【摘要】：研究背景及目的口腔癌是發(fā)生于人口腔頜面部區(qū)域內(nèi)的腫瘤,其中口腔鱗狀細胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)最多見、惡性程度較、晚期經(jīng)常發(fā)生淋巴結(jié)或者遠處轉(zhuǎn)移,因此OSCC治療起來比較困難并且致死率高。目前急需要對其具體的轉(zhuǎn)移機制進行研究從而降低OSCC的死亡率。電壓門控鈉通道(voltage-gated sodium channels,VGSC)是一種跨膜蛋白,可以控制離子流動穿過細胞膜。它們是可興奮組織中動作電位的關(guān)鍵離子通道,具有重要的生理功能。VGSCs的功能異常將導致機體功能障礙并引發(fā)多種生理疾病。越來越多的文獻報道,電壓門控鈉離子通道在多種轉(zhuǎn)移性癌細胞及癌組織中存在異常的高表達,如前列腺癌、乳腺癌、宮頸癌、卵巢癌等,并且能促進癌細胞的侵襲和轉(zhuǎn)移等行為,另外阻斷VGSC的通道活性也可明顯減少腫瘤細胞的轉(zhuǎn)移,從而推測VGSC與癌細胞的轉(zhuǎn)移等惡性行為有著一定的聯(lián)系。另外多項研究還發(fā)現(xiàn)了一些調(diào)節(jié)VGSC表達和功能的分子機制,如生長因子和激素。其中,血管內(nèi)皮生長因子C(Vascular endothelial growth factor,VEGF-C)可誘導血管生成,促進淋巴管生成和擴張,這與腫瘤轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。并且,VEGF-C的表達水平在多數(shù)侵襲性腫瘤中較高,且與癌癥患者的預后不良緊密相關(guān)。本實驗探討VEGF-C是否可以通過上調(diào)電壓門控鈉通道亞型Nav1.5的表達以促進口腔鱗癌細胞HSC-3的增殖、侵襲及轉(zhuǎn)移。為口腔鱗狀細胞癌轉(zhuǎn)移的分子標志物和治療靶點的臨床開發(fā)提供了新的思路和初步的理論依據(jù)。方法1、采用Western blot方法檢測VEGF-C對口腔鱗癌細胞HSC-3中Nav1.5蛋白表達水平的影響。2、采用q RT-PCR方法檢測VEGF-C對口腔鱗癌細胞HSC-3中Nav1.5 m RNA表達水平的影響。3、使用Transwell實驗檢測VEGF-C和Nav1.5對HSC-3細胞遷移和侵襲的作用。4、使用CCK-8實驗檢測VEGF-C和Nav1.5對HSC-3細胞增殖的作用。結(jié)果1、VEGF-C可以上調(diào)HSC-3細胞中Nav1.5 m RNA和蛋白的表達水平;2、VEGF-C以劑量依賴的方式促進HSC-3細胞的增殖、遷移和侵襲;3、VGSC抑制劑TTX阻斷了VEGF-C對HSC-3細胞增殖、遷移和侵襲的促進作用。結(jié)論血管內(nèi)皮生長因子VEGF-C可以通過上調(diào)Nav1.5表達促進口腔鱗癌細胞HSC-3的增殖、遷移和侵襲能力。
【學位授予單位】：安徽醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2019
【分類號】：R739.8
【圖文】：

結(jié)果-C 上調(diào) HSC-3 細胞中 Nav1.5 蛋白和 mRNA 的表達同濃度的 VEGF-C（50、100、200 ng/l） 處理 HSC-3 細胞蛋白和 RNA。使用 Western blot 法檢測處理后細胞中 Nav1.5 50、100、200 ng/l VEGF-C 刺激 HSC-3 細胞后，Nav1.5 蛋（圖 1）。用 qRT-PCR 方法檢測結(jié)果顯示 50、100、200 ng 細胞后，與對照組 A 組相比，細胞中 Nav1.5 mRNA 水平計學意義（F=49.10,P<0.001）（圖 2）。這些結(jié)果表明 VEG誘導 HSC-3 細胞中 Nav1.5 的表達。

圖 2 不同濃度的 VEGF-C 處理細胞后 Nav1.5 mRNA 水平ression of Nav1.5 mRNAafter treatment with different concen處理組；B：50 ng/LVEGF-C；C：100 ng/LVEGF-C；D：**P<0.01，*** P<0.001 處理促進 HSC-3 細胞的遷移、侵襲ll 法檢測細胞的遷移和侵襲，結(jié)果顯示用 50、100、胞 24h 后，以劑量依賴的方式顯著增強了 HSC-3 細、D 組與 A 組對比）和侵襲能力（圖 4 中的 B、C、-C 上調(diào) Nav1.5 的蛋白和 mRNA 表達的趨勢一致。使異有統(tǒng)計學意義，遷移實驗（F=249.0,P<0.0001），

以劑量依賴的方式顯著增強了 HSC-3 細胞的遷移能力（圖3 中的 B、C、D 組與 A 組對比）和侵襲能力（圖 4 中的 B、C、D 組與 A 組對比），并與 VEGF-C 上調(diào) Nav1.5 的蛋白和 mRNA 表達的趨勢一致。使用方差分析檢驗結(jié)果顯示，差異有統(tǒng)計學意義，遷移實驗（F=249.0,P<0.0001），侵襲實驗（F=479.8，P<0.0001）。

【相似文獻】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 劉琪;孫祖俊;;外周血單個核細胞對口腔鱗癌細胞生長的影響[J];上�？谇会t(yī)學;2016年02期

2 殷豪;鄧小玲;李國陽;石松林;李祺福;許銘炎;;EGFR參與溶血磷脂酸誘導口腔鱗癌細胞整合素β6的表達[J];口腔醫(yī)學研究;2015年08期

3 申俊;柏景坪;王維倩;顧亞軍;;組蛋白去乙�；敢种苿┡c順鉑聯(lián)用激活線粒體信號通路誘導口腔鱗癌細胞的凋亡[J];醫(yī)學研究雜志;2011年02期

4 王曉里;陳瑞梅;王植三;陳文磊;;口腔鱗癌細胞增殖特性的流式細胞光度分析[J];現(xiàn)代口腔醫(yī)學雜志;1989年01期

5 楊舒雯;王宇;楊恭;;斯鈣素2對口腔鱗癌細胞的作用及機制研究[J];中國癌癥雜志;2015年04期

6 陳軍;趙建江;王治平;盤杰;黃宇華;;量子點對口腔鱗癌細胞活性的影響[J];廣東醫(yī)學;2010年20期

7 萬學勤,李宏鳴,龍敏,張炳團,劉愛平;雞新城疫病毒對人類口腔鱗癌細胞的殺傷作用[J];現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學;2004年04期

8 王安訓,黃洪章;腺病毒介導CD/5-FC系統(tǒng)聯(lián)合照射對口腔鱗癌細胞的增敏研究[J];中華放射腫瘤學雜志;2002年03期

9 陳素紅;宿穎;付潔;張辛燕;;姜辣素對人口腔鱗癌細胞抑制作用的研究[J];北京口腔醫(yī)學;2018年05期

10 陳鐘;鄭曉丹;徐勇;;蛋白激酶C激活對口腔鱗癌細胞上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化的影響[J];實用口腔醫(yī)學雜志;2017年05期

相關(guān)會議論文 前10條

1 李明;趙卿;高峰;;魚藤素抑制口腔鱗癌細胞的機制研究[A];2018年中華口腔醫(yī)學會第十次全國口腔黏膜病學術(shù)大會暨第八次全國口腔中西醫(yī)結(jié)合學術(shù)大會論文集[C];2018年

2 龐寶興;金曉明;尚偉;;姜黃素對口腔鱗癌細胞的增殖抑制作用及相關(guān)機制研究[A];第八次全國口腔頜面—頭頸腫瘤會議論文匯編[C];2009年

3 張志光;張謙;何一青;陳詩書;;細胞因子基因修飾人口腔鱗癌細胞的體外生物學行為[A];第一屆全國口腔頜面部腫瘤學術(shù)會議論文匯編[C];2001年

4 傅旭城;陳希彥;文勇;;脂多糖通過YAP/JNK信號通路促進口腔鱗癌細胞的增殖[A];2017全國口腔生物醫(yī)學學術(shù)年會論文匯編[C];2017年

5 何地;陳萬濤;;藤黃酸對口腔鱗癌細胞體外作用的研究[A];第五次全國口腔頜面—頭頸腫瘤學術(shù)研討會論文匯編[C];2006年

6 秦星;張建軍;陳萬濤;;腫瘤相關(guān)成纖維細胞對口腔鱗癌細胞生長和遷移的影響[A];2017全國口腔生物醫(yī)學學術(shù)年會論文匯編[C];2017年

7 方正月;楊軼昕;陳丹;趙丹;唐洪;楊凱;;長鏈非編碼RNA CASC9對人口腔鱗癌細胞生物學行為的影響[A];第十四次中國口腔頜面外科學術(shù)會議論文匯編[C];2018年

8 楊凱;方正月;楊軼昕;陳丹;趙丹;唐洪;;長鏈非編碼RNA CASC9對人口腔鱗癌細胞生物學行為的影響[A];第十二次全國口腔頜面-頭頸腫瘤內(nèi)科及脈管疾病學術(shù)會議暨第二次河南省抗癌協(xié)會口腔頜面腫瘤學會會議論文匯編[C];2018年

9 羅清瓊;胡水清;陳福祥;;TLR3在口腔鱗癌細胞中作用的初步研究[A];中華醫(yī)學會第九次全國檢驗醫(yī)學學術(shù)會議暨中國醫(yī)院協(xié)會臨床檢驗管理專業(yè)委員會第六屆全國臨床檢驗實驗室管理學術(shù)會議論文匯編[C];2011年

10 阮敏;季彤;楊雯君;張陳平;;紫草素誘導口腔鱗癌細胞Tca-8113凋亡及相關(guān)機制的的研究[A];海峽兩岸2008口腔癌診治與修復重建新進展研討會論文集[C];2008年

相關(guān)博士學位論文 前8條

1 申俊;組蛋白去乙�；敢种苿┡c順鉑聯(lián)用對口腔鱗癌細胞作用的體外研究[D];四川大學;2007年

2 張文超;構(gòu)建人CXCL12-KDEL融合基因抑制CXCL12-CXCR4生物軸對口腔鱗癌細胞趨化轉(zhuǎn)移作用的實驗研究[D];天津醫(yī)科大學;2008年

3 周瑜;應(yīng)用熒光探針技術(shù)檢測口腔鱗癌細胞在氧化性應(yīng)激及凋亡過程中谷胱甘肽水平的變化[D];山東大學;2017年

4 王莉莉;microRNA-188作用于靶基因SIX1負調(diào)控ERK信號通路抑制口腔鱗癌細胞的增殖侵襲[D];中國人民解放軍醫(yī)學院;2016年

5 柴娟;P12~(CDK2-AP1)與CD82相互作用對口腔鱗癌細胞OSCC-15及裸鼠移植瘤生長作用的研究[D];第四軍醫(yī)大學;2016年

6 李曉杰;MiR-218-5p通過CD44-ROCK通路抑制口腔鱗癌細胞侵襲[D];大連醫(yī)科大學;2017年

7 高揚;RNA干涉抑制STAT3基因誘導口腔鱗癌細胞發(fā)生凋亡的體內(nèi)外實驗研究[D];吉林大學;2011年

8 宋莉;非損傷微測技術(shù)用于口腔鱗癌細胞凋亡機制研究的實驗探索[D];武漢大學;2015年

相關(guān)碩士學位論文 前10條

1 金佳佳;口腔鱗癌細胞外泌體差異表達lncRNAs的生物信息學分析[D];蘭州大學;2019年

2 李翔;沉默環(huán)狀RNA hsa_circ_0004491表達對口腔鱗癌細胞遷移及侵襲能力影響的實驗研究[D];安徽醫(yī)科大學;2019年

3 毛衛(wèi)佳;VEGF-C上調(diào)電壓門控鈉通道Nav1.5表達促進口腔鱗癌細胞增殖、侵襲和遷移[D];安徽醫(yī)科大學;2019年

4 房芳;原代口腔鱗癌細胞中腫瘤干細胞的分離、培養(yǎng)和鑒定[D];廣西醫(yī)科大學;2018年

5 王世琴;口腔鱗癌細胞外泌體的分離鑒定及基因表達譜分析[D];蘭州大學;2018年

6 孫帥;Hsa_circ_0112879對口腔鱗癌細胞生物學行為影響的實驗研究[D];安徽醫(yī)科大學;2018年

7 龐寶興;姜黃素對人口腔鱗癌細胞的增殖抑制作用及機制研究[D];青島大學;2010年

8 高敬;生物鐘基因Bmal1對口腔鱗癌細胞影響的初步研究[D];重慶醫(yī)科大學;2016年

9 石芳瓊;MICA基因修飾的口腔鱗癌細胞疫苗誘導抗腫瘤免疫應(yīng)答的實驗研究[D];中南大學;2011年

10 劉敏;姜黃素聯(lián)合紫杉醇對人口腔鱗癌細胞的增殖抑制和凋亡誘導作用[D];山東大學;2017年

本文編號：2772058