【摘要】:神經(jīng)趨向性是指神經(jīng)在生長發(fā)育和再生過程中,新生的軸索受到來自外周組織釋放的某些化學物質(zhì)引導而發(fā)生的定向生長。研究表明,神經(jīng)趨向性再生可分為組織特異性、解剖特異性和終末器官特異性。目前,對于解剖特異性仍然存在爭議,其基礎(chǔ)和機制研究還不清楚。面神經(jīng)是頜面部重要的神經(jīng),面神經(jīng)損傷后的趨向性生長,尚未見相關(guān)報道。根據(jù)趨向性再生理論,很多學者嘗試用管狀支架材料修復單支面神經(jīng)缺損,多分支導管尚未見報道?捎米鰧Ч艿牟牧嫌泻芏,殼聚糖因其良好的生物相容性及可降解的特點,越來越受到重視,目前,尚未見用殼聚糖制作多分支導管的報道。本研究從面神經(jīng)解剖特異性神經(jīng)趨向性再生的相關(guān)基礎(chǔ)研究入手,為下一步的研究奠定基礎(chǔ)。 第一部分:兔、豬、狗、猴面神經(jīng)顱外段的解剖比較 目的:比較兔、豬、狗、猴的面神經(jīng)顱外段的解剖。材料和方法:全麻下解剖新西蘭兔、小型豬、Beagle犬、猴的面神經(jīng),記錄面神經(jīng)分支的走行、分支數(shù),測量面神經(jīng)各支直徑、長度,取材面神經(jīng)主干及各分支標本,記錄軸突數(shù)、測算軸突密度及髓鞘厚度。結(jié)果:四種動物的分支數(shù)不全相同,走行各有差異,猴的面神經(jīng)走行與人類最為接近,但變異最大。在面神經(jīng)出莖乳孔2cm范圍內(nèi),四種動物走行比較穩(wěn)定。豬的面神經(jīng)干最粗,Beagle犬面神經(jīng)干的軸突數(shù)最多。四種動物的面神經(jīng)干長度近似,直徑差異較大,組織學表現(xiàn)較為一致。結(jié)論:兔、豬、狗和猴的面神經(jīng)出莖乳孔后2cm范圍內(nèi),面神經(jīng)走行和分支數(shù)目在同一種屬間相對穩(wěn)定,猴與人類最為接近,兔、豬、狗與人類有所不同。四種動物的面神經(jīng)干長度近似,直徑差異較大,組織學表現(xiàn)相似,軸突數(shù)不隨直徑的變化而變化。 第二部分:多分支殼聚糖導管的構(gòu)建 目的:以殼聚糖為材料構(gòu)建多分支導管。材料和方法:用粘接法和模具成型法制作多分支殼聚糖導管,優(yōu)化設(shè)計并制作多分支殼聚糖導管模具,摸索導管的制作工藝。結(jié)果:2種方法都能制成多分支殼聚糖導管。所設(shè)計的模具可以成功制作出多分支殼聚糖導管,并能根據(jù)實驗需要改變分支數(shù)目、調(diào)整分支導管的直徑和分支間的夾角。成功掌握了模具成型發(fā)制備殼聚糖管的工藝。結(jié)論:模具成型法制作的多分支殼聚糖導管明顯好于粘接法。 第三部分:兔面神經(jīng)解剖特異性趨向性再生模型的建立 目的:摸索建立面神經(jīng)解剖特異性趨向性再生的動物模型的方法。材料和方法:新西蘭兔6只,手術(shù)造成面神經(jīng)干和所有分支5mm缺損動物模型,用多分支殼聚糖導管修復,術(shù)后1、2、3、8、16、24周觀察面部行為學。結(jié)果:動物模型建立成功。5只動物存活至術(shù)后24周,術(shù)區(qū)未出現(xiàn)腫脹、破潰、排異等現(xiàn)象。結(jié)論:成功建立面神經(jīng)解剖特異性趨向性再生的動物模型。 第四部分:神經(jīng)示蹤法研究面神經(jīng)主干中的分支分布情況 實驗一、熒光金示蹤法探索大鼠面神經(jīng)主干中的分支分布情況 目的:了解大鼠面神經(jīng)各分支在神經(jīng)干顱外段的空間分布情況。材料和方法:15只大鼠隨機分為5組,用熒光金作示蹤劑,每組標記一個神經(jīng)分支。2天后取材,在面神經(jīng)干分叉處、中點、莖乳孔連續(xù)冰凍切片,熒光鏡下觀察。結(jié)果:在大鼠面神經(jīng)分叉處,顳支的神經(jīng)纖維均勻分布在內(nèi)上方,面積占整個象限的1/3左右;顴支的神經(jīng)纖維分布在外上1/4;頰支的神經(jīng)纖維均勻布滿神經(jīng)干的上半部;下頜緣支的神經(jīng)纖維均勻分布在神經(jīng)干的下半部,面積略小于頰支;頸支的神經(jīng)纖維均勻分布在外上方,大約占外上象限的1/4;在大鼠面神經(jīng)干的中點,顳支的神經(jīng)纖維均勻分布在內(nèi)上方,面積占整個象限的1/2左右;顴支的神經(jīng)纖維分布在外上1/2;頰支的神經(jīng)纖維均勻布滿神經(jīng)干的上半部;下頜緣支的神經(jīng)纖維均勻分布在神經(jīng)干的下半部;頸支的神經(jīng)纖維均勻分布在外上方,上密下疏,大約占外上象限的1/2;在大鼠面神經(jīng)干出莖乳孔處,顳支神經(jīng)纖維向圓心蔓延,接近橢圓形,占據(jù)了整個神經(jīng)干的內(nèi)上1/3面積;顴支神經(jīng)纖維仍向中心蔓延,彌散分布在外上部;頰支神經(jīng)纖維仍向下蔓延,標記面積約占整個干的2/3;下頜緣支神經(jīng)纖維仍向上蔓延,標記面積約占整個干的2/3,標記區(qū)域神經(jīng)纖維密度不均;頸支神經(jīng)纖維向中心擴散,在整個神經(jīng)干的中心1/2呈橢圓形。結(jié)論:大鼠面神經(jīng)分叉處各分支分布區(qū)域明顯局限于某一范圍,各分支的分布區(qū)域略有重疊,組合后布滿整個神經(jīng)橫斷面;隨著向莖乳孔靠近,分布區(qū)域逐漸擴大,重疊面積擴大;到莖乳孔時各分支都有纖維分布在干的中心1/2,界線消失,無法分辨。 實驗二、雙重示蹤法探索大鼠面神經(jīng)主干中的分支分布情況 目的:了解大鼠面神經(jīng)莖乳孔附近頰支和下頜緣支的神經(jīng)纖維的交叉分布情況。材料和方法:用示蹤劑熒光金標記大鼠的頰支,同時用熒光紅標記大鼠的下頜緣支。一周后取材,在面神經(jīng)干莖乳孔處和腦干冰凍切片,熒光鏡下觀察。結(jié)果:在大鼠面神經(jīng)干出莖乳孔處,頰支和下頜緣支的神經(jīng)纖維分別彌散分布在橫斷面的上、下方,重疊面積達到整個神經(jīng)斷面的2/3,沒有明顯的界線,也沒有雙重標記的神經(jīng)纖維。腦干冠狀面切片證實沒有雙標的神經(jīng)元。結(jié)論:面神經(jīng)各分支在面神經(jīng)干中的分布情況,并非成束狀平行前進,在莖乳孔附近,各分支的神經(jīng)纖維互相纏繞,絞索狀前行。
【學位授予單位】:中國人民解放軍軍醫(yī)進修學院
【學位級別】:博士
【學位授予年份】:2012
【分類號】:R322;R782
【參考文獻】
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2707348
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