【摘要】：第一部分 目的：探討口腔鱗狀細(xì)胞癌組織中,hERG1蛋白表達(dá)及與口腔鱗狀細(xì)胞癌臨床病理因素和腫瘤血管生成之間的關(guān)系。 方法：收集口腔鱗狀細(xì)胞癌和正�？谇火つさ慕M織標(biāo)本,免疫組織化學(xué)染色法檢測(cè)hERG1蛋白在腫瘤和正常組織中的表達(dá)情況；卡方檢驗(yàn)統(tǒng)計(jì)分析hERG1蛋白的表達(dá)與各臨床病理因素之間的關(guān)系；檢測(cè)口腔鱗癌組織標(biāo)本中VEGF-A的表達(dá)和MVD,Spearman等級(jí)相關(guān)性統(tǒng)計(jì)分析hERG1、VEGF-A、 MVD之間的相關(guān)性；免疫蛋白印記法和全細(xì)胞膜片鉗分別檢測(cè)口腔鱗癌細(xì)胞系中的hERG1蛋白表達(dá)和hERG1鉀離子通道電流情況。 結(jié)果：在67例鱗狀細(xì)胞癌和24例正�？谇火つそM織標(biāo)本中,38.8%(26/67)的口腔鱗狀細(xì)胞癌組織中hERG1蛋白表達(dá)陽(yáng)性,4.2%(1/24)的正常口腔黏膜組織中hERG1蛋白表達(dá)陽(yáng)性,兩組間有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.01); hERGl蛋白的表達(dá)水平在口腔鱗狀細(xì)胞癌TNM臨床分期的組間有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05),在其他各臨床病理因素組間沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05); hERGl與VEGF-A、MVD之間均呈顯著性線性正相關(guān)(P0.05)；四種口腔鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞Tca-8113、GNM、CAL27和SCC-4都無(wú)hERG1蛋白表達(dá);CAL27細(xì)胞中未檢測(cè)到hERG1鉀離子通道電流IhERg1。 結(jié)論：hERG1鉀離子通道可能在正�？谇火つは驉盒赞D(zhuǎn)化的過(guò)程中起到了一定的作用;hERG1蛋白可能成為一種口腔鱗狀細(xì)胞癌早期診斷和愈后評(píng)估的分子指標(biāo)；hERG1鉀離子通道可能參與了口腔鱗狀細(xì)胞癌的血管生成。 第二部分 目的：了解口腔鱗狀細(xì)胞癌組織中血管擬態(tài)的情況;探討口腔鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞能否與晚期內(nèi)皮祖細(xì)胞在體外發(fā)生自發(fā)性融合以及融合細(xì)胞能否獲得兩種細(xì)胞的表型；探討口腔鱗癌-晚期內(nèi)皮祖細(xì)胞體外基質(zhì)膠三維接觸共培養(yǎng)后是否有融合細(xì)胞參與管狀形成。 方法：采用CD34免疫組織化學(xué)和PAS雙重染色法對(duì)67例口腔鱗狀細(xì)胞癌組織標(biāo)本進(jìn)行染色,觀察其中血管擬態(tài)的情況；分離、培養(yǎng)、鑒定大鼠骨髓來(lái)源的晚期內(nèi)皮祖細(xì)胞;紅色熒光染料CM-DiI標(biāo)記的晚期內(nèi)皮祖細(xì)胞與SCC-4細(xì)胞共培養(yǎng),然后用免疫熒光法綠色熒光標(biāo)記Cytokeratin,觀察這兩種細(xì)胞是否有細(xì)胞融合；晚期內(nèi)皮祖細(xì)胞與SCC-4細(xì)胞接觸共培養(yǎng),免疫熒光雙染標(biāo)記兩種細(xì)胞的特異性標(biāo)記物,觀察融合細(xì)胞的表型；SCC-4細(xì)胞和紅色熒光染料CM-DiI標(biāo)記的晚期內(nèi)皮祖細(xì)胞于基底膠三維接觸共培養(yǎng),免疫熒光法綠色熒光標(biāo)記Cytokeratin后觀察是否有融合細(xì)胞參與管狀形成。 結(jié)果：本組67例口腔鱗癌標(biāo)本中有2例可見(jiàn)血管擬態(tài)現(xiàn)象,發(fā)生率為2.99%;晚期內(nèi)皮祖細(xì)胞與口腔鱗癌SCC-4細(xì)胞可以在體外自發(fā)性融合,融合細(xì)胞可同時(shí)表達(dá)晚期內(nèi)皮祖細(xì)胞特異性標(biāo)記物CD31和SCC-4細(xì)胞特異性標(biāo)記物Cytokeratin;晚期內(nèi)皮祖細(xì)胞和SCC-4細(xì)胞的融合細(xì)胞參與體外管狀形成。 結(jié)論：口腔鱗狀細(xì)胞癌中有血管擬態(tài)現(xiàn)象,但較為少見(jiàn)；腫瘤細(xì)胞與晚期內(nèi)皮祖細(xì)胞在體外可以發(fā)生自發(fā)性融合,融合細(xì)胞可獲得兩種細(xì)胞的表型；腫瘤細(xì)胞與晚期內(nèi)皮祖細(xì)胞融合可能是血管擬態(tài)形成的一種潛在機(jī)制。
【圖文】：

引0Guasti等"4]

1.免疫組織化學(xué)法檢測(cè)hERGl蛋白在口腔正常炥膜組織和口腔鱗狀細(xì)胞癌組中的表達(dá)。A.不表達(dá)hERGl的正常粘膜；B.表達(dá)hERGl的正常粘膜；C.不表hERGl的高分化麟癌；D.表達(dá)hERGl的高分化鱗癌；E.不表達(dá)hERGl的中分化癌；F.表達(dá)hERGl中分化麟癌；G.不表達(dá)hERGl的低分化麟癌；H.表達(dá)hERGl的低分化麟癌。（XlOO)31
【學(xué)位授予單位】：武漢大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：R739.85

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本文編號(hào)：2639032