【摘要】：目的:對(duì)比分析在口腔鱗狀細(xì)胞癌粘膜邊界緊密連接蛋白表達(dá)與碘的上皮內(nèi)滲入情況,篩選上皮通透性直接相關(guān)蛋白,并探討該蛋白對(duì)口腔鱗癌細(xì)胞增殖遷移作用的影響。方法:采用免疫組化法對(duì)收集的20例口腔鱗狀細(xì)胞癌標(biāo)本中緊密連接蛋白claudin-1,2,3,4,5,6,7,8,10,11,14,17,23以及ZO-1,ZO-2,occludin等相關(guān)蛋白在口腔鱗癌粘膜邊界及深部腫瘤組織的表達(dá)進(jìn)行分析,并對(duì)比口腔鱗狀細(xì)胞癌粘膜邊界上皮內(nèi)碘的滲入?yún)^(qū)域及糖原的分布情況,初步確定可能的滲透性相關(guān)緊密連接蛋白。Western blot檢測(cè)上述各可能相關(guān)蛋白在HSC-3、HSC-4、SAS、Ca9-22、TCA-8133、CAL-27細(xì)胞株中的表達(dá)水平,最終確定具體細(xì)胞緊密連接相關(guān)蛋白和理想細(xì)胞株。構(gòu)建攜帶該蛋白靶向基因的慢病毒載體轉(zhuǎn)染癌細(xì)胞,實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)轉(zhuǎn)染后細(xì)胞中mRNA表達(dá)下調(diào)水平。MTT法、細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)觀察分析轉(zhuǎn)染對(duì)細(xì)胞增殖和遷移能力的影響。結(jié)果:1.緊密連接蛋白claudin-1,4,6,7,8,10,occludin,ZO-2在口腔鱗狀細(xì)胞癌粘膜邊界均出現(xiàn)不同程度的表達(dá),claudin-2,3,5,11,17,23,ZO-1在口腔鱗狀細(xì)胞癌粘膜邊界未見(jiàn)表達(dá),claudin-1在所有病例中均明顯表達(dá)。其中claudin-1,4,7,8,10表達(dá)主要分布在口腔鱗癌粘膜邊界正常側(cè)上皮基底及副基底細(xì)胞層,異常側(cè)上皮則大多分布于表層下方甚至基本全層表達(dá)。碘在口腔鱗癌粘膜邊界上皮層內(nèi)的分布與糖原的分布不完全一致,與claudin-1,4,7,8,10的分布形態(tài)基本形成“互補(bǔ)”,其中claduin-1與碘的分布“互補(bǔ)”形態(tài)最為一致。2.claudin-1在HSC-3、HSC-4、SAS、CAL-27細(xì)胞株中均有明顯的表達(dá),在Ca9-22、TCA-8113細(xì)胞株中表達(dá)水平低。相對(duì)于HSC-4細(xì)胞,SAS細(xì)胞有更高的感染效率。3.MTT實(shí)驗(yàn)及細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)顯示轉(zhuǎn)染claudin-1 siRNA后SAS細(xì)胞增殖及遷移能力明顯低于未轉(zhuǎn)染細(xì)胞(P0.05)。結(jié)論:1.claudin-1是一個(gè)可靠的、用于辨別口腔鱗癌粘膜邊界的分子標(biāo)志物。2.claudin-1可能參與調(diào)節(jié)上皮通透性變化而影響活體染色劑在口腔上皮的滲入并影響活體染色劑的口腔鱗癌粘膜邊界辨別效果。3.claudin-1的下調(diào)降低口腔鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞的增殖及遷移能力,表明claudin-1的表達(dá)水平與腫瘤的生物學(xué)行為密切相關(guān),是一個(gè)潛在的口腔鱗狀細(xì)胞癌治療靶點(diǎn)。
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類(lèi)號(hào)】：R739.8
【圖文】：

圖 1 口腔鱗癌標(biāo)本的獲取Fig.1 obtainment of OSCC sample(A) before iodine stain (B) after iodine stain, iodine-negative area is cancerous part and iodine positivarea is normal mucosa part. The white circle shows the incisional site. (C) surface view of OSCC sampleclaudin-1 claudin-2 claudin-3 claudin-4claudin-5 claudin-6claudin-7claudin-8claudin-10claudin-11 claudin-17 claudin-23occludin ZO-1 ZO-2碘染色HE PAS

研 究 論 文附 圖圖 1 口腔鱗癌標(biāo)本的獲取Fig.1 obtainment of OSCC sample(A) before iodine stain (B) after iodine stain, iodine-negative area is cancerous part and iodine positivearea is normal mucosa part. The white circle shows the incisional site. (C) surface view of OSCC sample染色前 染色后 標(biāo)本制備A B Cclaudin-1 claudin-2 claudin-3 claudin-4claudin-5 claudin-6

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前4條

1 李寶軍;趙爾楊;孟琰;吳衍昌;王德明;王偉;;Claudin-1在口腔鱗狀細(xì)胞癌中的表達(dá)[J];中國(guó)口腔頜面外科雜志;2012年03期

2 陶寅;;Claudin-1蛋白在肺鱗癌中的表達(dá)及其意義[J];醫(yī)學(xué)臨床研究;2011年04期

3 孟茜;孟娟;;E-cadherin和claudin-1在宮頸鱗癌中表達(dá)關(guān)系的研究[J];中國(guó)實(shí)用醫(yī)藥;2010年17期

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本文編號(hào)：2737575