【摘要】：[目的] 研究種植體周有益菌和可疑致病菌的生長(zhǎng)曲線,細(xì)菌間相互作用,通過(guò)改良現(xiàn)有的恒化器,設(shè)計(jì)出能構(gòu)建種植體周圍炎齦下菌群生物膜體外模型的新型恒化器,進(jìn)行生物膜基本生物量的測(cè)定以及結(jié)構(gòu)的觀察,為種植體周圍炎的微生物替代療法提供理論依據(jù)。 [方法] 實(shí)驗(yàn)選用血鏈球菌(Streptococcus sanguis, S.s)作為有益菌,牙齦卟啉單胞菌(Porphyromonas gingivalis, P.g)、中間普氏菌(Prevotella intermedia, P.i)作為可疑致病菌,分為細(xì)菌生長(zhǎng)曲線的測(cè)定、抑菌實(shí)驗(yàn)、細(xì)菌連續(xù)培養(yǎng)及生物膜形態(tài)的觀察三個(gè)部分。實(shí)驗(yàn)一分五組,第一組：?jiǎn)尉鶳.g,第二組：?jiǎn)尉鶳.i,第三組：?jiǎn)尉鶶.s,第四組：雙菌P.g+S.s,第五組：雙菌P.i+S.s,測(cè)量其生長(zhǎng)曲線,確定細(xì)菌的對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期。實(shí)驗(yàn)二分三組,第一組：P.g+S.s,第二組：P.i+S.s,每組均設(shè)空白對(duì)照,鈦片用微弧氧化處理模擬種植體表面,通過(guò)抑菌實(shí)驗(yàn),觀察細(xì)菌間相互作用。實(shí)驗(yàn)三分四組,第一組：?jiǎn)尉鶳.g,第二組：?jiǎn)尉鶳.i,第三組：雙菌P.g+S.s,第四組：雙菌P.i+S.s,安裝種植體周圍炎齦下菌群生物膜體外模型恒化器,連續(xù)培養(yǎng)72h,分別在24、48、72h時(shí),通過(guò)活菌計(jì)數(shù)對(duì)各組鈦片生物膜進(jìn)行基本生物量的測(cè)定,通過(guò)掃描電鏡、激光共聚焦顯微鏡、熒光顯微鏡對(duì)各組鈦片生物膜進(jìn)行結(jié)構(gòu)的觀察。 [結(jié)果] 1.生長(zhǎng)曲線代表細(xì)菌的生長(zhǎng)速度：一組(單菌P.g)四組(雙菌P.g+S.s)三組(單菌S.s)二組(單菌Pi)五組(雙菌P.i+S.s)。細(xì)菌的對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期：一組2-8h,二組4-18h,三組12h,四組4-12h,五組4-8h。細(xì)菌的最大吸收峰：一組28h,二組12h,三組12h,四組22h,五組12h。 2.抑菌實(shí)驗(yàn)中,兩組空白對(duì)照均無(wú)抑菌圈產(chǎn)生,一組(P.g+S.s)及二組(P.i+S.s)有抑菌圈產(chǎn)生,并且抑菌圈直徑隨S.s濃度的增加而增大,在S.s濃度1.0×108CFU/mL時(shí)達(dá)到最大值,相同濃度S.s,一組的抑菌圈直徑總是大于組。 3.鈦片表面生物膜活菌計(jì)數(shù)結(jié)果,各組在相同時(shí)間點(diǎn),菌落數(shù)10-2CFU/mL10-3CFU/mL10-4CFU/mL,各組在相同濃度時(shí),菌落數(shù)72h48h24h。同一時(shí)間點(diǎn)相同濃度時(shí),菌落數(shù)一組(單菌Pg)三組(雙菌P.g+S.s),二組(單菌Pi)四組(雙菌P.i+S.s)。 4.鈦片表面生物膜掃描電鏡觀察,各組菌斑量隨時(shí)間的延長(zhǎng)而增加。一組與二組的菌斑生物膜形態(tài)學(xué)觀察無(wú)明顯差異,三組與四組的菌斑生物膜形態(tài)學(xué)觀察無(wú)明顯差異,而前兩者與后兩者之間形態(tài)學(xué)卻有明顯的差異,三組較一組在同一時(shí)間點(diǎn)生成的菌斑量少,四組較二組在同一時(shí)間點(diǎn)生成的菌斑量少。 5.鈦片表面生物膜激光共聚焦顯微鏡、熒光顯微鏡觀察,生物膜厚度在5.92-30.52μm之間。各組生物膜厚度隨時(shí)間的延長(zhǎng)而加厚,熒光顯微鏡下,細(xì)菌呈藍(lán)綠色熒光,CLSM下,細(xì)菌呈藍(lán)色熒光,視野中球菌呈鏈狀排列并與團(tuán)片狀細(xì)菌交織在一起,周圍有散在的單個(gè)球菌。 [結(jié)論] 1.細(xì)菌生長(zhǎng)曲線表明,培養(yǎng)8h后,各組細(xì)菌均進(jìn)入對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期,這為后續(xù)實(shí)驗(yàn)提供了理論依據(jù)。 2.抑菌實(shí)驗(yàn)以及細(xì)菌連續(xù)培養(yǎng)后CFU菌落計(jì)數(shù)均表明, S.s對(duì)P.g、P.i的生長(zhǎng)有抑制作用。 3.掃描電鏡探測(cè)生物膜表面形態(tài)表明,S.s混合培養(yǎng)對(duì)P.g、P.i生物膜的形態(tài)有影響。 4.激光共聚焦顯微鏡測(cè)量生物膜的厚度表明,厚度隨時(shí)間增加而持續(xù)增厚,同一時(shí)間點(diǎn)各組細(xì)菌在鈦片表面形成的生物膜厚度明顯不同,S.s混合培養(yǎng)對(duì)P.g、P.i生物膜厚度有影響。
【學(xué)位授予單位】：昆明醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2012
【分類號(hào)】：R783

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 劉亮;郭鋒;李鵬飛;婭婭;;鈦生物種植體表面微弧氧化膜制備的電解液研究[J];表面技術(shù);2009年03期

2 施文元;周學(xué)東;;人體口腔微生物群的相互作用[J];華西口腔醫(yī)學(xué)雜志;2010年01期

3 胡濤,周學(xué)東,張萍,譚紅,陳紅英,張靜儀;血液鏈球菌產(chǎn)生對(duì)氨基苯甲酸的實(shí)驗(yàn)研究 Ⅰ.反相高效液相色譜分析法的建立[J];華西口腔醫(yī)學(xué)雜志;1998年02期

4 胡濤,周學(xué)東,張萍,肖曉蓉,劉豫蓉;血液鏈球菌產(chǎn)生對(duì)氨基苯甲酸的實(shí)驗(yàn)研究 Ⅱ.對(duì)氨基苯甲酸的定性定量分析[J];華西口腔醫(yī)學(xué)雜志;1998年02期

5 謝志剛,梁星,丁仲鵑,汪厚希,曹志云,林云紅;牙種植體周圍炎齦下菌群分布的研究[J];昆明醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2005年03期

6 鄧輝;丁一;趙瑜;;血鏈球菌對(duì)牙周可疑致病菌體外拮抗作用的研究[J];口腔醫(yī)學(xué);2007年08期

7 尹麗媛，潘亞萍，李本容;不同牙周狀態(tài)血鏈球菌分布的研究[J];遼寧醫(yī)學(xué)雜志;1996年05期

8 王亞明,蔣百靈,雷廷權(quán),郭立新,曹躍平;電參數(shù)對(duì)Ti6Al4V合金微弧氧化陶瓷膜結(jié)構(gòu)特性的影響[J];無(wú)機(jī)材料學(xué)報(bào);2003年06期

9 陳偉;佟卉春;東秀珠;;一株口腔鏈球菌新種—寡發(fā)酵鏈球菌產(chǎn)過(guò)氧化氫特性的研究[J];微生物學(xué)報(bào);2006年05期

10 夏薇,丁一,肖曉蓉,劉敏川,朱(朱石);血鏈球菌在牙周病微生態(tài)防治中的作用研究——Ⅰ血鏈球菌對(duì)牙周可疑致病菌的拮抗作用[J];牙體牙髓牙周病學(xué)雜志;2003年05期

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前1條

1 鄧輝;血鏈球菌及血鏈素對(duì)牙周可疑致病菌拮抗作用的研究[D];四川大學(xué);2004年

本文編號(hào)：2737730