富血小板血漿及自體牙周韌帶細(xì)胞移植修復(fù)牙周組織缺損的實(shí)驗(yàn)研究
發(fā)布時(shí)間:2020-05-24 22:54
【摘要】: 目的研究富血小板血漿(platelet-rich plasma,PRP)對(duì)牙周韌帶細(xì)胞(periodontal ligament cells, PDLCs)在牙骨質(zhì)表面附著和增殖的作用,探討其是否能促進(jìn)牙周組織再生;并將不同數(shù)量牙周韌帶細(xì)胞植入慢性實(shí)驗(yàn)性牙周缺損內(nèi),觀察細(xì)胞植入數(shù)量與牙周組織再生量的關(guān)系。 方法1.采用組織塊法培養(yǎng)人牙周韌帶細(xì)胞,取第四代細(xì)胞用于實(shí)驗(yàn)。分別制備健康牙和牙周病患牙牙骨質(zhì)塊置于96孔板,附著實(shí)驗(yàn)在接種細(xì)胞后加入含10%PRP和不含PRP的培養(yǎng)液,4小時(shí)后MTT法檢測(cè)附著細(xì)胞數(shù)量;增殖實(shí)驗(yàn)在接種細(xì)胞后常規(guī)培養(yǎng)24h,加入不含血清的培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)48h ,此后更換為含10%PRP和不含PRP的培養(yǎng)液,24h后MTT法檢測(cè)細(xì)胞數(shù)量;并以?huà)呙桦婄R觀察細(xì)胞在牙骨質(zhì)表面的情況。2.人工構(gòu)建4只Beagle犬慢性實(shí)驗(yàn)性牙周缺損模型,體外培養(yǎng)犬的自體牙周韌帶細(xì)胞,分別調(diào)整細(xì)胞濃度至5×105/ml、5×106/ml和5×107/ml,各取20μl接種于膠原膜上,將載有1×104、1×105和1×106PDLCs的膠原膜植入牙周缺損內(nèi),常規(guī)覆蓋BIO-GIDE膜。12周后制作病理切片,進(jìn)行組織學(xué)觀察,測(cè)量新生牙骨質(zhì)長(zhǎng)度百分率和新生牙槽骨面積百分率,結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。 結(jié)果1.附著實(shí)驗(yàn)中10%PRP組附著細(xì)胞數(shù)量較不含PRP組明顯增多;增殖實(shí)驗(yàn)中10%PRP組和不含PRP組細(xì)胞數(shù)量無(wú)明顯差異。2.各實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組均可見(jiàn)不同程度牙周組織再生,1×104PDLCs組和1×105PDLCs組與對(duì)照組的新生牙骨質(zhì)長(zhǎng)度百分率和新生牙槽骨面積百分率無(wú)顯著性差異,1×106PDLCs組的新生牙槽骨面積百分率較對(duì)照組顯著增高。 結(jié)論1. 10%PRP可促進(jìn)人PDLCs在健康牙和牙周病患牙牙骨質(zhì)塊上的附著,但對(duì)細(xì)胞在牙骨質(zhì)塊上的增殖無(wú)明顯影響。2.在實(shí)驗(yàn)性牙周缺損內(nèi)植入PDLCs,可促進(jìn)牙周組織再生,其有效濃度約為5×107/ml,有效數(shù)量約為1×106PDLCs。
【圖文】:
第 10 頁(yè)圖1 原代培養(yǎng)的人PDLCs第5天,可見(jiàn)組織塊周?chē)屑?xì)胞游出(倒置顯微鏡,10×)圖2 第三代人PDLCs,細(xì)胞生長(zhǎng)旺盛,呈漩渦狀排列(結(jié)晶紫染色,10×)圖3 第四代人PDLCs復(fù)層生長(zhǎng),形成肉眼可見(jiàn)的白色結(jié)節(jié)(倒置顯微鏡 2×)
圖1 原代培養(yǎng)的人PDLCs第5天,可見(jiàn)組織塊周?chē)屑?xì)胞游出(倒置顯微鏡,10×)圖2 第三代人PDLCs,細(xì)胞生長(zhǎng)旺盛,,呈漩渦狀排列(結(jié)晶紫染色,10×)圖3 第四代人PDLCs復(fù)層生長(zhǎng),形成肉眼可見(jiàn)的白色結(jié)節(jié)(倒置顯微鏡 2×)
【學(xué)位授予單位】:福建醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2007
【分類(lèi)號(hào)】:R783
【圖文】:
第 10 頁(yè)圖1 原代培養(yǎng)的人PDLCs第5天,可見(jiàn)組織塊周?chē)屑?xì)胞游出(倒置顯微鏡,10×)圖2 第三代人PDLCs,細(xì)胞生長(zhǎng)旺盛,呈漩渦狀排列(結(jié)晶紫染色,10×)圖3 第四代人PDLCs復(fù)層生長(zhǎng),形成肉眼可見(jiàn)的白色結(jié)節(jié)(倒置顯微鏡 2×)
圖1 原代培養(yǎng)的人PDLCs第5天,可見(jiàn)組織塊周?chē)屑?xì)胞游出(倒置顯微鏡,10×)圖2 第三代人PDLCs,細(xì)胞生長(zhǎng)旺盛,,呈漩渦狀排列(結(jié)晶紫染色,10×)圖3 第四代人PDLCs復(fù)層生長(zhǎng),形成肉眼可見(jiàn)的白色結(jié)節(jié)(倒置顯微鏡 2×)
【學(xué)位授予單位】:福建醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
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本文編號(hào):2679125
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