【摘要】：牙根吸收（RR）是正畸治療中后果較為嚴重的并發(fā)癥，可稱之為正畸源性牙根吸收[1](OITRR)，不同學者關于其發(fā)生率的調查結果有一定的差異性，從26％[2]-100％[3]不等，這種差異性與研究者采取的研究方法和測量方法的差異性有關。輕度的牙根吸收通常不會影響牙齒的牢固程度，沒有自覺癥狀，但中度、重度的牙根吸收將引起牙齒松動，嚴重影響牙齒的健康，甚至造成牙齒脫落。一些學者認為OITRR是一個無菌性炎癥的過程，具有炎癥的特征[4]。細胞外基質(ECM)是在創(chuàng)建細胞形態(tài)發(fā)生、發(fā)展的環(huán)境中起重要作用的一種大分子�；|金屬蛋白酶（MMPs）是參與ECM降解的一種蛋白酶。在正常的生理條件下，MMPs的轉錄，酶原的活化，與特定細胞外基質的相互作用均在正常水平，且受內源性抑制劑的抑制[5,6]。基質金屬蛋白酶抑制劑（TIMPs）是MMPs的特異性抑制劑，抑制MMPs在組織內的活性[7,8]。本實驗中我們建立了OITRR動物模型，通過對根周組織中白細胞介素1(IL-1β)是否存在特異性高表達狀況的研究，以分析牙根吸收發(fā)生發(fā)展中所存在的炎癥因子介導機制；然后又通過IL-1β對人牙周膜細胞(hPDLCs)中MMP-1與TIMP-1mRNA和蛋白表達的影響研究，分析探討了OITRR發(fā)生的機制。 目的： 探討IL-1β與OITRR的關系，以分析其發(fā)生機制。 方法： 建立犬牙根吸收的動物模型，刮取根周組織，應用RT-PCR檢測IL-1βmRNA在根吸收的根周組織與正常根周組織之間表達的差異性。體外培養(yǎng)hPDLCs，設立IL-1β工作濃度梯度：0.01ng/ml、0.1ng/ml、1ng/ml、10ng/ml，0ng/ml為空白對照組，時間梯度：6h、12h、24h，分別運用PCR和細胞免疫熒光化學方法檢測IL-1β作用下，hPDLCs中MMP-1、TIMP-1表達的變化。 結果： 1犬牙根周組織中IL-1β表達情況檢測 PCR電泳結果顯示，動物模型中發(fā)生牙根吸收的根周組織，在250bp（IL-1β引物大小為243bp）的位置有較清晰條帶，但對照組根周組織未觀察到明顯的電泳條帶，這一結果提示牙根吸收組根周組織中的內源性IL-1βmRNA表達量高于對照組。 2IL-1β對hPDLCs中MMP-1、TIMP-1表達的影響研究 2.1MMP-1、TIMP-1mRNA濃度依賴的表達 統(tǒng)計學分析顯示：與對照組相比，0.01ng/ml與0.1ng/ml組對MMP-1表達的影響無統(tǒng)計學意義（方差分析，p=0.165，p=0.205）；1ng/ml和10ng/ml組均促進MMP-1的表達(p0.05)，但這兩組間MMP-1的表達無顯著性差異。0.01ng/ml、0.1ng/ml、1ng/ml、10ng/ml濃度組與對照組相比，TIMP-1的表達均有下降（p0.05），且10ng/ml濃度組的TIMP-1的表達下降程度高于其它濃度組（p0.05）。這一結果提示，IL-1β對hPDLCs中MMP-1表達有促進作用，對TIMP-1的表達則有抑制作用，其中10ng/ml濃度組對MMP-1表達的促進和對TIMP-1表達的抑制作用最強。 2.2MMP-1、TIMP-1mRNA時間依賴的表達 以上面的實驗結果作為IL-1β濃度選擇依據，再進行了IL-1β作用效應的時間梯度研究：10ng/mlIL-1β刺激hPDLCs，檢測其MMP-1與TIMP-1表達的變化，采集時間點為6h、12h、24h。統(tǒng)計學分析表明：與對照組比較，10ng/mlIL-1β刺激后，，自12h開始，MMP-1的表達出現上調情況（p0.05），且24h組較12h組MMP-1表達上調程度更高（p0.05）。10ng/mlIL-1β刺激6h后hPDLCs中TIMP-1的表達就開始出現抑制情況（p0.05），隨時間的延長，這種抑制作用逐漸增強，24h抑制作用最強（p0.05） 2.3MMP-1、TIMP-1蛋白的表達 濃度為10ng/ml的IL-1β作用24h后，hPDLCs的MMP-1蛋白表達量高于對照組，TIMP-1蛋白表達量低于對照組，這一結果說明IL-1β具有促進hPDLCs中MMP-1蛋白的表達，抑制TIMP-1蛋白表達的作用，這與mRNA的結果是一致的。 結論: 1. OITRR的發(fā)生過程中，存在著炎癥因子介導機制。 2.炎癥因子IL-1β可以促進hPDLCs中MMP-1的表達，抑制TIMP-1的表達，這可能是牙根吸收發(fā)生的分子生物學機制之一。
【學位授予單位】：第四軍醫(yī)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2012
【分類號】：R783.5

【參考文獻】

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1 解志強,白玉興,王邦康;小型豬正畸牙根吸收實驗動物模型的建立[J];北京口腔醫(yī)學;2004年01期

2 白雪芹;蔣紅;郝艷紅;曾祥龍;;Damon3自鎖托槽與普通金屬托槽對牙齒垂直移動影響的實驗研究[J];口腔醫(yī)學研究;2008年02期

3 李永明,林珠,馮雪,段銀鐘;MMP-3及TIMP-1在正畸牙周組織改建過程中的表達[J];實用口腔醫(yī)學雜志;2000年06期

4 張子川;張云飛;曹軍;;持續(xù)性壓低重力致牙根吸收動物模型的建立[J];牙體牙髓牙周病學雜志;2009年06期

5 許天民,SBaumrind;青少年期正畸治療與上中切牙牙根吸收的關系[J];中華口腔醫(yī)學雜志;2002年04期

6 姜若萍,張丁,傅民魁;固定正畸后牙根吸收的部分影響因素分析[J];中華口腔醫(yī)學雜志;2003年06期

7 韓光麗,賀紅,華先明,汪說之,曾祥龍;大鼠牙移動性根吸收組織內組織蛋白酶K及白細胞介素6mRNA的表達[J];中華口腔醫(yī)學雜志;2004年04期

本文編號：2655953