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體外不同動態(tài)張、壓應(yīng)力刺激調(diào)控人牙周膜成纖維細胞功能和結(jié)構(gòu)的實驗研究

發(fā)布時間:2020-09-30 00:25
   牙齒受外力作用的大小對其本身及支持組織的健康至關(guān)重要,在臨床修復(fù)和正畸加力過程中,恢復(fù)適當?shù)囊Ш狭瓦x擇大小適宜的矯治力尤顯重要。當牙齒受力時,外力通過牙周膜傳遞和分散至頜骨,從而引發(fā)牙周組織對外力作用的生理應(yīng)答。牙周膜成纖維細胞是構(gòu)成牙周膜的主體細胞,在牙周組織的改建過程中發(fā)揮極其重要的作用,研究應(yīng)力對HPDLF功能和結(jié)構(gòu)的影響及應(yīng)力在HPDLF的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑具有重要意義。 目的:本研究采用Forcel四點彎曲加力裝置,構(gòu)建人牙周膜成纖維細胞體外培養(yǎng)—力學(xué)刺激模型,對人牙周膜成纖維細胞施加不同動態(tài)張、壓應(yīng)力刺激,觀察機械力刺激對Ⅰ型膠原、纖連蛋白和整合素β1mRNA及蛋白表達的影響以及細胞骨架的變化。探討人牙周膜成纖維細胞在機械力作用下的生物學(xué)行為變化,為進一步闡明牙周膜在咬合力、矯治力作用下的適應(yīng)性改建機理和機械力信號在細胞內(nèi)的轉(zhuǎn)導(dǎo)機制提供理論依據(jù)。 方法:(1)采用刮取牙根中1/3牙周膜組織的取材方法,采用Ⅰ型膠原酶消化+組織塊貼附法進行hPDLF原代培養(yǎng),通過傳代對細胞分離純
【學(xué)位單位】:四川大學(xué)
【學(xué)位級別】:博士
【學(xué)位年份】:2006
【中圖分類】:R78
【部分圖文】:

四點彎曲,細胞變形,變形量,加力裝置


3加力采用華西口腔醫(yī)院正畸科與成都電子科技大學(xué)聯(lián)合開發(fā)的Focrel四點彎曲加力裝置(圖2.1.1),對接種了細胞的加力板加力,頻率.0SHz,位移.05們n們n,加力板變形量1000ps恤ni(細胞變形量0.1%),,位移In匡們n,加力板變形量2000pSartni(細胞變形量.02%),位移2們n們n,加力板變形量4000“S如ni(細胞變形量.04%)

基線,交點,反應(yīng)管,示意圖


四川大學(xué)華西口腔醫(yī)學(xué)院博士學(xué)位論文驗分別采用55℃30see作為退火期。45次循環(huán)的擴增反應(yīng)結(jié)束后,統(tǒng)將采集到的每一循環(huán)反應(yīng)時的各反應(yīng)管的熒光強度增長指(D助)進行分析,繪制每一反應(yīng)管的擴增動力學(xué)曲線。根據(jù)動力線確定每個樣品管中熒光強度增加到某一特定闡值(threshofd)擴增循環(huán)數(shù)(Ct值,圖2.L2),根據(jù)ct值與標準模板初始拷貝的值作圖,得到該樣品的標準曲線(圖2,L3)。

電泳圖,總RNA提取,電泳圖


圖2.1.4對照及加力組總RNA提取物電泳圖規(guī)pRc結(jié)果圖2.1.5所示為I型膠原3%瓊脂糖凝膠電泳結(jié)果,p清晰亮度不同條帶,說明引物設(shè)計合成無誤,I型模板可用于定量反應(yīng)。瓊脂糖電泳圖中我們可以看出目的基因在圖中的亮,表明其含量在對照組和加力組中有差異,但是由于PCR反應(yīng)平臺期的問題,使常規(guī)PCR反應(yīng)用以定量達量差異的方法準確性受到質(zhì)疑。pCR結(jié)果

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1 吉玲玲;周洪;李昂;饒國州;;rhBMP2作用下人牙周膜成纖維細胞中cbfα1的表達研究[J];中國美容醫(yī)學(xué);2011年06期

2 陳建明;蘭澤棟;劉嶸;;牙周膜成纖維細胞對外周血單個核細胞分化的影響[J];口腔醫(yī)學(xué)研究;2011年09期

3 吉玲玲;鮑慶江;李昂;饒國州;周洪;;rhBMP2作用下人牙周膜成纖維細胞中OCIF、ODF的表達研究[J];中國美容醫(yī)學(xué);2011年08期

4 陳彬;李琥;穆超;侯偉;陳文靜;;大鼠正畸牙移動中HIF-1_α的表達[J];口腔生物醫(yī)學(xué);2011年02期

5 米叢波;潘旭;錢雅婧;胡明華;劉紅;聶晶;;正畸力作用下炎性牙周組織中白介素-8的表達[J];中國美容醫(yī)學(xué);2011年07期

6 劉大軍;王燕一;;有限元法在口腔固定修復(fù)研究中的應(yīng)用[J];中華老年口腔醫(yī)學(xué)雜志;2011年02期

7 潘旭;米叢波;劉紅;錢雅婧;聶晶;;正畸牙移動過程中牙周組織白細胞介素8的表達[J];中國組織工程研究與臨床康復(fù);2011年20期

8 吳瑩瑩;劉洪臣;;TNF-α、IL-1β及IL-6與糖尿病及牙周炎之間的關(guān)系[J];中華老年口腔醫(yī)學(xué)雜志;2011年02期

9 黃國偉;;股骨近端鎖定鋼板治療轉(zhuǎn)子下骨折40例療效分析[J];中國醫(yī)藥科學(xué);2011年16期

10 向敏;王建梅;顧瑤華;;牙周炎與糖尿病相互作用影響的分子機制研究進展[J];抗感染藥學(xué);2011年03期

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1 何輝;樊瑜波;鄒遠文;宋錦t

本文編號:2830477


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