【摘要】：疼痛是正畸治療中常見的問題之一。通常在加力后幾小時(shí)出現(xiàn)，持續(xù)幾天后消失。目前對正畸致痛機(jī)制的研究大多局限于牙周組織內(nèi)的神經(jīng)改變，而對初級(jí)感覺神經(jīng)元胞體及其中樞末梢端改變的研究很少。傳導(dǎo)口頜面部疼痛的初級(jí)感覺神經(jīng)元位于三叉神經(jīng)節(jié)(TG)，其外周突伸向外周組織，感受外周刺激；中樞突將外周信息傳至三叉神經(jīng)脊束核尾側(cè)亞核(Vc)，在此中繼后傳至上位腦中樞，完成初級(jí)感覺信息的傳遞。因此，探討在正畸加力狀態(tài)下，這些神經(jīng)元上特異表達(dá)的受體、通道或信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子發(fā)生的可塑性變化，有助于我們闡明正畸疼痛的發(fā)病機(jī)制。 其中，CGRP是極為重要的疼痛興奮性遞質(zhì)。其在初級(jí)感覺神經(jīng)元合成、表達(dá)和釋放的增加是神經(jīng)元興奮性增高、致敏的標(biāo)志，也是機(jī)體產(chǎn)生慢性疼痛的主要機(jī)制。因此，觀察正畸加力后TG及其周圍突和中樞突CGRP的變化，能明確正畸加力是否發(fā)生了初級(jí)中樞的敏化現(xiàn)象，有助于了解正畸致痛的機(jī)制。 另外，大量研究顯示神經(jīng)生長因子(NGF)在痛覺過敏及異常疼痛中發(fā)揮重要作用。損傷局部區(qū)域內(nèi)的NGF通過與支配該區(qū)域感覺神經(jīng)末稍上的高親合力受體TrkA結(jié)合后，逆轉(zhuǎn)運(yùn)至神經(jīng)元胞體，導(dǎo)致神經(jīng)元發(fā)生可塑性改變，合成神經(jīng)肽增加，從而使初級(jí)感覺神經(jīng)元致敏，導(dǎo)致痛覺過敏。而有關(guān)牙周膜內(nèi)NGF高親合力受體-TrkA的報(bào)道很少。 針對上述研究現(xiàn)狀，我們設(shè)計(jì)本實(shí)驗(yàn)： 第一部分： 實(shí)驗(yàn)性牙移動(dòng)cGRP在初級(jí)感覺神經(jīng)元的改變 目的：觀察實(shí)驗(yàn)性牙移動(dòng)后，初級(jí)感覺神經(jīng)元興奮性遞質(zhì)CGRP的合成、外周及中樞端末梢釋放的狀況。分析正畸疼痛時(shí)，初級(jí)感覺神經(jīng)元痛信號(hào)發(fā)生、傳導(dǎo)以及敏感化機(jī)制。 解放軍軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院博士論文 中文摘要 方法:制備大鼠實(shí)驗(yàn)性牙移動(dòng)動(dòng)物模型，采用Rl’- pCR方法觀察不同時(shí)間 點(diǎn)三叉神經(jīng)節(jié)CGR衛(wèi)mRNA表達(dá)的變化。采用免疫組織化學(xué)染色方法，觀察 牙髓、牙周膜、TG及vc內(nèi)CGRP免疫陽性結(jié)構(gòu)的改變。 結(jié)果: (1)實(shí)驗(yàn)性牙移動(dòng)后牙髓、牙周膜內(nèi)CGRP一ir神經(jīng)纖維染色強(qiáng)度先減少而 后增加。實(shí)驗(yàn)側(cè)牙髓及牙周膜內(nèi)CGRP一i:神經(jīng)纖維在加力后6H、24H組明 顯少于對照組;3D組較對照組增多;lw組增多最為明顯;ZW組逐漸恢復(fù) 至對照組水平。 (2)實(shí)驗(yàn)性牙移動(dòng)后6H組實(shí)驗(yàn)側(cè)TG CGRP一ir節(jié)細(xì)胞少于對照組;3D組、 IW組，實(shí)驗(yàn)側(cè)CGI理一ir細(xì)胞多于對照組，其中3D組增多最為明顯;ZW組， 恢復(fù)至對照同一水平。 (3)實(shí)驗(yàn)性牙移動(dòng)后6H，實(shí)驗(yàn)側(cè)TG CG即mRNA的表達(dá)沒有明顯改變;、 24H組、3D組、IW組，實(shí)驗(yàn)側(cè)TG CGR衛(wèi)mRNA的表達(dá)強(qiáng)于對側(cè);ZW組， 左右側(cè)TG表達(dá)CGRP mRNA無明顯差異。 (4)實(shí)驗(yàn)性牙移動(dòng)加力后6H、24H實(shí)驗(yàn)側(cè)vc內(nèi)CGRP一ir結(jié)構(gòu)小于對照 側(cè);加力后3D組CGRp一ir結(jié)構(gòu)面積大于對照側(cè)，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;IW組實(shí) 驗(yàn)側(cè)V。內(nèi)CGRP一ir結(jié)構(gòu)面積明顯大于對照側(cè);加力后ZW，實(shí)驗(yàn)側(cè)與對照側(cè) vc內(nèi)CG即一ir結(jié)構(gòu)面積相近。 結(jié)論:實(shí)驗(yàn)性牙移動(dòng)后，初級(jí)感覺神經(jīng)元中痛感受興奮性神經(jīng)遞質(zhì)CGRP 的合成、表達(dá)以及外周端和中樞端釋放增加。表明實(shí)驗(yàn)性牙移動(dòng)影響了初級(jí) 感覺神經(jīng)元痛信號(hào)的發(fā)生、傳導(dǎo)，使之致敏。分析初級(jí)神經(jīng)元敏感性增加， 傷害感受器致敏，為正畸致痛的原因之一。 第二部分: 實(shí)驗(yàn)性牙移動(dòng)TG內(nèi)TrkA的改變 目的:觀察實(shí)驗(yàn)性牙移動(dòng)時(shí)，NGF受體一TrkA在TG內(nèi)的改變，及其與 解放軍軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院博士論文 中文摘要 CGRP改變的關(guān)系。 方法:采用RT-PCR及免疫熒光方法研究實(shí)驗(yàn)性牙移動(dòng)后，TG內(nèi)TrkA n1RNA及其免疫陽性細(xì)胞的改變。 結(jié)果: (l)實(shí)驗(yàn)性牙移動(dòng)加力6H組實(shí)驗(yàn)側(cè)TrkA一ir神經(jīng)元與對照組相比無明顯 差別;24H組、3D組、lw組，實(shí)驗(yàn)側(cè)TG實(shí)驗(yàn)側(cè)TrkA一i:神經(jīng)元增多，并大 于對照組;其中，24H組實(shí)驗(yàn)側(cè)TrkA.ir神經(jīng)元最多;ZW組，實(shí)驗(yàn)組TG TrkA一ir神經(jīng)元與對照組相比無明顯差異。 (2)實(shí)驗(yàn)性牙移動(dòng)后6H，實(shí)驗(yàn)側(cè)TrkA mRNA的表達(dá)沒有明顯改變;24H、 3D組，IW組實(shí)驗(yàn)組TG內(nèi)TrkA mRNA的表達(dá)強(qiáng)于對照組;ZW組，實(shí)驗(yàn)側(cè) TrkA mRNA的表達(dá)恢復(fù)至正常水平。 結(jié)論:實(shí)驗(yàn)性牙移動(dòng)時(shí)，TG內(nèi)TrkA的表達(dá)升高，TI，kA一ir神經(jīng)元也增多。 其增多的變化趨勢和時(shí)間與CGRp的變化相似，但略早于TrkA。提示其二者 之間存在相關(guān)性。由于NGF與TrkA結(jié)合后可以促進(jìn)感覺神經(jīng)元表達(dá)神經(jīng)膚SP 和CGRp，我們分析TrkA可能通過調(diào)控CGRP的表達(dá)而間接的參與實(shí)驗(yàn)性牙移 動(dòng)時(shí)的痛覺傳遞以及牙周組織的骨改建。 第三部分: 神經(jīng)生長因子在牙周組織中的表達(dá) 目的:研究牙周組織中是否存在NGF的表達(dá)。 方法:采用Rl’- pCR方法研究培養(yǎng)的人牙周膜成纖維樣細(xì)胞(hPDLF) 是否表達(dá)NGF InRNA;采用hPDLF條件培養(yǎng)基與PclZ細(xì)胞共培養(yǎng)的方法研 究hPDLF是否分泌具有活性功能的NGF。 結(jié)果: (1)通過RT-PCR技術(shù)，在培養(yǎng)的hPDLF中擴(kuò)增出NGF mRNA陽性產(chǎn)物。 (2)在hPDLF條件培養(yǎng)基中培養(yǎng)的PC12細(xì)胞長出突起，向神經(jīng)元樣細(xì)胞 解放軍軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院博士論文 中文摘要 分化。對照組及NGF抗血清培養(yǎng)的PC12細(xì)胞僅有少量長出突起。 結(jié)論:本研究通過離體研究初次顯示培養(yǎng)的人牙周膜成纖維樣細(xì)胞 (hPDLF)表達(dá)NGF mRNA并分泌NGF蛋白，提?
【圖文】：

2.(a)HE染色(x50)。(b)張力側(cè)牙周間隙增寬，牙周膜纖維排列紊亂，血管，充血(火200)。(c)在壓力側(cè)牙周組織受到擠壓而緊縮，牙周間隙變窄，相應(yīng)的骨出現(xiàn)蠶食狀的吸收陷窩(x200)o

4.(a)正常大鼠牙周膜內(nèi)的cGRI，一:神經(jīng)纖維為單個(gè)的軸突或呈束狀位于牙周膜內(nèi)牙槽骨側(cè)。偽).加力后6小時(shí)牙周膜內(nèi)CGR衛(wèi)一ir神經(jīng)纖維明顯少于對照組，僅牙根少量cGRP一ir纖維。(c).3D組壓力側(cè)CGRP一ir神經(jīng)纖維較對照組略有增多。(d)l壓力側(cè)牙周膜CGRP一ir神經(jīng)纖維較對照組增多，神經(jīng)纖維排列紊亂，出現(xiàn)較多分支曲。B，牙槽骨;PDL，牙周膜;v，血管;D，牙本質(zhì);P，牙髓。箭頭所指為CG即一經(jīng)纖維。(xZoo)
【學(xué)位授予單位】：中國人民解放軍軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2004
【分類號(hào)】：R783.5

【參考文獻(xiàn)】

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1 馮宇鵬,楊鯤,李云慶;大鼠延髓背角淺層內(nèi)CGRP陽性終末與GABA及甘氨酸能神經(jīng)元的突觸聯(lián)系[J];第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2002年08期

2 李云慶,王智明,施際武;大鼠三叉神經(jīng)尾側(cè)亞核和脊髓內(nèi)離子型谷氨酸受體、GABA_A受體和甘氨酸受體的分布[J];解剖學(xué)報(bào);1997年02期

3 劉可群,鄧燕,談?dòng)哑?姜威;正畸施力初始(24小時(shí))牙髓中神經(jīng)肽P物質(zhì)變化的實(shí)驗(yàn)研究[J];口腔正畸學(xué);1997年04期

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1 朱美玲;SP、CGRP、NO在牙齒傷害性感受過程及TENS鎮(zhèn)痛中的作用[D];第四軍醫(yī)大學(xué);1998年

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本文編號(hào)：2647565