【摘要】：目的使用全反式視黃酸(all-trans retinoic acid,atRA)誘導(dǎo)腭發(fā)育敏感期的小鼠作為模型,利用血清蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù),對血清中差異表達(dá)的蛋白質(zhì)和多肽進(jìn)行鑒定和驗(yàn)證,探討腭裂發(fā)病機(jī)制。 方法60只C57BL/6J系孕鼠,妊娠10天給予全反式視黃酸(100 mg/kg),建立小鼠腭裂模型,采集妊娠14天孕鼠血清。實(shí)驗(yàn)分為三組：全反式視黃酸組、空白組、植物油對照組。采用雙向電泳(2-DE)、偶聯(lián)基質(zhì)輔助激光解吸電離—飛行時(shí)間質(zhì)譜(MALDI-TOF MS)技術(shù),尋找腭裂孕鼠血清差異表達(dá)蛋白質(zhì)。并通過Western blot對試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行驗(yàn)證。 結(jié)果觸珠蛋白β-chain(Haptoglobinβ-chain, Hpβ-chain)和血清淀粉樣P成分(Serum amyloi d P-component, SAP)在全反式視黃酸誘導(dǎo)腭裂孕鼠血清中表達(dá)上調(diào),分別是正常孕鼠血清蛋白含量的2.5和3倍。另外還發(fā)現(xiàn)觸珠蛋白β-chain在全反式視黃酸組上調(diào)表達(dá)的同時(shí)發(fā)生糖基化修飾的變化。Westernblot驗(yàn)證結(jié)果與2-DE結(jié)果相一致。 結(jié)論HPβ-chain和SAP在全反式視黃酸致腭裂孕鼠血清中表達(dá)上調(diào),為進(jìn)一步研究全反式視黃酸致小鼠腭裂畸形的病理機(jī)制打下基礎(chǔ)。同時(shí),發(fā)現(xiàn)HPβ-chain在腭裂孕鼠血清中糖基化修飾改變,提示糖基化修飾在全反式視黃酸致腭裂畸形中具有重要調(diào)控作用。
【學(xué)位授予單位】：蘭州大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2011
【分類號】：R782.21
【圖文】：

GD14孕鼠血清免疫印跡結(jié)果l為空白組，2為atRA組，3為植物油組，由圖可見atRA組的Hp、SAP蛋白表達(dá)明顯比其他兩組上調(diào)

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：2789257