【摘要】：牙周炎是牙周組織的感染性疾病，可引起牙齒支持組織（牙齦、牙周膜、牙槽骨和牙骨質(zhì)）的破壞，是導(dǎo)致牙齒缺失的最主要原因。理想的牙周治療效果是消除牙周局部炎癥，阻止疾病進(jìn)程，促進(jìn)牙周組織再生修復(fù)，重建牙周組織生理結(jié)構(gòu)和功能。如何達(dá)到理想的牙周治療效果，一直是臨床治療中的難題，也是基礎(chǔ)研究的熱點(diǎn)。近年來(lái)組織工程（tissueengineering）學(xué)的迅速發(fā)展為治療牙周組織缺損，實(shí)現(xiàn)再生修復(fù)提供了新思路，日益受到人們的重視。組織工程學(xué)將工程學(xué)與生命科學(xué)相結(jié)合，將人工合成的支架材料與體外培養(yǎng)的功能相關(guān)的高濃度細(xì)胞復(fù)合，體外培養(yǎng)一段時(shí)間后植入病損部位，修復(fù)組織缺損，達(dá)到結(jié)構(gòu)和功能的重建。組織工程學(xué)研究包括三方面：種子細(xì)胞、支架材料和生長(zhǎng)因子。 牙周組織再生的基礎(chǔ)是牙周膜細(xì)胞（periodontal ligament cells，PDLCs），但在牙周病損部位，由于炎癥的影響，PDLCs數(shù)量少、活性低，不能較理想地重建牙周組織生理結(jié)構(gòu)和功能。在牙周治療術(shù)后，牙齦上皮生長(zhǎng)最快，形成的長(zhǎng)結(jié)合上皮妨礙新附著形成。引導(dǎo)組織再生術(shù)（guidedtissue regeneration，GTR）是目前臨床上常用的獲得牙周組織再生的手術(shù)治療方法，利用膜性材料作為屏障，阻擋牙齦上皮在愈合過(guò)程中沿根面生長(zhǎng)，并為PDLCs優(yōu)先占領(lǐng)根面提供一定的空間，形成新附著性愈合，使牙周組織再生。GTR的關(guān)鍵是膜性材料，近年來(lái)聚乳酸/聚羥基乙酸共聚體（polylactic-co-glycolic acid，PLGA）和膠原（collagen，Co）因生物相容性良好、無(wú)細(xì)胞毒性，常被作為支架材料應(yīng)用于GTR。血小板生長(zhǎng)因子是牙周膜再生最有效的因子，是成纖維細(xì)胞和成骨細(xì)胞潛在的絲裂原和趨化因子，富血小板血漿（platelet-rich plasma，PRP）中含有大量的血小板生長(zhǎng)因子。 基于上述，本實(shí)驗(yàn)將PDLCs、Co、PLGA與PRP用于修復(fù)大鼠牙周組織缺損，觀察其作用效果。 方法：合成PLGA膜，厚度約0.5mm，剪裁成5mm×2mm的細(xì)條，將人PDLCs與PLGA膜體外共培養(yǎng)3天。將厚度為0.30-0.69mm的Co膜剪裁成7mm×4mm，用于覆蓋缺損表面。抽取大鼠全血10ml制作PRP。將60只6-8周，，體重為160g-180g的成年雄性Wistar大鼠隨機(jī)分為五組，制作單側(cè)下頜5mm×2mm牙槽骨缺損模型。A組為空白對(duì)照；B組為PLGA+Co組；C組為PLGA+PRP+Co組；D組為PLGA+PDLCs+Co組；E組為PLGA+PDLCs+PRP+Co組。術(shù)后2周、4周、6周每組分別處死4只大鼠，取下頜牙槽骨標(biāo)本，H-E染色，觀察牙周組織缺損修復(fù)效果。結(jié)果：1、本實(shí)驗(yàn)第一部分制作的PLGA膜，PLA/PGA比例為75∶25、平均孔徑為131.80±43.97μm、孔隙率為60%，既能保證材料的機(jī)械強(qiáng)度，又能使支架材料在術(shù)后6周左右基本降解完成；2、PDLCs黏附生長(zhǎng)于PLGA膜上，并長(zhǎng)入孔隙中，PDLCs伸展性良好，多伸出偽足附于支架上，有的細(xì)胞表面有白色鈣質(zhì)顆粒；3、B、C、D、E組牙周新生骨量?jī)?yōu)于A組，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p0.05）；E組牙周新生骨量?jī)?yōu)于C、D組，C、D組牙周新生骨量?jī)?yōu)于B組，均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p0.05）；C、D組間比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p0.05）。結(jié)論：1、本實(shí)驗(yàn)制作的PLGA膜，孔徑大小適宜，具有良好的機(jī)械性能；2、PLGA生物相容性良好，無(wú)細(xì)胞毒性，是牙周組織工程的理想支架材料；3、PLGA+PDLCs+PRP+Co生物活性復(fù)合膜材料具有顯著的促進(jìn)牙周組織生長(zhǎng)的作用，特別對(duì)修復(fù)牙周骨組織缺損有顯著作用，優(yōu)于單獨(dú)使用PRP或PDLCs的作用。 本研究的創(chuàng)新點(diǎn)在于首次將PDLCs、PLGA、Co和PRP聯(lián)合應(yīng)用修復(fù)牙周組織缺損，并得出PLGA+PDLCs+PRP+Co生物活性復(fù)合膜材料具有顯著的促進(jìn)牙周組織生長(zhǎng)的作用，為今后進(jìn)一步的臨床實(shí)驗(yàn)提供理論基礎(chǔ)。
【圖文】：

第 1 章 合成 PLGA 膜3 結(jié)果3.1 PLGA 膜大體及掃描電鏡觀察結(jié)果（見(jiàn)圖 1.1）I：A 組 PLGA 膜表面粗糙多孔隙，較脆，很難將膜從表面皿上整張揭下，易折斷。掃描電鏡下觀察孔隙似海綿狀，孔徑大小不均勻，平均孔徑約為 449 μm。II：B 組 PLGA 膜表面較光滑，有一定韌性，易從表面皿上整張揭下，掃描電鏡下觀察孔徑大小均勻，孔隙率高，平均孔徑大小約 132 μm。由此可見(jiàn) B 組 PLGA 膜滿足本實(shí)驗(yàn)的要求。

4 討論組織工程研究中，支架材料的選擇和制備已經(jīng)逐漸成為制約其重要因素之一。近年來(lái)，PLGA 因良好的組織相容性和可降解性成的熱點(diǎn)。有研究表明成骨的速度和材料降解的速度是相關(guān)聯(lián)的，一方面解為骨礦化提供了礦物基質(zhì)，并可以釋放出更多的細(xì)胞因子加速骨另一方面血管及各種細(xì)胞的爬入也加速了材料的降解[6]。也就是說(shuō)材料過(guò)早或過(guò)遲降解都將影響成骨的效果。有實(shí)驗(yàn)表明，SD 大鼠圖 1.2 PLGA 膜不同時(shí)間點(diǎn)體外 PH 變化的測(cè)定結(jié)果Fig. 1.2 PH values in different time in vitro
【學(xué)位授予單位】：吉林大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2012
【分類號(hào)】：R781.4

【參考文獻(xiàn)】

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1 林崇韜,文胡實(shí),孫宏晨,歐陽(yáng)喈;乙酸溶解-酶消化法制備醫(yī)用膠原膜[J];吉林大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2004年01期

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1 劉越;生物活性支架材料的制備及其修復(fù)骨缺損的實(shí)驗(yàn)研究[D];中國(guó)人民解放軍軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院;2008年

本文編號(hào)：2676893