【摘要】：牙周致病菌p.gingivalis的感染與AS的發(fā)病具有緊密的聯(lián)系,且日益受到醫(yī)學(xué)界的關(guān)注。Treg在AS自身免疫應(yīng)答中起到關(guān)鍵作用,然而,在AS的發(fā)生中,P.gingivalis的感染與Treg的關(guān)系還鮮有報(bào)道,不同遺傳型的P.gingivalis與AS發(fā)病之間的關(guān)系也仍不清楚。本實(shí)驗(yàn)通過檢測(cè)P.gingivalis特異性IgG抗體臨床篩選p.gingivalis感染患者,分析P.gingivalis感染與Treg水平和功能的關(guān)系,從而探討感染免疫機(jī)制在牙周炎與AS關(guān)系中的作用。 第一部分牙齦卟啉單胞菌感染動(dòng)脈粥樣硬化患者外周血調(diào)節(jié)性T細(xì)胞分布 目的：分析P.gingivalis感染的AS患者Treg分布情況。 材料與方法：通過臨床檢查及實(shí)驗(yàn)室檢測(cè),篩選出40例P.gingivalis感染的AS患者列為Pg-AS組、32例單純Pgingivalis感染而無AS罹患者為Pg組、29例健康志愿者為HC組,采集患者及健康志愿者外周靜脈血,淋巴細(xì)胞分離液提取外周血單個(gè)核細(xì)胞,通過CD4,CD25,FOXP3流式抗體標(biāo)記并流式細(xì)胞儀檢測(cè)CD4-CD25+T細(xì)胞及CD4+CD25+FOXP3+Treg含量,ELISA方法檢測(cè)患者血漿中TGF-β1濃度,非參數(shù)檢驗(yàn)統(tǒng)計(jì)分析三組患者CD4+CD25+T細(xì)胞及CD4+CD25+FOXP3+Treg含量差異及TGF-b1濃度差異。 結(jié)果：Pg-AS組外周血中CD4+CD25T細(xì)胞含量為4.27%(1.55-10.95%),Pg組為4.85%(1.49-10.80%),HC組為4.56%(1.30-10.60%),各組間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。Pg-AS組CD4+CD25+FOXP3+Treg占CD4+T細(xì)胞含量為1.95%(0.67-4.43%),比Pg組3.38(1.43-7.10)及HC組3.14%(0.78-5.40%)均減少,且差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,而Pg組與HC組間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。Pg-AS組血漿TGF-β1濃度比Pg組及HC組均降低。TGF-β1濃度與之間CD4+CD25+FOXP3+Treg占CD4+T細(xì)胞數(shù)目之間存在正相關(guān)(r=0.615,P0.001)。 結(jié)論：Pg-AS患者外周血CD4+CD25+FOXP3+Treg數(shù)量及功能均降低,AS患者Treg下降與P.gingivalis感染相關(guān)。 第二部分牙齦卟啉單胞菌FimA遺傳型與調(diào)節(jié)性T細(xì)胞分布的關(guān)系 目的：分析P.gingivalis感染的AS患者FimA遺傳型與Treg分布的相關(guān)性,篩選與AS患者Treg下降相關(guān)的優(yōu)勢(shì)遺傳型菌株。 材料與方法：采集Pg-AS組及Pg組患者齦下菌斑,提取細(xì)菌基因組DNA,利用特異性引物,使用聚合酶鏈反應(yīng)(Polymerase Chain Reaction, PCR)方法,檢測(cè)P.gingivalis菌毛蛋白FimA基因型,分析各遺傳型在齦下菌斑的檢出率。由于遺傳型Ⅱ型P.gingivalis檢出率最高,統(tǒng)計(jì)學(xué)分析患者P.gingivalis Ⅱ型菌毛感染與CD4+CD25+FOXP3+Treg分布的關(guān)系。 結(jié)果：Ⅰ-V和Ⅰb型P.gingivalis在Pg-AS組及Pg組患者齦下菌斑的檢出率各不相同,其中Ⅱ型在兩組中的檢出率均最高,分別為65%和59.4%。Pg組中,Ⅱ型P.gingivalis患者CD4+CD25+FOXP3+Treg含量與其他基因型者無差異。Pg-AS組中,Ⅱ型P.gingivalis患者CD4+CD25+FOXP3+Treg含量為1.82%(0.87-3.78%),較其他基因型的患者2.65%(1.17-4.43%)明顯減低,兩者差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)論：慢性牙周炎齦下菌斑中的P.gingivalis主要是Ⅱ型,Ⅱ型遺傳型可能是P.gingivalis與AS患者Treg降低關(guān)系中的主要遺傳型。 綜上所述,本研究篩選Pg-AS患者、Pg患者及HC者,比較三組患者外周血中Treg的含量及功能因子TGF-βi濃度的差異,并分析齦下菌斑P.gingivalis分型與Treg的關(guān)系,結(jié)果表明AS患者對(duì)P.gingivalis的免疫反應(yīng)較強(qiáng),AS患者Treg數(shù)目及功能降低與P.gingivalis感染相關(guān),且Treg的降低可能與Ⅱ型菌毛基因型密切相關(guān)。
【學(xué)位授予單位】：南京大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：R781.4

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本文編號(hào)：2771918