【摘要】：目的：以癌干細(xì)胞的耐藥性為切入點(diǎn),配合機(jī)體環(huán)境,進(jìn)行構(gòu)建體內(nèi)環(huán)磷酰胺及阿霉素干預(yù)舌癌干細(xì)胞富集模式的實(shí)驗(yàn)研究。建立以提高舌癌干細(xì)胞比例的富集模式,期望解決癌干細(xì)胞數(shù)量少而導(dǎo)致舌癌干細(xì)胞實(shí)驗(yàn)研究的“瓶頸”問題,并探討細(xì)胞粘附因子受體4(CXCR4)作為舌癌干細(xì)胞候選標(biāo)志的角色。 方法：選取舌癌裸鼠移植瘤為研究對(duì)象,以化療藥物干預(yù)為基本手段,采用體內(nèi)微環(huán)境,建立舌癌干細(xì)胞富集模式,主要構(gòu)建模式如下：建立舌癌裸鼠皮下移植瘤動(dòng)物模型,采用阿霉素尾靜脈注射,8mg/kg,每周一次；腹腔注射環(huán)磷酰胺,100mg/kg,8天為一個(gè)周期,連續(xù)注射3天,停藥5天,腫瘤直徑為1.5cm時(shí)取材原代培養(yǎng),并在體連續(xù)傳代5次。采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR法檢測(cè)舌癌裸鼠皮下移植瘤各代瘤體CXCR4的表達(dá)。 結(jié)果： 1.裸鼠皮下結(jié)節(jié)形成的時(shí)間隨著富集代數(shù)的增加而逐漸縮短。阿霉素對(duì)照組、環(huán)磷酰胺對(duì)照組皮下結(jié)節(jié)形成的平均時(shí)間均為11天。Tca8113/ADM TP1+、Tca8113/ADM TP2+、Tca8113/ADM TP3+、Tca8113/ADM TP4、 Tca8113/ADM TP5+皮下結(jié)節(jié)形成的平均時(shí)間分別是11、10、9、7、6天,Tca8113/CTX TP1+、Tca8113/CTX TP2+、Tca8113/CTX TP3+、Tca8113/CTX TP4+、Tca8113/CTX TP5+皮下結(jié)節(jié)形成的平均時(shí)間分別是11、9、7、7、5天。 2. CXCR4的表達(dá)在阿霉素對(duì)照組和經(jīng)阿霉素化療藥物富集的各代瘤體組織中相對(duì)于內(nèi)參β-actin的平均△Ct-值分別為(8.071±0.670)、(7.842±0.122)、(7.379±0.131)、(6.711±0.134)、(6.304±0.109)、(4.837±1.229),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。CXCR4的表達(dá)在環(huán)磷酰胺對(duì)照組和經(jīng)環(huán)磷酰胺化療藥物富集的各代瘤體組織中相對(duì)于內(nèi)參β-actin的平均△Ct-值分別為(8.088±0.671)、(7.649±0.191)、(6.698±0.112)、(5.583±0.360)、(4.667±0.224)、(3.055±0.166),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。CXCR4在經(jīng)阿霉素富集的各代瘤體組織相對(duì)于對(duì)照組的表達(dá)強(qiáng)度依次為(1.172±0.661)、(1.613±0.371)、(2.567±0.577)、(3.410±0.638)、(9.381±0.721)；CXCR4在經(jīng)環(huán)磷酰胺富集的各代瘤體組織相對(duì)于對(duì)照組的表達(dá)強(qiáng)度依次為(1.355±0.171)、(2.603±0.473)、(5.677±0.591)、(10.711±0.381)、(32.740±0.189)。 結(jié)論：裸鼠皮下移植瘤聯(lián)合化療藥物干預(yù)傳代,能極大富集舌癌干細(xì)胞樣細(xì)胞。舌癌Tca8113細(xì)胞的致瘤性隨著阿霉素或環(huán)磷酰胺在體干預(yù)而逐漸增強(qiáng)�；熕幬锔深A(yù)后CXCR4的表達(dá)強(qiáng)度隨富集的代數(shù)增加而增強(qiáng),CXCR4可做為舌癌干細(xì)胞表面候選的特異相關(guān)標(biāo)志物。
【學(xué)位授予單位】：廣西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：R739.86

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2731309