【摘要】： 目的: 牙骨質(zhì)是覆蓋在牙根表面的薄層礦化結(jié)締組織,近年研究表明牙骨質(zhì)基質(zhì)含有牙骨質(zhì)附著蛋白(cementum attachment proteins,CAP)和牙骨質(zhì)蛋白-23(cementum protein-23,CP-23),被認(rèn)為是牙骨質(zhì)特異性分子,具有促進細(xì)胞增殖、分化等多種生物學(xué)作用,因此牙骨質(zhì)本身在促進牙周組織再生中的作用越來越受到重視。因此,本研究擬用人牙周韌帶細(xì)胞(human periodontal ligamentcells,HPDLCs)探討根面原位保留的牙骨質(zhì)對其分化的影響,以期進一步揭示牙骨質(zhì)的功能,并為臨床應(yīng)用中根面保留牙骨質(zhì)提供理論依據(jù)。 方法: 1.選用因正畸拔除的牙齒,組織塊法培養(yǎng)人牙周韌帶細(xì)胞。 2.根片制備:將刮除了牙周韌帶的牙齒的牙根縱辟為兩半,去除牙髓組織。一半徹底刮除根面牙骨質(zhì),暴露牙本質(zhì),作為牙本質(zhì)根片組(PDLCs+D);另一半保留牙骨質(zhì),不暴露其下的牙本質(zhì),作為牙骨質(zhì)根片組(PDLCs+C)。 3.接種第二代牙周韌帶細(xì)胞至根片表面,復(fù)合培養(yǎng)7天后,收集根片上細(xì)胞,提取RNA,RT-PCR檢測兩組細(xì)胞中牙骨質(zhì)附著蛋白(CAP)和牙骨質(zhì)蛋白23(CP-23)基因表達(dá)情況,用β-action作為內(nèi)參照,用軟件測量標(biāo)準(zhǔn)曲線,獲得每組mRNA的表達(dá)量,以每組檢測的mRNA與β-action mRNA之比值表示CAP和CP-23的基因表達(dá)量。 4.取與PDLCs復(fù)合培養(yǎng)7天的牙骨質(zhì)片和牙本質(zhì)片各20個,分別放入半透膜袋內(nèi),植入裸鼠皮下,八周后處死裸鼠取出標(biāo)本,固定、脫鈣,HE染色,觀察牙本質(zhì)片和牙骨質(zhì)片上新生組織形成,透射電鏡觀察新生組織的超微結(jié)構(gòu)。 結(jié)果: 1.PDLCs+C和PDLCs+D中CAPmRNA的表達(dá)量分別是0.00375和0.00325;對CP-23,PDLCs+C和PDLCs+D中CP-23mRNA的表達(dá)量分別是0.000073和0.000000662。統(tǒng)計分析表明兩組間的CAP和CP-23mRNA表達(dá)量均有顯著性差異。 2.HE染色觀察顯示20個牙骨質(zhì)片中有16牙骨質(zhì)片表面有淡染的牙骨質(zhì)樣基質(zhì)形成,牙本質(zhì)片表面無此結(jié)構(gòu)形成,僅有纖維組織形成,與其表面有較大的間隙。 3.透射電鏡表明細(xì)胞附著在新形成的組織表面,核仁深染,細(xì)胞的胞漿內(nèi)有大量的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng),新形成的硬組織與原有牙骨質(zhì)之間有明顯的界限,連接緊密,沒有間隙形成。 結(jié)論: 我們的研究結(jié)果表明根面保留的牙骨質(zhì)可能促進體外培養(yǎng)的人牙周韌帶細(xì)胞向成牙骨質(zhì)細(xì)胞方向分化,提示根面保留牙骨質(zhì)可能有利于牙周組織再生。
【學(xué)位授予單位】：濱州醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2008
【分類號】：R78
【圖文】：

圖1組織塊貼壁7天，組織塊周邊出現(xiàn)少量細(xì)胞e1PDLCswerefound田℃undtheperiodonlta】hg別rnenttissueaftexPlantion

組織塊貼壁7天，組織塊周邊出現(xiàn)少量細(xì)胞

PD正CsPD山Cs」CPDILCs十DPDLCs+C組CP23的表達(dá)量明顯高于PDLCs+D組，且統(tǒng)計學(xué)都有顯著差異(**P<0.01vs.PDLCs:十十P<0.01vs.PDLCs+D)4TheamountofgeneexPressinofCP一23inPDLCs+CgrouPwasmorethanCs+DGrouP，andtherewereallsignifieantdifference(**P<0.olvs.PDLCtP<0.01vs.PDLCs+D)

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前3條

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2 朱國強,吳織芬,王勤濤;聚四氟乙烯膜引導(dǎo)人牙周組織再生的掃描電鏡觀察[J];實用口腔醫(yī)學(xué)雜志;2001年02期

3 宋愛梅,楊丕山,孫欽峰,王欣,徐欣,王力;屏障膜放置時間與牙周再生量關(guān)系的動物實驗研究[J];牙體牙髓牙周病學(xué)雜志;2001年01期

本文編號：2787793