【摘要】： 遺傳性釉質(zhì)形成缺陷癥(amelogenesis imperfecta,AI)是遺傳學(xué)和臨床上呈現(xiàn)異質(zhì)性表現(xiàn)的癥候群,表現(xiàn)為釉質(zhì)的形成和礦化異常。與釉質(zhì)發(fā)育有關(guān)的各種候選基因結(jié)構(gòu)改變均可導(dǎo)致釉質(zhì)的形成缺陷。本研究以吉林大學(xué)口腔醫(yī)學(xué)院門診收集到2例遺傳性釉質(zhì)形成缺陷癥家系為基礎(chǔ),對(duì)其臨床表型、基因結(jié)構(gòu)以及基因型與表型之間的關(guān)系進(jìn)行了探討。 家系1受累個(gè)體主要表現(xiàn)為前牙牙冠切1/3及后牙咬合面的釉質(zhì)缺損,家系2受累個(gè)體主要表現(xiàn)在牙冠的切緣和牙合面1/4～1/3處可見釉質(zhì)呈白色或黃色帶狀區(qū)域,每個(gè)家系中受累個(gè)體臨床表型相似。根據(jù)Witkop分類,結(jié)合家系系譜圖和患者臨床表型,診斷家系1為局限性發(fā)育不全型AI,屬常染色體顯性遺傳;家系2為雪帽型成熟不全型AI,屬常染色體顯性遺傳。 以釉蛋白基因和釉基質(zhì)絲氨酸蛋白酶基因?yàn)槟康幕?采用PCR-SSCP技術(shù)對(duì)家系1和家系2釉蛋白基因和釉基質(zhì)絲氨酸蛋白酶基因突變進(jìn)行檢測(cè),結(jié)果未發(fā)現(xiàn)PCR-SSCP出現(xiàn)異常的電泳帶,即未發(fā)現(xiàn)釉蛋白基因或釉基質(zhì)絲氨酸蛋白酶基因位點(diǎn)發(fā)生突變,說(shuō)明家系1和家系2釉質(zhì)形成缺陷癥不是由釉蛋白基因和釉基質(zhì)絲氨酸蛋白酶基因結(jié)構(gòu)改變所引起�？赡艽嬖谄渌虏』蛟谟再|(zhì)形成過程中起重要作用。 由于對(duì)釉基質(zhì)絲氨酸蛋白酶研究資料較少,在釉質(zhì)形成中的作用機(jī)制還不完全清楚。本實(shí)驗(yàn)擬建立釉基質(zhì)絲氨酸蛋白酶基因敲出鼠動(dòng)物模型,研究釉基質(zhì)絲氨酸蛋白酶基因突變與臨床表型的相關(guān)關(guān)系,以闡述釉質(zhì)形成缺陷癥的分子機(jī)制。首先設(shè)計(jì)并構(gòu)建了針對(duì)小鼠釉基質(zhì)絲氨酸蛋白酶基因exon 4和exon 5區(qū)域進(jìn)行敲除的置換型打靶載體,為建立釉基質(zhì)絲氨酸蛋白酶基因敲除小鼠模型而進(jìn)一步研究該基因的功能奠定實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。依據(jù)已完成的釉基質(zhì)絲氨酸蛋白酶基因序列分析結(jié)果,結(jié)合GenBank上提供的小鼠EMSP1基因序列,利用Oligo 6.0軟件設(shè)計(jì)兩對(duì)引物,分別擴(kuò)增長(zhǎng)為5000bp和1700bp片段作為同源長(zhǎng)短臂。將其分別插入通用型基因敲除載體pSSC-9的正向篩選基因neo兩側(cè),用PCR方法、限制性內(nèi)切酶酶切和DNA序列分析進(jìn)行鑒定。結(jié)果成功構(gòu)建了小鼠EMSP1基因打靶載體。在此基礎(chǔ)上,采用同源重組方法構(gòu)建具有新霉素抗性的小鼠LIF真核表達(dá)載體pcDNA3.1-LIF,并通過基因轉(zhuǎn)染建立了表達(dá)LIF的胚胎成纖維細(xì)胞,該細(xì)胞可有效抑制干細(xì)胞的分化。為建立EMSP1基因敲除小鼠模型和進(jìn)一步研究該基因的功能奠定了基礎(chǔ)。
【圖文】：

家系成員未發(fā)現(xiàn)有與釉質(zhì)形成缺陷癥有關(guān)的系統(tǒng)性疾病或綜合征。對(duì)皮膚、頭發(fā)、指甲檢查未發(fā)現(xiàn)異常。2．2 臨床表現(xiàn)家系 1 先證者徐某某，，女，23 歲，2004 年 11 月 18 日在吉林大學(xué)口腔醫(yī)學(xué)院正畸門診就診時(shí)發(fā)現(xiàn)患有釉質(zhì)形成缺陷癥�；颊呷谘莱首攸S色，前牙牙冠切 1/3 和后牙牙合面的釉質(zhì)缺損，牙本質(zhì)暴露，牙排列不齊，前牙開牙合（圖 1，圖 2）�？谇粰z查，牙齦無(wú)充血、水腫，下前牙牙齦有齦上結(jié)石Ⅰ°。X 線片顯示，所有牙釉質(zhì)透光性、髓腔形態(tài)及根尖結(jié)構(gòu)均未見異常。家系中受累個(gè)體的牙外觀與先證者基本相似，釉質(zhì)病變同樣涉及到全口牙，均出現(xiàn)前牙切緣和后牙牙合面的受累，前牙切 1/3 釉質(zhì)呈線狀缺損，后牙牙合面釉質(zhì)大面積缺損，其余部位的牙釉質(zhì)顏色、硬度及形態(tài)基本正常。除了先證者外，家系中其他受累成員未見開牙合。家系中男女患者的臨床表現(xiàn)相似。

家系成員未發(fā)現(xiàn)有與釉質(zhì)形成缺陷癥有關(guān)的系統(tǒng)性疾病或綜合征。對(duì)皮膚、頭發(fā)、指甲檢查未發(fā)現(xiàn)異常。2．2 臨床表現(xiàn)家系 1 先證者徐某某，女，23 歲，2004 年 11 月 18 日在吉林大學(xué)口腔醫(yī)學(xué)院正畸門診就診時(shí)發(fā)現(xiàn)患有釉質(zhì)形成缺陷癥�；颊呷谘莱首攸S色，前牙牙冠切 1/3 和后牙牙合面的釉質(zhì)缺損，牙本質(zhì)暴露，牙排列不齊，前牙開牙合（圖 1，圖 2）�？谇粰z查，牙齦無(wú)充血、水腫，下前牙牙齦有齦上結(jié)石Ⅰ°。X 線片顯示，所有牙釉質(zhì)透光性、髓腔形態(tài)及根尖結(jié)構(gòu)均未見異常。家系中受累個(gè)體的牙外觀與先證者基本相似，釉質(zhì)病變同樣涉及到全口牙，均出現(xiàn)前牙切緣和后牙牙合面的受累，前牙切 1/3 釉質(zhì)呈線狀缺損，后牙牙合面釉質(zhì)大面積缺損，其余部位的牙釉質(zhì)顏色、硬度及形態(tài)基本正常。除了先證者外，家系中其他受累成員未見開牙合。家系中男女患者的臨床表現(xiàn)相似。
【學(xué)位授予單位】：吉林大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2007
【分類號(hào)】：R780.2

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前3條

1 穆亞冰;釉基質(zhì)絲氨酸蛋白酶的結(jié)構(gòu)及生理病理學(xué)意義[J];國(guó)外醫(yī)學(xué).口腔醫(yī)學(xué)分冊(cè);2003年03期

2 王海,陸泉枝,連正興,李寧,吳常信;電穿孔導(dǎo)入綠色熒光蛋白基因于綿羊胎兒成纖維細(xì)胞研究[J];中國(guó)畜牧雜志;2004年02期

3 侯玉杰,陳蘭英,駱延;遺傳性牙釉質(zhì)發(fā)育不全家系的調(diào)查與分析[J];中國(guó)優(yōu)生與遺傳雜志;2002年06期

本文編號(hào)：2655987