牙齒受外力作用的大小對(duì)其本身及支持組織的健康至關(guān)重要，在臨床修復(fù)和正畸加力過程中，恢復(fù)適當(dāng)?shù)囊Ш狭瓦x擇大小適宜的矯治力尤顯重要。當(dāng)牙齒受力時(shí)，外力通過牙周膜傳遞和分散至頜骨，從而引發(fā)牙周組織對(duì)外力作用的生理應(yīng)答。牙周膜成纖維細(xì)胞是構(gòu)成牙周膜的主體細(xì)胞，在牙周組織的改建過程中發(fā)揮極其重要的作用，研究應(yīng)力對(duì)HPDLF功能和結(jié)構(gòu)的影響及應(yīng)力在HPDLF的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑具有重要意義。 目的：本研究采用Forcel四點(diǎn)彎曲加力裝置，構(gòu)建人牙周膜成纖維細(xì)胞體外培養(yǎng)—力學(xué)刺激模型，對(duì)人牙周膜成纖維細(xì)胞施加不同動(dòng)態(tài)張、壓應(yīng)力刺激，觀察機(jī)械力刺激對(duì)Ⅰ型膠原、纖連蛋白和整合素β1mRNA及蛋白表達(dá)的影響以及細(xì)胞骨架的變化。探討人牙周膜成纖維細(xì)胞在機(jī)械力作用下的生物學(xué)行為變化，為進(jìn)一步闡明牙周膜在咬合力、矯治力作用下的適應(yīng)性改建機(jī)理和機(jī)械力信號(hào)在細(xì)胞內(nèi)的轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制提供理論依據(jù)。 方法：(1)采用刮取牙根中1／3牙周膜組織的取材方法，采用Ⅰ型膠原酶消化+組織塊貼附法進(jìn)行hPDLF原代培養(yǎng)，通過傳代對(duì)細(xì)胞分離純
【學(xué)位單位】：四川大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位年份】：2006
【中圖分類】：R78
【部分圖文】：

3加力采用華西口腔醫(yī)院正畸科與成都電子科技大學(xué)聯(lián)合開發(fā)的Focrel四點(diǎn)彎曲加力裝置(圖2.1.1)，對(duì)接種了細(xì)胞的加力板加力，頻率.0SHz，位移.05們n們n，加力板變形量1000ps恤ni(細(xì)胞變形量0.1%)，，位移In匡們n，加力板變形量2000pSartni(細(xì)胞變形量.02%)，位移2們n們n，加力板變形量4000“S如ni(細(xì)胞變形量.04%)

四川大學(xué)華西口腔醫(yī)學(xué)院博士學(xué)位論文驗(yàn)分別采用55℃30see作為退火期。45次循環(huán)的擴(kuò)增反應(yīng)結(jié)束后，統(tǒng)將采集到的每一循環(huán)反應(yīng)時(shí)的各反應(yīng)管的熒光強(qiáng)度增長(zhǎng)指(D助)進(jìn)行分析，繪制每一反應(yīng)管的擴(kuò)增動(dòng)力學(xué)曲線。根據(jù)動(dòng)力線確定每個(gè)樣品管中熒光強(qiáng)度增加到某一特定闡值(threshofd)擴(kuò)增循環(huán)數(shù)(Ct值，圖2.L2)，根據(jù)ct值與標(biāo)準(zhǔn)模板初始拷貝的值作圖，得到該樣品的標(biāo)準(zhǔn)曲線(圖2，L3)。

圖2.1.4對(duì)照及加力組總RNA提取物電泳圖規(guī)pRc結(jié)果圖2.1.5所示為I型膠原3%瓊脂糖凝膠電泳結(jié)果，p清晰亮度不同條帶，說(shuō)明引物設(shè)計(jì)合成無(wú)誤，I型模板可用于定量反應(yīng)。瓊脂糖電泳圖中我們可以看出目的基因在圖中的亮，表明其含量在對(duì)照組和加力組中有差異，但是由于PCR反應(yīng)平臺(tái)期的問題，使常規(guī)PCR反應(yīng)用以定量達(dá)量差異的方法準(zhǔn)確性受到質(zhì)疑。pCR結(jié)果

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本文編號(hào)：2830477