【摘要】：牙乳頭細(xì)胞作為牙胚發(fā)育過程中唯一具有分化為成牙本質(zhì)細(xì)胞的間充質(zhì)細(xì)胞群體，在牙齒形成特別是牙本質(zhì)形成過程中，扮演著重要的調(diào)節(jié)作用，受到口腔醫(yī)學(xué)研究者的高度重視。國外學(xué)者利用小鼠下頜磨牙牙胚已成功地進(jìn)行了牙乳頭細(xì)胞體外培養(yǎng)并有建株成功的報道，有關(guān)人牙乳頭細(xì)胞體外培養(yǎng)的研究則報道極少。已知許多激素和生長因子參與牙胚的發(fā)育過程，對牙髓細(xì)胞的增殖、分化有一定的調(diào)節(jié)作用，但對牙乳頭細(xì)胞影響的研究甚少。鈣結(jié)合蛋白在牙齒中的分布近年來受到關(guān)注，但在人牙胚中是如何分布的迄今未見報道。本研究圍繞上述問題，利用現(xiàn)代組織細(xì)胞培養(yǎng)、放射免疫測定、原位雜交等技術(shù)手段，首先建立可穩(wěn)定傳代的人牙乳頭細(xì)胞體外培養(yǎng)模型，并在此基礎(chǔ)上，觀察有關(guān)激素和生長因子對該細(xì)胞生長增殖、功能分化等生物學(xué)特性的影響。對人牙胚和牙乳頭細(xì)胞中是否有鈣結(jié)合蛋白—Calbindin-D28k基因表達(dá)進(jìn)行了觀察研究。 1 人牙乳頭細(xì)胞體外培養(yǎng)模型的建立 利用從臨床獲得的合法水囊引產(chǎn)胎兒，胎齡4～6個月，獲取其牙乳頭組織，采用組織塊法在DMEM和RPMI1640兩種培養(yǎng)基中進(jìn)行體外培養(yǎng)，并進(jìn)行較系統(tǒng)的研究。結(jié)果顯示：人牙乳頭細(xì)胞易于從組織塊中游出，原代培養(yǎng)成功率較一般人牙髓細(xì)胞、牙周膜細(xì)胞為高。細(xì)胞在形態(tài)上為成纖維細(xì)胞樣，呈短梭形和星形，掃描電鏡下見細(xì)胞表面有一些微突起，透射電鏡下見細(xì)胞漿內(nèi)有些微絲，核為不規(guī)則形。免疫組織化學(xué)染色角蛋白、肌動蛋白、α-平滑肌蛋白、膠質(zhì)纖維蛋白、神經(jīng)纖維蛋白和骨形成蛋白為陰性，波形絲蛋白、纖維粘連蛋白和EGF受體為陽性，證實為間充質(zhì)來源的細(xì)胞。7種常用凝集素組織化學(xué)染色顯示ConA、WGA和RCA陽性，余為陰性。細(xì)胞可穩(wěn)定連續(xù)傳代，凍存和復(fù)蘇對細(xì)胞形態(tài)、生長狀態(tài)和活性無明顯影響。染色體核型分析顯示細(xì)胞保持了正常人的染色體組型，為二倍體細(xì)胞。
【學(xué)位授予單位】：第四軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：1997
【分類號】：R78
【圖文】：

11,27.二挽若誰生眾功對人牙乳頭細(xì)均姻期的形Ki

2演島索對人牙乳頭細(xì)飽增殖的影咱

論MTT比色法是一種目前被廣泛采用的檢測細(xì)胞生長和存活原理是活細(xì)胞線粒體中的墟拍酸脫氫酶能使外源性的MTT性的藍(lán)紫色結(jié)晶物(Fornalnzna)，并沉積在細(xì)胞中，而死能.洲S0能溶解細(xì)胞中的紫色結(jié)晶物，用酶聯(lián)儀在49如nI波D0值，可間接反映活細(xì)胞數(shù)量.在一定細(xì)胞數(shù)范圍內(nèi)，MTT的量與細(xì)胞數(shù)成正比.其特點(diǎn)是靈敏度高、重復(fù)性好、操作、快速，無放射性污染，與細(xì)胞計數(shù)和核素?fù)饺说确椒ㄓ小�，”，故本組采用了此方法.本組觀察了3種不同因子對體外培養(yǎng)的人牙乳頭細(xì)胞生長果顯示:1，25(0H):腸對細(xì)胞增殖具有抑制作用，其抑制作

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前6條

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本文編號：2750071