶乳酸脫氫酶1(lactic dehydrogenase1，LDH1)的水平來評估機體缺氧程度，探討心理應激對牙周炎氧代謝影響的機制。研究結果對于闡明心理應激與牙周炎的關系以及改進牙周病治療方案有一定的指導意義。 方法 清潔級（specific pathogen-free,SPF）4周齡雄性Wistar大鼠80只，隨機分為4組：1）正常對照組（normal control group），該組大鼠正常喂養(yǎng)，牙周不做特殊處理；2）單純應激組（stress-stimulation group）：該組大鼠牙周不做特殊處理，與此同時，給予心理應激刺激；3）實驗性牙周炎組（experimental periodontitis group）：用浸有牙周致病菌的絲線結扎左側上頜第二磨牙牙頸部復制牙周炎模型；4）牙周炎＋應激組（periodontitis withstress-stimulation group）：該組大鼠按實驗性牙周炎組方法復制牙周炎模型，同時對大鼠予以心理應激刺激。設建模后2、4、6和8周末為四個時間點，四個組于各時間點分批處死，每時間點每組處死的動物數為5只。大鼠處死前尾靜脈采血檢測血糖濃度，心臟采血檢測血清ACTH、LDH及其同工酶LDH1，評估機體應激狀況及組織的缺氧程度；制作牙周組織切片，HE染色觀察大鼠左側上頜第二磨牙牙周組織的炎性變化及牙槽骨的吸收情況；免疫組織化學法檢測各實驗組大鼠牙周組織內IL-1β和IL-17的表達情況，通過計算IL-1β和IL-17平均陽性細胞率來評估表達水平。 結果 1.血糖及血清ACTH水平的改變 單純應激組及牙周炎+應激組血糖及血清ACTH在2和4周時明顯高于正常對照組和牙周炎組（p＜0.01）；單純應激組在6和8周時血糖恢復正常水平（p＞0.05），但牙周炎+應激組血糖水平仍高于正常對照組(p＜0.01）和牙周炎組（p＜0.05）；單純應激組及牙周炎+應激組在6和8周時血清ACTH下降，但仍較正常對照組和牙周炎組高（p＜0.05）。 2. LDH及其同工酶LDH1水平的改變 牙周炎+應激組血清LDH在各時點明顯高于正常對照組和牙周炎組（p＜0.01）；單純應激組除了在2周時明顯高于正常對照組和牙周炎組（p＜0.01）外，在4、6和8周時血清LDH水平與正常對照組和牙周炎組無顯著性差異（p＞0.05）。牙周炎+應激組血清LDH1在各時點均明顯低于正常對照組和牙周炎組（p＜0.01）；單純應激組除了在2周時明顯低于正常對照組和牙周炎組（p＜0.01）外，在4、6和8周時血清LDH1水平與正常對照組和牙周炎組無顯著性差異（p＞0.05）。 3.大體標本觀察 正常對照組和單純應激組大鼠牙周組織均未見明顯的炎癥改變；實驗性牙周炎組可見牙齦中度萎縮及附著喪失；牙周炎+應激組牙周組織破壞嚴重，可見重度牙齦萎縮及附著喪失，破壞累及兩側鄰牙牙周組織。 4.組織學改變 正常對照組和單純應激組牙齦及牙槽骨均無明顯改變；牙周炎+應激組牙齦組織的炎癥及牙槽骨破壞程度在4、6和8周時明顯高于牙周炎組。 5. IL-1β和IL-17免疫組化染色結果： 牙周炎組和牙周炎+應激組IL-1β和IL-17平均陽性細胞率在各時間點顯著高于正常對照組和單純應激組（p＜0.05）；4、6和8周時牙周炎+應激組IL-1β和IL-17平均陽性細胞率明顯著高于牙周炎組（p＜0.05）。正常對照組IL-1β和IL-17在各時間點平均陽性細胞率比較單純應激組無顯著性差異（p＞0.05）； 結論 1.單純的應激刺激不會導致牙周炎的發(fā)生； 2.應激刺激能加重牙周組織的炎癥程度和牙周組織的破壞程度； 3.應激刺激可能通過增加IL-1β和IL-17的表達加重牙周組織的炎癥和破壞； 4.應激刺激可能通過降低牙周組織氧代謝水平加重大鼠牙周炎癥程度。 本研究中，我們研究的數據表明大鼠動物模型牙周炎癥嚴重程度與心理應激及牙周組織缺氧有關。此外，降低心理應激水平對口腔健康可能有重要作用。據我們所知，本研究首次證實了心理應激可誘導形成牙周組織缺氧微環(huán)境，IL-1β與IL-17在心理應激的實驗性牙周炎動物模型中出現高表達。心理應激影響牙周疾病的機制還有待進一步的研究。
【學位單位】：暨南大學
【學位級別】：碩士
【學位年份】：2012
【中圖分類】：R781.4
【部分圖文】：

1.1 血糖水平改變見表 1，結果表明單純應激組及牙周炎+應激組血糖在 2 和 4 周時明顯高于正常對照組和牙周炎組（p＜0.01）；單純應激組在 6 和 8 周時血糖恢復正常水平（p＞0.05），但牙周炎+應激組血糖水平仍高于正常對照組(p＜0.01）和牙周炎組（p＜0.05）。表 1 各實驗組和對照組大鼠血糖水平的變化（ x ± s，n=5）Tab 1 Changes of blood glucose level in each group at different times（ x ± s，n=5）GroupBlood glucose level （mmol/L）2 weeks 4 weeks 6 weeks 8 weeksControl 5.9±1.2 5.8±1.3 6.0±1.2 5.9±1.5Periodontitis 5.7±1.5 5.9±1.4 5.9±1.4 5.7±1.6Stress 8.3±1.1▲8.1±1.2▲6.3±1.5▽6.1±1.3▽Periodontitis+ stress 8.6±1.3▲8.0±1.4▲8.2±1.4▲8.9±1.7▲▲p＜0.01，vs control and periodontitis group；▽p＞0.05，vs control and periodontitis group.

表 2 各實驗組和對照組大鼠血清 ATCH 水平的變化（ x ± s，n=5）Fig 2 Changes of ATCH concentration in rat serum in each group at different times（ x ± s，n=5）GroupATCH(pg/ml)2 weeks 4 weeks 6 weeks 8 weeksControl 556.2±54.2 524.8±63.3 525.6±53.2 525.8±63.5Periodontitis 525.1±51.5 526.1±53.6 525.9±64.1 526.1±53.7Stress 1532.7±116.4▲1495.9±115.1▲1120.7±134.2△1135.7±132.2△Periodontitis+stress1542.3±142.5▲1538.01±136.1▲1509.3±134.4▲1564.3±151.7▲▲ p＜0.01，vs control and periodontitis group；△p＜0.05，vs control and periodontitis group

性差異（p＞0.05）。表 3 各實驗組和對照組大鼠血清 LDH 水平的變化（ x ± s，n=5）Tab 3 Changes of LDH serum concentration in rat in each group at different times points（ x n=5）GroupLDH(U/L)2 weeks 4 weeks 6 weeks 8 weeksControl 358.2±78.5 360.3±71.5 346.6±75.6 356.8±81.4Periodontitis 368.7±76.2 370.8±61.3 361.2±78.5 366.8±71.2Stress 668.5±78.2▲358.6±55.4▽378.8±53.7▽386.8±69.0▽Periodontitis+stress768.7.7±78.5▲737.1±81.3▲751.2±78.5▲785.4±81.2▲▲p＜0.01，vs control and periodontitis group；▽p＞0.05，vs control and periodontitis grou
【參考文獻】

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本文編號：2856591