發(fā)布時間：2020-10-16 07:40

　　 目的觀察小干擾RNA(small interfering RNA, siRNA)抑制血管內(nèi)皮生長因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表達(dá)對裸鼠皮下人舌癌Tca8113細(xì)胞移植瘤的治療作用。 方法構(gòu)建人舌癌Tca8113細(xì)胞20只裸鼠皮下移植瘤模型,隨機分為4組。將兩對針對VEGF的siRNA真核表達(dá)載體(Pu-VEGF-siRNA1,Pu-VEGF-siRNA2)脂質(zhì)體法作瘤體內(nèi)及瘤周注射;以注射空質(zhì)粒組作實驗對照組;未注射組作空白對照組。觀察各組裸鼠腫瘤生長情況。注射每3天1次共10次,最后1次注射3天后測量瘤體積,剝離瘤體并稱重,流式細(xì)胞儀檢測腫瘤細(xì)胞懸液的細(xì)胞周期比例, RT-PCR檢測瘤組織VEGF-mRNA表達(dá),免疫印跡技術(shù)(Western blot)檢測瘤組織VEGF蛋白表達(dá)。免疫組織化學(xué)法觀察VEGF陽性染色及微血管密度,Tunel法觀察組織細(xì)胞凋亡。 結(jié)果Pu-VEGF-siRNA2組移植瘤體積和瘤重較對照組低,細(xì)胞G1期比例增加,瘤組織VEGF-mRNA表達(dá)及VEGF蛋白表達(dá),組織切片VEGF陽性表達(dá)率,陽性細(xì)胞平均灰度值及微血管密度均較空質(zhì)粒組及空白對照組低(P0.05),并有更多的凋亡細(xì)胞(P0.01)。而Pu-VEGF-siRNA1組未觀察到上述差別(P0.05)。 結(jié)論siRNA能在體內(nèi)抑制舌癌VEGF表達(dá),減少腫瘤血管生成,延緩腫瘤生長。不同的干擾片段體內(nèi)作用效果存在差異。
【學(xué)位單位】：廣西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2009
【中圖分類】：R739.8
【部分圖文】：

型的建立及處理 Tca8113 細(xì)胞用含 10％小牛血清的 RPMI 1640 培養(yǎng)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)增殖。實驗用裸鼠，雌性， 4~6 25～27℃無菌恒溫、恒濕( 45% ～50%) 的半屏障料、飲用水及墊料經(jīng)高壓滅菌處理，每 3 d 更換生長期細(xì)胞胰酶消化吹打離心，調(diào)整濃度至 1×10 30 只裸鼠一側(cè)背部皮下，建立裸鼠皮下人舌癌移大部分成瘤。剝?nèi)∑渲幸恢宦闶蟮囊浦擦�，病理切例及血管竇，并見有核分裂相, 證實為腫瘤組織。

各組荷瘤裸鼠大體觀察

q=0.3447、1.0266， P>0.05。空質(zhì)粒組與空白對照組間各指標(biāo)差別均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）1 2 3 4圖3 人舌癌移植瘤離體觀察: 1: siRNA1組, 2: siRNA2組, 3: 空質(zhì)粒組, 4: 空白對照組。
【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 路學(xué)文;李新明;蔡留意;王文明;解邦杰;;核因子-κB/p65 siRNA介導(dǎo)的舌鱗狀細(xì)胞癌Tca8113細(xì)胞凋亡及相關(guān)分子機制[J];口腔醫(yī)學(xué)研究;2011年09期

2 周曉崗;李熙雷;郭常安;周健;戴文達(dá);董健;陳崢嶸;;小干擾RNA抑制人端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶基因?qū)盒赞D(zhuǎn)化后骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的影響[J];中國臨床醫(yī)學(xué);2011年03期

3 楊何平;張洪武;王君;;改良胸大肌島狀肌皮瓣在舌癌連續(xù)整塊切除術(shù)后缺損修復(fù)中的應(yīng)用[J];口腔醫(yī)學(xué);2011年07期

4 遠(yuǎn)洋;王雪峰;張揚;江祺川;李兵;;SOCS1沉默增強樹突狀細(xì)胞抗喉癌免疫效應(yīng)[J];免疫學(xué)雜志;2011年09期

5 袁成良;劉定海;劉利洪;鄒自英;魏世剛;;RNA干擾抑制樹突狀細(xì)胞CD80和CD86基因表達(dá)研究[J];西部醫(yī)學(xué);2011年08期

6 戴觀榮;李黎霞;唐新智;程黎陽;張玉新;;RNA干擾Hedgehog信號通路對胃癌細(xì)胞增殖和凋亡影響及其機制的探討[J];中華腫瘤防治雜志;2011年05期

7 譚運年;成海恩;金亞平;;Rac1和Rac2參與調(diào)節(jié)人單核細(xì)胞趨化和NADPH氧化酶活性[J];中國生物化學(xué)與分子生物學(xué)報;2011年09期

8 魏炎;郟雁飛;鄭燕;馬曉麗;汪運山;;分化型胚胎軟骨發(fā)育基因1特異性小干擾RNA表達(dá)質(zhì)粒的構(gòu)建和鑒定[J];中國組織工程研究與臨床康復(fù);2011年24期

9 楊愛瓊;王朝莉;李雪婷;謝勇恩;;小干擾RNA抑制bcl-xL表達(dá)對食管癌細(xì)胞化療敏感性的影響[J];中國癌癥防治雜志;2011年02期

10 祁妮娜;白飛虎;;血紅素加氧酶-1小干擾RNA對人胃癌9811-P細(xì)胞體外侵襲的影響[J];中國現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志;2011年17期

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 朱曉杰;硫氧還蛋白系統(tǒng)蛋白在舌癌中的表達(dá)及作用[D];武漢大學(xué);2012年

2 張帆;骨橋蛋白與癌胚抗原相關(guān)粘附分子5在舌癌組織中的表達(dá)及相關(guān)性研究[D];山東大學(xué);2012年

3 劉大慶;TNFR1/DED融合蛋白介導(dǎo)舌癌細(xì)胞凋亡的研究[D];中國人民解放軍第四軍醫(yī)大學(xué);2003年

4 彭波;舌癌耐藥相關(guān)新基因（TCRP1）多克隆抗體的制備及其相互作用蛋白的篩選和鑒定[D];中南大學(xué);2012年

5 倪勤;shRNA表達(dá)框的快速制備及其在抗HBV相關(guān)研究中的應(yīng)用[D];浙江大學(xué);2004年

6 張東;半乳糖凝集素-3在舌癌侵襲和轉(zhuǎn)移中的作用及機制研究[D];山東大學(xué);2012年

7 周金子;VEGF小干擾RNA抑制兔角膜新生血管的實驗研究[D];中南大學(xué);2008年

8 郭萬峰;應(yīng)用基因芯片篩選肺癌細(xì)胞輻射增敏分子藥靶的研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2005年

9 周曉彤;利用siRNA抑制NF-κB p65蛋白的表達(dá)對Ⅱ型血管內(nèi)皮細(xì)胞激活的影響的研究[D];蘇州大學(xué);2005年

10 應(yīng)若素;小干擾RNA在乙型肝炎病毒感染小鼠中的抗病毒作用[D];中南大學(xué);2006年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 李敬;VEGFsiRNA對人舌癌Tca8113細(xì)胞移植瘤生長影響的研究[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2009年

2 李鴻藝;舌癌復(fù)發(fā)的危險因素分析及其侵犯范圍研究[D];中南大學(xué);2010年

3 胡守瑞;舌癌復(fù)發(fā)相關(guān)因素臨床分析[D];新疆醫(yī)科大學(xué);2012年

4 宋永海;上皮鈣粘附素、基質(zhì)金屬蛋白酶-9、生存素在不同預(yù)后舌癌中表達(dá)的初步研究[D];中南大學(xué);2010年

5 安（韋華）;裸鼠舌癌正位模型的建立及抗癌藥物敏感性研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2012年

6 薛立偉;骨形態(tài)發(fā)生蛋白2對舌癌Tca8113細(xì)胞的作用及其機制研究[D];山東大學(xué);2010年

7 周楊;頸部不同清掃方式對舌癌生存率的影響分析[D];新疆醫(yī)科大學(xué);2010年

8 吳叔文;細(xì)胞內(nèi)表達(dá)的小干擾RNA靶向丙肝病毒5’保守區(qū)的研究[D];武漢大學(xué);2003年

9 郅克謙;化療對舌癌細(xì)胞凋亡和細(xì)胞增殖影響的研究[D];新疆醫(yī)科大學(xué);2001年

10 田鑫;cN_0舌癌頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)因素及其外科處理[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2012年

本文編號：2842965