【摘要】：目的: 探討658nm低能量激光照射對人牙周膜細(xì)胞生物學(xué)活性的影響。 方法: 1.采用改良組織塊法,體外培養(yǎng)人牙周膜細(xì)胞并行HE染色,抗波形蛋白、細(xì)胞角蛋白免疫組化染色及礦化特性鑒定細(xì)胞來源; 2.通過658nm低能量激光照射人牙周膜細(xì)胞,觀察不同能量密度激光照射后不同時間點細(xì)胞增殖效應(yīng)及堿性磷酸酶活性的變化; 3.采用ELISA試劑盒檢測激光照射后不同時間點人牙周膜細(xì)胞分泌纖維連接蛋白的變化。 結(jié)果: 1.培養(yǎng)的人牙周膜細(xì)胞,細(xì)胞抗波形蛋白陽性,抗細(xì)胞角蛋白陰性,且具有礦化特性; 2.1.86J/cm~2和3.72J/cm~2能量密度的激光照射人牙周膜細(xì)胞,可顯著促進(jìn)細(xì)胞增殖效應(yīng)。3.72J/cm~2能量密度的激光照射可提高人牙周膜細(xì)胞堿性磷酸酶活性; 3.能量密度為1.86J/cm~2的激光照射人牙周膜細(xì)胞72h后,細(xì)胞中纖維連接蛋白分泌量增加。 結(jié)論: 1.改良組織塊法是培養(yǎng)人牙周膜細(xì)胞的一種可行方法; 2.658nm低劑量激光照射可促進(jìn)人牙周膜細(xì)胞增殖,并提高細(xì)胞堿性磷酸酶活性; 3.適量的低劑量激光照射人牙周膜細(xì)胞可促進(jìn)其纖維連接蛋白的分泌。
【圖文】：

有 9 例細(xì)胞游出，，1 例培養(yǎng) 20 天未見細(xì)胞游出，視為培養(yǎng)失敗，成功率 90%。鏡下觀察，4～8 天內(nèi)可見組織塊周圍細(xì)胞開始游出，并形成生長暈（圖 1-a,b），游出的細(xì)胞圍繞組織塊周圍呈放射狀或漩渦狀排列生長（圖 1-c,d）。隨著培養(yǎng)時間的延長，組織塊周圍都有細(xì)胞游出，但是孔板內(nèi)細(xì)胞分布很不均勻，細(xì)胞聚集在各個組織塊周圍，而遠(yuǎn)離組織塊區(qū)域，細(xì)胞很少甚至沒有，此時需要進(jìn)行原孔消化。原孔消化后，組織塊周圍細(xì)胞變少，整個培養(yǎng)皿中細(xì)胞分布比較均勻（圖 1-e,f）。原代細(xì)胞均能成功傳代，傳代后第二天懸浮細(xì)胞又貼壁生長，呈長梭形均勻分布于整個培養(yǎng)皿（圖 1-e）。

有 9 例細(xì)胞游出，1 例培養(yǎng) 20 天未見細(xì)胞游出，視為培養(yǎng)失敗，成功率 90%。鏡下觀察，4～8 天內(nèi)可見組織塊周圍細(xì)胞開始游出，并形成生長暈（圖 1-a,b），游出的細(xì)胞圍繞組織塊周圍呈放射狀或漩渦狀排列生長（圖 1-c,d）。隨著培養(yǎng)時間的延長，組織塊周圍都有細(xì)胞游出，但是孔板內(nèi)細(xì)胞分布很不均勻，細(xì)胞聚集在各個組織塊周圍，而遠(yuǎn)離組織塊區(qū)域，細(xì)胞很少甚至沒有，此時需要進(jìn)行原孔消化。原孔消化后，組織塊周圍細(xì)胞變少，整個培養(yǎng)皿中細(xì)胞分布比較均勻（圖 1-e,f）。原代細(xì)胞均能成功傳代，傳代后第二天懸浮細(xì)胞又貼壁生長，呈長梭形均勻分布于整個培養(yǎng)皿（圖 1-e）。
【學(xué)位授予單位】：福建醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2011
【分類號】：R781.4

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：2683001