發(fā)布時間：2020-05-08 23:26

【摘要】： 目的 金屬合金作為口腔修復(fù)材料應(yīng)用于人體內(nèi),在人體生理環(huán)境中使用,對生命有機體會產(chǎn)生一定的作用和影響。生物相容性評價是研究醫(yī)用金屬材料生物性能的重要內(nèi)容之一,目前新材料在用于人體之前都要求必須經(jīng)過全面的生物相容性檢測。無鎳奧氏體不銹鋼(BIOSSN4)是中科院金屬研究所研制的一種新型的醫(yī)用金屬材料,這種材料優(yōu)良的機械性能已經(jīng)通過實驗得到驗證,但其生物相容性還需要進(jìn)一步的研究。本實驗就是從生物學(xué)角度,通過細(xì)胞培養(yǎng)及流式細(xì)胞儀檢測,來了解無鎳奧氏體不銹鋼和其他4種醫(yī)學(xué)常用的金屬合金對L929細(xì)胞凋亡的影響,通過比較,進(jìn)而評價一下無鎳奧氏體不銹鋼的生物相容性。 材料與方法 1、細(xì)胞培養(yǎng) 小鼠成纖維細(xì)胞L929用含10%胎牛血清的RPMI1640細(xì)胞培養(yǎng)基在37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)并傳代。 2、流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞在凋亡不同階段的凋亡數(shù)量 將5種金屬合金(無鎳奧氏體不銹剛、317L奧氏體不銹鋼金合金、鉆鉻合金、鎳鉻合金、金合金)及陰性對照組的浸提液與L929細(xì)胞聯(lián)合培養(yǎng)24、48小時后分別進(jìn)行EGFP, PI雙染色,然后通過流式細(xì)胞儀檢測不同實驗組細(xì)胞在凋亡不同時期的凋亡率。 3、熒光顯微鏡下觀察凋亡細(xì)胞 滴一滴上述各組染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞,分別于熒光顯微鏡下觀察Annexin V-EGFP熒光信號呈綠色,PI熒光信號呈紅色。 結(jié)果 實驗組細(xì)胞經(jīng)AnnexinV-EGFP和PI雙染色后,熒光顯微鏡觀察可見細(xì)胞在凋亡不同時期的形態(tài)變化。流式細(xì)胞儀檢測結(jié)果表明各實驗組引起的細(xì)胞凋亡率是不同的。其中金合金組細(xì)胞凋亡率最低并且接近陰性對照組,無鎳奧氏體不銹鋼組引起的細(xì)胞凋亡率與金合金組較接近,其它金屬合金凋亡率均高于金合金組,其中鎳鉻合金引起的凋亡率最高且遠(yuǎn)高于金合金組,其凋亡率由低到高的順序為：金合金無鎳奧氏體不銹鋼鈷鉻合金317L奧氏體不銹鋼鎳鉻合金。 結(jié)論 1、各實驗組生物相容性由好到差的順序依次為：金合金、無鎳奧氏體不銹鋼、鈷鉻合金、317L奧氏體不銹鋼、鎳鉻合金。 2、無鎳奧氏體不銹鋼可考慮應(yīng)用于臨床。
【圖文】：

各實驗組加樣培養(yǎng)48小時后細(xì)胞形態(tài)

各實驗組流式細(xì)胞儀檢測48小時后的散點圖
【學(xué)位授予單位】：中國醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2010
【分類號】：R783.1

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本文編號：2655203