目的 建立大鼠實驗性牙周炎模型，與此同時對大鼠予以心理應(yīng)激刺激，觀察并比較大鼠的牙周組織學(xué)改變，同時檢測應(yīng)激指標(biāo)，包括血糖、血清促腎上腺皮質(zhì)激素(adrenocorticotrophic hormone，ACTH)的水平，探討心理應(yīng)激對牙周炎的影響；運用免疫組織化學(xué)法檢測牙周組織白介素-1β（interleukin-1β，IL-1β）、白介素-17（interleukin-17，IL-17）的表達水平，探討心理應(yīng)激對牙周免疫功能的影響；通過檢測大鼠血清乳酸脫氫酶(lactic dehydrogenase，LDH)及其同工酶乳酸脫氫酶1(lactic dehydrogenase1，LDH1)的水平來評估機體缺氧程度，探討心理應(yīng)激對牙周炎氧代謝影響的機制。研究結(jié)果對于闡明心理應(yīng)激與牙周炎的關(guān)系以及改進牙周病治療方案有一定的指導(dǎo)意義。 方法 清潔級（specific pathogen-free,SPF）4周齡雄性Wistar大鼠80只，隨機分為4組：1）正常對照組（normal control group），該組大鼠正常喂養(yǎng)，牙周不做特殊處理；2）單純應(yīng)激組（stress-stimulation group）：該組大鼠牙周不做特殊處理，與此同時，給予心理應(yīng)激刺激；3）實驗性牙周炎組（experimental periodontitis group）：用浸有牙周致病菌的絲線結(jié)扎左側(cè)上頜第二磨牙牙頸部復(fù)制牙周炎模型；4）牙周炎＋應(yīng)激組（periodontitis withstress-stimulation group）：該組大鼠按實驗性牙周炎組方法復(fù)制牙周炎模型，同時對大鼠予以心理應(yīng)激刺激。設(shè)建模后2、4、6和8周末為四個時間點，四個組于各時間點分批處死，每時間點每組處死的動物數(shù)為5只。大鼠處死前尾靜脈采血檢測血糖濃度，心臟采血檢測血清ACTH、LDH及其同工酶LDH1，評估機體應(yīng)激狀況及組織的缺氧程度；制作牙周組織切片，HE染色觀察大鼠左側(cè)上頜第二磨牙牙周組織的炎性變化及牙槽骨的吸收情況；免疫組織化學(xué)法檢測各實驗組大鼠牙周組織內(nèi)IL-1β和IL-17的表達情況，通過計算IL-1β和IL-17平均陽性細胞率來評估表達水平。 結(jié)果 1.血糖及血清ACTH水平的改變 單純應(yīng)激組及牙周炎+應(yīng)激組血糖及血清ACTH在2和4周時明顯高于正常對照組和牙周炎組（p＜0.01）；單純應(yīng)激組在6和8周時血糖恢復(fù)正常水平（p＞0.05），但牙周炎+應(yīng)激組血糖水平仍高于正常對照組(p＜0.01）和牙周炎組（p＜0.05）；單純應(yīng)激組及牙周炎+應(yīng)激組在6和8周時血清ACTH下降，但仍較正常對照組和牙周炎組高（p＜0.05）。 2. LDH及其同工酶LDH1水平的改變 牙周炎+應(yīng)激組血清LDH在各時點明顯高于正常對照組和牙周炎組（p＜0.01）；單純應(yīng)激組除了在2周時明顯高于正常對照組和牙周炎組（p＜0.01）外，在4、6和8周時血清LDH水平與正常對照組和牙周炎組無顯著性差異（p＞0.05）。牙周炎+應(yīng)激組血清LDH1在各時點均明顯低于正常對照組和牙周炎組（p＜0.01）；單純應(yīng)激組除了在2周時明顯低于正常對照組和牙周炎組（p＜0.01）外，在4、6和8周時血清LDH1水平與正常對照組和牙周炎組無顯著性差異（p＞0.05）。 3.大體標(biāo)本觀察 正常對照組和單純應(yīng)激組大鼠牙周組織均未見明顯的炎癥改變；實驗性牙周炎組可見牙齦中度萎縮及附著喪失；牙周炎+應(yīng)激組牙周組織破壞嚴重，可見重度牙齦萎縮及附著喪失，破壞累及兩側(cè)鄰牙牙周組織。 4.組織學(xué)改變 正常對照組和單純應(yīng)激組牙齦及牙槽骨均無明顯改變；牙周炎+應(yīng)激組牙齦組織的炎癥及牙槽骨破壞程度在4、6和8周時明顯高于牙周炎組。 5. IL-1β和IL-17免疫組化染色結(jié)果： 牙周炎組和牙周炎+應(yīng)激組IL-1β和IL-17平均陽性細胞率在各時間點顯著高于正常對照組和單純應(yīng)激組（p＜0.05）；4、6和8周時牙周炎+應(yīng)激組IL-1β和IL-17平均陽性細胞率明顯著高于牙周炎組（p＜0.05）。正常對照組IL-1β和IL-17在各時間點平均陽性細胞率比較單純應(yīng)激組無顯著性差異（p＞0.05）； 結(jié)論 1.單純的應(yīng)激刺激不會導(dǎo)致牙周炎的發(fā)生； 2.應(yīng)激刺激能加重牙周組織的炎癥程度和牙周組織的破壞程度； 3.應(yīng)激刺激可能通過增加IL-1β和IL-17的表達加重牙周組織的炎癥和破壞； 4.應(yīng)激刺激可能通過降低牙周組織氧代謝水平加重大鼠牙周炎癥程度。 本研究中，我們研究的數(shù)據(jù)表明大鼠動物模型牙周炎癥嚴重程度與心理應(yīng)激及牙周組織缺氧有關(guān)。此外，降低心理應(yīng)激水平對口腔健康可能有重要作用。據(jù)我們所知，本研究首次證實了心理應(yīng)激可誘導(dǎo)形成牙周組織缺氧微環(huán)境，IL-1β與IL-17在心理應(yīng)激的實驗性牙周炎動物模型中出現(xiàn)高表達。心理應(yīng)激影響牙周疾病的機制還有待進一步的研究。
【學(xué)位單位】：暨南大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2012
【中圖分類】：R781.4
【部分圖文】：

1.1 血糖水平改變見表 1，結(jié)果表明單純應(yīng)激組及牙周炎+應(yīng)激組血糖在 2 和 4 周時明顯高于正常對照組和牙周炎組（p＜0.01）；單純應(yīng)激組在 6 和 8 周時血糖恢復(fù)正常水平（p＞0.05），但牙周炎+應(yīng)激組血糖水平仍高于正常對照組(p＜0.01）和牙周炎組（p＜0.05）。表 1 各實驗組和對照組大鼠血糖水平的變化（ x ± s，n=5）Tab 1 Changes of blood glucose level in each group at different times（ x ± s，n=5）GroupBlood glucose level （mmol/L）2 weeks 4 weeks 6 weeks 8 weeksControl 5.9±1.2 5.8±1.3 6.0±1.2 5.9±1.5Periodontitis 5.7±1.5 5.9±1.4 5.9±1.4 5.7±1.6Stress 8.3±1.1▲8.1±1.2▲6.3±1.5▽6.1±1.3▽Periodontitis+ stress 8.6±1.3▲8.0±1.4▲8.2±1.4▲8.9±1.7▲▲p＜0.01，vs control and periodontitis group；▽p＞0.05，vs control and periodontitis group.

表 2 各實驗組和對照組大鼠血清 ATCH 水平的變化（ x ± s，n=5）Fig 2 Changes of ATCH concentration in rat serum in each group at different times（ x ± s，n=5）GroupATCH(pg/ml)2 weeks 4 weeks 6 weeks 8 weeksControl 556.2±54.2 524.8±63.3 525.6±53.2 525.8±63.5Periodontitis 525.1±51.5 526.1±53.6 525.9±64.1 526.1±53.7Stress 1532.7±116.4▲1495.9±115.1▲1120.7±134.2△1135.7±132.2△Periodontitis+stress1542.3±142.5▲1538.01±136.1▲1509.3±134.4▲1564.3±151.7▲▲ p＜0.01，vs control and periodontitis group；△p＜0.05，vs control and periodontitis group

性差異（p＞0.05）。表 3 各實驗組和對照組大鼠血清 LDH 水平的變化（ x ± s，n=5）Tab 3 Changes of LDH serum concentration in rat in each group at different times points（ x n=5）GroupLDH(U/L)2 weeks 4 weeks 6 weeks 8 weeksControl 358.2±78.5 360.3±71.5 346.6±75.6 356.8±81.4Periodontitis 368.7±76.2 370.8±61.3 361.2±78.5 366.8±71.2Stress 668.5±78.2▲358.6±55.4▽378.8±53.7▽386.8±69.0▽Periodontitis+stress768.7.7±78.5▲737.1±81.3▲751.2±78.5▲785.4±81.2▲▲p＜0.01，vs control and periodontitis group；▽p＞0.05，vs control and periodontitis grou
【參考文獻】

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本文編號：2856591