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hTERT啟動(dòng)子誘導(dǎo)TRAIL基因靶向表達(dá)治療涎腺腫瘤的實(shí)驗(yàn)研究

發(fā)布時(shí)間:2020-10-19 10:44
   腫瘤基因治療是近年來的研究熱點(diǎn),其中通過轉(zhuǎn)基因恢復(fù)腫瘤細(xì)胞的凋亡程序是一項(xiàng)有意義的策略,但基因治療缺乏靶向性在一定程度上限制了其在臨床上的應(yīng)用。端粒酶作為腫瘤治療的新靶點(diǎn),在85%以上的人腫瘤細(xì)胞和永生化細(xì)胞具有高活性,其最主要的成分——人端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶(hTERT)啟動(dòng)子能有效地誘導(dǎo)抗腫瘤基因在腫瘤細(xì)胞中高效、靶向表達(dá)。我們?cè)趪?guó)內(nèi)外首次應(yīng)用免疫組織化學(xué)技術(shù)對(duì)涎腺腫瘤——腺樣囊性癌的端粒酶表達(dá)情況進(jìn)行研究,證實(shí)其高表達(dá)端粒酶活性,然后利用含有hTERT 啟動(dòng)子的真核表達(dá)質(zhì)粒載體pACTERT-TRAIL 和腺病毒載體AdTERT-TRAIL 轉(zhuǎn)染腺樣囊性癌細(xì)胞株SACC-83 細(xì)胞,證明hTERT 啟動(dòng)子確能在SACC-83 細(xì)胞中靶向表達(dá)促凋亡基因——TRAIL 基因,并誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡,同時(shí)還能消除促凋亡基因?qū)φ<?xì)胞的毒性。這對(duì)我們下一步進(jìn)行動(dòng)物體內(nèi)抑瘤實(shí)驗(yàn),及研究對(duì)其他涎腺腫瘤的靶向基因治療奠定了基礎(chǔ)。
【學(xué)位單位】:吉林大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:博士
【學(xué)位年份】:2005
【中圖分類】:R739.8
【部分圖文】:

誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,機(jī)理,信號(hào),腫瘤細(xì)胞


31圖1 死亡受體信號(hào)誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡機(jī)理1.4 免疫基因治療它是指利用基因進(jìn)行免疫治療,包括細(xì)胞因子基因治療、制備腫瘤DNA疫苗等。由于在腫瘤的發(fā)生發(fā)展過程中存在著機(jī)體免疫系統(tǒng)對(duì)腫瘤細(xì)胞的免疫耐受狀態(tài),而這種狀態(tài)可能源于腫瘤細(xì)胞本身的免疫性不強(qiáng)(如MHC表達(dá)不足),也可源于抗原遞呈細(xì)胞(APC)不能提供足夠的刺激信號(hào)(如B7),或者機(jī)體免疫因子分泌不足等。因此可以通過以下方法糾正機(jī)體腫瘤免疫的耐受狀態(tài)[74-76]:?

啟動(dòng)子結(jié)構(gòu),端粒酶


基因治療中將具有廣闊的應(yīng)用前景,由此進(jìn)行的基因治療是一項(xiàng)非常有前途的腫瘤治療策略。圖2 端粒酶啟動(dòng)子結(jié)構(gòu)圖腫瘤的細(xì)胞凋亡被阻斷,使其具有了無限增殖的能力,因此,重建腫瘤細(xì)胞的凋亡程序可能是腫瘤基因治療的一項(xiàng)有意義的策略[101-105]。Gu等[104]證實(shí),hTERT啟動(dòng)子核心序列控制LacZ基因,在肺癌、腸癌、宮頸癌共5種腫瘤細(xì)胞中均有高水平表達(dá),在正常細(xì)胞中幾乎未檢測(cè)到陽(yáng)性表達(dá),兩者比值超過500倍?梢奾TERT啟動(dòng)子介導(dǎo)抗腫瘤基因進(jìn)行腫瘤的靶向治療,不僅能保證目的基因的高效表達(dá),而且靶向腫瘤細(xì)胞的特異性也很好。將hTERT啟動(dòng)子驅(qū)動(dòng)的Bax基因通過腺病毒載體轉(zhuǎn)染腫瘤細(xì)胞,進(jìn)行體內(nèi)外實(shí)驗(yàn),結(jié)果同樣證實(shí)hTERT啟動(dòng)子能介導(dǎo)Bax基因在腫瘤細(xì)胞系中高效表達(dá)

腺樣囊性癌,胞漿內(nèi),癌細(xì)胞


Fig 1-1. SACC showing positive staining of hTERT in tumor cells(SABC×20)圖 1-1. 腺樣囊性癌 hTERT 陽(yáng)性表達(dá)主要位于癌細(xì)胞的胞漿內(nèi)(SABC×20)
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本文編號(hào):2847099

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