【摘要】： 牙周病是人類口腔最常見的兩大疾病之一,在世界范圍內(nèi)均有較高的發(fā)病率。牙周炎占拔牙原因的40%60%,已成為導(dǎo)致我國(guó)成年人牙齒喪失的最主要原因。近年來(lái)的研究表明牙周炎不僅累及牙周組織,而且對(duì)全身健康也有一定的影響。牙周炎是由牙菌斑的微生物作為始動(dòng)因子引起的牙周支持組織的慢性感染性疾病,導(dǎo)致牙周支持組織的炎癥、牙周袋形成、進(jìn)行性附著喪失和牙槽骨吸收,最終導(dǎo)致牙齒松動(dòng)、甚至脫落。牙周炎發(fā)病機(jī)制復(fù)雜,牙周微生物在牙周病的發(fā)病中是必需的始動(dòng)因素,但單純的細(xì)菌因素不足以解釋疾病的復(fù)雜性和嚴(yán)重性。研究表明宿主反應(yīng)在牙周病的發(fā)生、發(fā)展中起重要作用,易感的宿主以及某些能增加宿主易感性的因素是影響牙周病的發(fā)生、發(fā)展和對(duì)治療反應(yīng)的重要因素�，F(xiàn)代心身醫(yī)學(xué)認(rèn)為,心理應(yīng)激是影響疾病發(fā)生、發(fā)展和預(yù)后的重要因素之一。目前認(rèn)為心理應(yīng)激與牙周健康狀況密切相關(guān),可能是牙周炎的重要危險(xiǎn)因子。研究表明各種精神因素與牙周炎的發(fā)病率和嚴(yán)重程度密切相關(guān)。因此,研究心理應(yīng)激影響牙周炎的致病機(jī)制對(duì)于了解心理應(yīng)激在牙周炎發(fā)生中作用及改進(jìn)牙周炎的治療對(duì)策具有重要意義。 氧代謝對(duì)牙周組織生理機(jī)能的維持起著重要的作用,心理應(yīng)激在影響牙周組織的氧代謝方面的機(jī)制,目前尚未清楚,國(guó)內(nèi)外的研究也極少涉及。我們假設(shè)心理應(yīng)激通過降低牙周組織中氧氣的供應(yīng)量而加重牙周組織的病變,并通過本實(shí)驗(yàn)來(lái)驗(yàn)證這一假設(shè)。研究結(jié)果將為闡明心理應(yīng)激影響牙周疾病的氧代謝機(jī)制以及改進(jìn)牙周疾病的治療方案提供實(shí)驗(yàn)理論依據(jù)。 目的 通過建立大鼠實(shí)驗(yàn)性牙周炎模型并予以應(yīng)激刺激,觀測(cè)實(shí)驗(yàn)大鼠的牙齦指數(shù)、牙周附著喪失及牙周組織的組織學(xué)變化,探討心理應(yīng)激對(duì)牙周炎發(fā)生、發(fā)展的影響；采用免疫組織化學(xué)法檢測(cè)牙周組織HIF-1α水平,探測(cè)牙周組織的低氧情況及其范圍,并通過計(jì)算HIF-1α平均陽(yáng)性細(xì)胞率來(lái)評(píng)估組織缺氧程度,探討心理應(yīng)激對(duì)牙周炎氧代謝影響的機(jī)制。 方法 采用SPF級(jí)4wk齡雄性Wistar大鼠48只,按隨機(jī)數(shù)字表法分成4組：1)正常對(duì)照組(normal control group, N):正常喂養(yǎng),牙周不做特殊處理；2)實(shí)驗(yàn)性牙周炎組(experimental periodontitis group, P):用浸有牙周致病菌的絲線結(jié)扎左側(cè)上頜第二磨牙牙頸部復(fù)制牙周炎模型；3)單純應(yīng)激組(stress-stimulating group, S):牙周不作特殊處理,給予應(yīng)激刺激；4)牙周炎+應(yīng)激組(periodontal model with stress-stimulating group, P+S):按上法復(fù)制牙周炎模型,并予以應(yīng)激刺激。各組分別于牙周造模后第1、4、6、8 wk末分批處死動(dòng)物,各時(shí)間點(diǎn)每組處死動(dòng)物數(shù)為3只。處死動(dòng)物前測(cè)量大鼠的牙齦指數(shù)(gingival index, GI)、牙周附著喪失(attachment loss, AL)。取大鼠左側(cè)上頜第二磨牙及其牙周組織,制作脫鈣組織切片、HE染色,觀察結(jié)合上皮的變化、上皮下炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)及牙槽骨吸收情況,應(yīng)用免疫組織化學(xué)法檢測(cè)各實(shí)驗(yàn)組大鼠牙周組織內(nèi)HIF-1α的表達(dá)情況,探測(cè)牙周組織的低氧情況及其范圍,并通過計(jì)算HIF-1α平均陽(yáng)性細(xì)胞率來(lái)評(píng)估組織缺氧程度。 結(jié)果 1、牙齦指數(shù)：1)各時(shí)間點(diǎn)單純應(yīng)激組GI與正常對(duì)照組間均無(wú)明顯差異(P0.05)；牙周炎組和牙周炎+應(yīng)激組GI在4 wk、6 wk和8 wk時(shí)明顯高于正常對(duì)照組(P0.01)；2)牙周炎+應(yīng)激組GI在4 wk、6 wk和8 wk時(shí)明顯高于牙周炎組(P0.01)。 2、牙周附著喪失：1)牙周炎組和牙周炎+應(yīng)激組AL在各個(gè)時(shí)間點(diǎn)明顯高于正常對(duì)照組和單純應(yīng)激組(P0.01)；2)單純應(yīng)激組AL在各時(shí)間點(diǎn)與正常對(duì)照組比較均無(wú)顯著性差異(P0.05)；3)牙周炎+應(yīng)激組AL在4 wk、6 wk和8 wk時(shí)明顯高于牙周炎組(P0.01)。 3、大體標(biāo)本觀察：正常對(duì)照組和單純應(yīng)激組沒有明顯牙周組織破壞；牙周炎+應(yīng)激組牙周組織破壞最嚴(yán)重,牙齦萎縮及附著喪失嚴(yán)重,兩側(cè)鄰牙同時(shí)出現(xiàn)附著喪失；牙周炎組的牙周組織表現(xiàn)為中等程度的牙齦萎縮和附著喪失,牙周破壞程度在4 wk、6 wk和8 wk時(shí)均較牙周炎+應(yīng)激組輕。 4、組織學(xué)改變：正常對(duì)照組和單純應(yīng)激組沒有明顯的炎癥變化；牙周炎+應(yīng)激組牙周組織炎癥變化最嚴(yán)重,結(jié)合上皮與牙面分離,上皮向根方增殖,組織深層可見大量的炎癥細(xì)胞浸潤(rùn),血管擴(kuò)張充血,牙周纖維水腫、變性,牙槽骨表面可見活躍的破骨細(xì)胞和骨吸收,牙槽嵴頂高度降低。牙周炎組的牙周組織表現(xiàn)為中等程度的炎癥破壞,在4 wk、6 wk和8 wk時(shí)牙周炎組的牙周組織炎癥破壞程度均較牙周炎+應(yīng)激組輕。 5、HIF-1α免疫組織化學(xué)法染色結(jié)果：1)正常對(duì)照組HIF-1α平均陽(yáng)性細(xì)胞率在各時(shí)間點(diǎn)與單純應(yīng)激組比較均無(wú)顯著性差異(P0.05)；2)牙周炎組和牙周炎+應(yīng)激組HIF-1α平均陽(yáng)性細(xì)胞率在各個(gè)時(shí)間點(diǎn)明顯高于正常對(duì)照組和單純應(yīng)激組(P0.01)；3)與牙周炎組比較,在4 wk、6 wk和8 wk時(shí)牙周炎+應(yīng)激組HIF-1α平均陽(yáng)性細(xì)胞率明顯高于牙周炎組(P0.01) 結(jié)論 1.采用浸有牙周致病菌的絲線結(jié)扎方法,4 wk后成功復(fù)制出大鼠實(shí)驗(yàn)性牙周炎模型。 2.單純應(yīng)激刺激不會(huì)造成大鼠牙周炎的發(fā)生。 3.應(yīng)激刺激可加重實(shí)驗(yàn)性牙周炎大鼠的牙周炎癥破壞程度。 4.應(yīng)激刺激通過降低牙周組織氧代謝水平加重大鼠牙周炎癥程度。
【圖文】：

單純應(yīng)激組6wk時(shí)組織學(xué)觀察:牙周組織結(jié)構(gòu)正常，溝內(nèi)上皮、結(jié)合

正常對(duì)照組組織學(xué)觀察:結(jié)合上皮無(wú)釘突，牙釀上皮及牙周膜內(nèi)均未見明顯的炎細(xì)胞(HE，，100X)
【學(xué)位授予單位】：暨南大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2010
【分類號(hào)】：R781.4

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2680044