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變異鏈球菌htrA和clpP基因?qū)ζ溲趸瘧?yīng)激的影響

發(fā)布時間:2020-04-23 04:51
【摘要】:目的建立變異鏈球菌標(biāo)準(zhǔn)株、htrA基因缺陷株、clpP基因缺陷株及htrA-clpP雙基因缺陷株的生長模型,觀察比較幾種菌株在氧化應(yīng)激條件下的生長情況的差異,研究變異鏈球菌htrA、clpP基因缺失對其氧化應(yīng)激耐受性的影響。方法利用變異鏈球菌標(biāo)準(zhǔn)株及前期實驗成功構(gòu)建并保存的htrA單基因缺陷株、clpP單基因缺陷株及(?)htrA-clpP雙基因缺陷株,測定4種菌株在普通TPY液體培養(yǎng)基中不同時段的吸光度(A值),并將4種菌株分別培養(yǎng)在含H2O2終濃度為0.0005%的TPY液體培養(yǎng)基中37℃微需氧條件下培養(yǎng),從接種入培養(yǎng)基開始以2h間隔采用酶聯(lián)免疫檢測儀在600nnm下測定各菌株在各時間點的吸光度值,分別確定各菌株在不同培養(yǎng)條件下的生長情況并繪制細(xì)菌生長曲線比較其生長情況的差異,并進行統(tǒng)計學(xué)分析。 結(jié)果1.在普通TPY液體培養(yǎng)基中,htrA單基因缺陷株、clpP單基因缺陷株及htrA-clpP雙基因缺陷株生長周期均發(fā)生改變,對數(shù)期峰值提前且此階段生長速度較標(biāo)準(zhǔn)快(P0.05),而標(biāo)準(zhǔn)株的對數(shù)期峰值及穩(wěn)定期A值均明顯高于缺陷株(P0.05),24h測得缺陷株A值比標(biāo)準(zhǔn)株A值明顯降低;2.在含H202終濃度為0.0005%的TPY液體培養(yǎng)基中,與標(biāo)準(zhǔn)株相比,htrA單基因缺陷株、clpP單基因缺陷株及htrA-clpP雙基因缺陷株對H202敏感性增強,此時標(biāo)準(zhǔn)株在各生長時期的生長速度均高于缺陷株的生長速度(P0.05),標(biāo)準(zhǔn)株和各缺陷株生長能力較無H202條件下明顯降低(P0.05); clpP-htrA雙基因缺陷株在氧化應(yīng)激環(huán)境中生長能力弱于clpP、htrA單基因缺陷株,差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論變異鏈球菌htr、clpP基因缺失均可抑制變異鏈球菌的生長,與變異鏈球菌標(biāo)準(zhǔn)株相比,htrA、clpP基因單獨缺失或同時缺失均可對其氧化應(yīng)激能力有一定影響。
【學(xué)位授予單位】:天津醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2013
【分類號】:R781.1

【參考文獻】

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本文編號:2637372

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