【摘要】： 口腔扁平苔蘚(oral lichen planus, OLP)是一種常見(jiàn)的口腔黏膜病,其在口腔黏膜病中的發(fā)病率僅次于復(fù)發(fā)性口腔潰瘍(recurrent aphthous ulcer, RAU)。該疾病常常遷延不愈,給病人造成巨大痛苦。由于口腔扁平苔蘚病因不明,因此治療以對(duì)癥為主,經(jīng)常使用免疫抑制劑,如糖皮質(zhì)激素等。移植物抗宿主病(Graft-vs-host disease ,GVHD)是同種異體骨髓移植(bone marrow transplantation ,BMT)的一種常見(jiàn)的嚴(yán)重的并發(fā)癥�？谇火つ�(nèi)的GVHD無(wú)論在臨床還是組織學(xué)上與OLP都非常相似。雖然兩者可能具有不同的抗原特異性,但是它們可能具有類似的免疫致病機(jī)理,同樣的引起T淋巴細(xì)胞的密集浸潤(rùn),基底細(xì)胞凋亡,上皮基底膜的破壞。因此通常認(rèn)為關(guān)于其中一種疾病的病理生理學(xué)研究結(jié)果也能夠給另一種疾病以提示。間充質(zhì)干細(xì)胞(mesenchymal stem cells, MSC)屬于成體干細(xì)胞,廣泛分布于人體各個(gè)組織,不同組織來(lái)源的MSC具有異質(zhì)性。MSC與胚胎干細(xì)胞相比避免了倫理學(xué)上的爭(zhēng)議,并且由于其低免疫原型,異體移植常不引起明顯的排斥反應(yīng),因此有著廣闊的應(yīng)用前景。人們?cè)贛SC研究的初期主要寄希望于其在組織工程以及再生醫(yī)學(xué)等方面的應(yīng)用,但實(shí)際上MSC第一次應(yīng)用于臨床是利用其免疫調(diào)節(jié)能力治療GVHD,取得了較好的效果。MSC的免疫調(diào)節(jié)能力遂成為MSC研究的另一個(gè)熱點(diǎn)。產(chǎn)生了眾多的關(guān)于MSC治療免疫相關(guān)疾病的基礎(chǔ)和臨床實(shí)驗(yàn)研究。在類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、多發(fā)性硬化、移植物排斥以及自身免疫性心肌炎等的臨床前實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型中,MSC都展示出了良好的治療效果。同時(shí)由于MSC具有免疫調(diào)節(jié)能力,其與機(jī)體的整體免疫平衡有關(guān),其功能的異�？赡芘cOLP發(fā)病有關(guān)。 由于GVHD與OLP之間存在密切的聯(lián)系,我們猜測(cè)MSC同樣也可能用于治療OLP,并且口腔黏膜來(lái)源的MSC可能更具安全性。但是關(guān)于口腔黏膜是否存在MSC以及其生物學(xué)特性鮮見(jiàn)報(bào)道。MSC與OLP的發(fā)病是否相關(guān)也未見(jiàn)報(bào)道。 本實(shí)驗(yàn)分為兩部分: 1.口腔黏膜內(nèi)間充質(zhì)干細(xì)胞的鑒定 目的:證明口腔黏膜內(nèi)存在MSC,并且對(duì)其進(jìn)行分離培養(yǎng)及生物學(xué)特性的研究。方法:利用大鼠為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,采用標(biāo)記滯留細(xì)胞(label retaining cells,LRC)技術(shù),利用BrdU為標(biāo)記物,檢測(cè)大鼠口腔黏膜內(nèi)可能存在的間充質(zhì)干細(xì)胞;利用細(xì)胞貼壁法,分離培養(yǎng)人體正�？谇火つそM織內(nèi)的MSC,應(yīng)用波形絲蛋白抗體(vimentin)、stro-1單克隆抗體、CD146(Mel-CAM)多克隆抗體、Oct3/4單克隆抗體、CD45單克隆抗體、Nestin單克隆抗體等檢測(cè)所分離細(xì)胞的表面抗原表達(dá)。在體外條件下利用成脂和成骨誘導(dǎo)方法,研究所分離細(xì)胞的多向分化能力。結(jié)果:口腔黏膜內(nèi)存在標(biāo)記滯留細(xì)胞,利用細(xì)胞貼壁法能夠從口腔黏膜中分離出一類細(xì)胞,抗原表達(dá)符合MSC的特征,例如Stro-1(+),CD146(+),CD45(-),同時(shí)我們分離出的細(xì)胞還表達(dá)Nestin。在成骨和成脂的誘導(dǎo)下,我們所分離的細(xì)胞具備向成骨細(xì)胞以及脂肪細(xì)胞分化的能力。結(jié)論:口腔黏膜內(nèi)存在間充質(zhì)干細(xì)胞,并且可以通過(guò)傳統(tǒng)的細(xì)胞貼壁法進(jìn)行分離及體外培養(yǎng)。同時(shí)口腔黏膜內(nèi)的MSC與真皮中的MSC類似,可能具有向神經(jīng)系統(tǒng)細(xì)胞分化的潛力。 2.MSC在OLP病變組織中的變化 目的:研究OLP組織內(nèi)MSC的變化。方法:利用MSC的相對(duì)特異性標(biāo)志Stro-1,CD146,Oct4等抗體檢測(cè)OLP與正常組織內(nèi)以上標(biāo)志的表達(dá)改變。結(jié)果:Stro-1在正常組織以及OLP病變組織中均有表達(dá),在正常組織中散在分布,集中于小血管周圍。陽(yáng)性細(xì)胞呈圓環(huán)狀排列,符合血管周細(xì)胞的排列方式。Stro-1在OLP病變組織中主要集中于上皮基底膜下區(qū),并且陽(yáng)性表現(xiàn)強(qiáng)于正常組織。CD146在正常組織及OLP病變組織中都有表達(dá)。在正常組織中散在分布,而在OLP病變組織中主要分布于黏膜下層,固有層很少見(jiàn)陽(yáng)性細(xì)胞,幾乎全部為密集的淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)所占據(jù)。陽(yáng)性區(qū)域的整體分布較為彌散。但是在個(gè)別上皮萎縮較為嚴(yán)重的區(qū)域,上皮基底膜下方可見(jiàn)CD146的高表達(dá)。Oct4在正常組織以及OLP病變組織中均沒(méi)有表達(dá)。結(jié)論:OLP組織與正常組織內(nèi)存在MSC分布上的差別,損傷的基底膜下方增多的MSC可能是機(jī)體修復(fù)受損組織或調(diào)節(jié)過(guò)度免疫反應(yīng)的一種代償反應(yīng)的結(jié)果。但增多MSC是否具備正常的功能還需進(jìn)一步研究。
【圖文】：

大鼠口腔黏膜中BrdU染色結(jié)果(200×)

第三代分離培養(yǎng)細(xì)胞(40×)
【學(xué)位授予單位】：第四軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2010
【分類號(hào)】：R781.5

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 吳玉卓;陳紅;;臍血間充質(zhì)干細(xì)胞體外誘導(dǎo)成肝細(xì)胞的研究進(jìn)展[J];中國(guó)肝臟病雜志(電子版);2008年02期

2 隆玄;吳曉丹;施勁東;李善群;;間充質(zhì)干細(xì)胞在急性肺損傷中的應(yīng)用進(jìn)展[J];中國(guó)臨床醫(yī)學(xué);2011年03期

3 楊光忠;陳文明;;間充質(zhì)干細(xì)胞的免疫調(diào)節(jié)功能[J];臨床合理用藥雜志;2011年31期

4 王燕茹;張育;;間充質(zhì)干細(xì)胞與類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎[J];實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志;2011年16期

5 馮德鵬;李雪莉;范炎;;臍血間充質(zhì)干細(xì)胞的研究進(jìn)展[J];國(guó)際老年醫(yī)學(xué)雜志;2010年05期

6 程慶;白志明;;間充質(zhì)干細(xì)胞歸巢的研究進(jìn)展[J];中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志;2011年09期

7 傅強(qiáng);;他達(dá)拉非可對(duì)干細(xì)胞產(chǎn)生持久而穩(wěn)定的保護(hù)作用[J];中華男科學(xué)雜志;2011年08期

8 瞿海龍;麻曉靜;張冰;梁璐;;基因修飾的間充質(zhì)干細(xì)胞在急性心肌梗死中的應(yīng)用前景[J];中西醫(yī)結(jié)合心腦血管病雜志;2011年07期

9 郭玲玲;李明;邢爽;羅慶良;;間充質(zhì)干細(xì)胞治療重癥急性放射病研究的新進(jìn)展[J];中國(guó)實(shí)驗(yàn)血液學(xué)雜志;2011年03期

10 禹亞彬;儲(chǔ)建;章世海;卞建民;;間充質(zhì)干細(xì)胞體外分化為胰島β細(xì)胞的影響因素的研究進(jìn)展[J];醫(yī)學(xué)綜述;2011年17期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 王巧稚;韓藝;趙宏賢;余鴻;劉廣益;;當(dāng)歸誘導(dǎo)人脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞向神經(jīng)細(xì)胞分化和毒性檢測(cè)的研究[A];中國(guó)解剖學(xué)會(huì)第十一屆全國(guó)組織學(xué)與胚胎學(xué)青年學(xué)術(shù)研討會(huì)論文匯編[C];2009年

2 王玉紅;陳光輝;;地黃低聚糖對(duì)人脂肪組織源性間充質(zhì)干細(xì)胞分泌肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子的影響[A];2010全國(guó)中西醫(yī)結(jié)合危重病、急救醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2010年

3 杜鳳移;王皓;楊樹(shù)龍;趙繪存;楊英;楊軍;;納米纖維支架對(duì)大鼠間充質(zhì)干細(xì)胞向肝細(xì)胞分化的影響[A];天津市生物醫(yī)學(xué)工程學(xué)會(huì)第29屆學(xué)術(shù)年會(huì)暨首屆生物醫(yī)學(xué)工程前沿科學(xué)研討會(huì)論文集[C];2009年

4 郭勇;張西正;郭春;魏嚴(yán);李瑞欣;徐曉瑩;張永紅;;脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞向心肌細(xì)胞分化中心肌發(fā)育相關(guān)基因的表達(dá)[A];天津市生物醫(yī)學(xué)工程學(xué)會(huì)2008年年會(huì)暨首屆生物醫(yī)學(xué)工程與臨床論壇論文集[C];2008年

5 朱恒;江小霞;劉元林;張毅;毛寧;;間充質(zhì)干細(xì)胞選擇性調(diào)節(jié)破骨細(xì)胞發(fā)育和功能[A];第13屆全國(guó)實(shí)驗(yàn)血液學(xué)會(huì)議論文摘要[C];2011年

6 張顥;陶艷玲;邱林;張伯龍;馬軍;陳志哲;劉擁軍;韓忠朝;;一種具有免疫負(fù)調(diào)節(jié)功能的人臍帶源間充質(zhì)干細(xì)胞[A];第12屆全國(guó)實(shí)驗(yàn)血液學(xué)會(huì)議論文摘要[C];2009年

7 楊少光;池穎;戎麗娟;邢文;盧士紅;趙欽軍;馬鳳霞;韓忠朝;;不同來(lái)源間充質(zhì)干細(xì)胞誘導(dǎo)分化成血管內(nèi)皮細(xì)胞的比較[A];第13屆全國(guó)實(shí)驗(yàn)血液學(xué)會(huì)議論文摘要[C];2011年

8 李杰平;孔佩艷;李佳麗;朱麗丹;孔祥敬;曾東風(fēng);劉紅;王慶余;彭賢貴;陳幸華;張曦;;純化的自體CD34+細(xì)胞聯(lián)合間充質(zhì)干細(xì)胞治療難治性克隆恩病一例并文獻(xiàn)復(fù)習(xí)[A];第13屆全國(guó)實(shí)驗(yàn)血液學(xué)會(huì)議論文摘要[C];2011年

9 羅高興;程文廣;黃正根;賀偉峰;袁順宗;陳希煒;吳軍;;應(yīng)用人臍帶血間充質(zhì)干細(xì)胞修復(fù)小鼠皮膚缺損創(chuàng)面的實(shí)驗(yàn)研究[A];第六屆全國(guó)燒傷救治專題研討會(huì)論文匯編[C];2009年

10 郭振興;鄭翠玲;陳振萍;董文川;楊仁池;;胚胎骨髓來(lái)源的間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)人Th17細(xì)胞免疫調(diào)節(jié)作用的研究[A];第12屆全國(guó)實(shí)驗(yàn)血液學(xué)會(huì)議論文摘要[C];2009年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前10條

1 主治醫(yī)師 代廷榮;警惕口腔黏膜赤斑[N];中國(guó)老年報(bào);2008年

2 王秋月　王琳;空軍總醫(yī)院采用間充質(zhì)干細(xì)胞救治小腦萎縮[N];科技日?qǐng)?bào);2009年

3 董智;口腔黏膜給藥研究迅速發(fā)展[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2009年

4 上海市第九人民醫(yī)院 陳祖亮;重視你的口腔黏膜[N];家庭醫(yī)生報(bào);2005年

5 健康時(shí)報(bào)記者　 王純;口腔黏膜癌“偽裝”潰瘍[N];健康時(shí)報(bào);2006年

6 冀京蕊;不可小視的口腔黏膜疾病[N];衛(wèi)生與生活報(bào);2006年

7 記者 李素鋒;我市首例間充質(zhì)干細(xì)胞移植手術(shù)取得成功[N];臨汾日?qǐng)?bào);2009年

8 安徽合肥市口腔醫(yī)院 陳志方;口腔癌的易感因素[N];健康報(bào);2008年

9 陳燁菲;食用菠蘿要當(dāng)心[N];農(nóng)村醫(yī)藥報(bào)（漢）;2009年

10 王振坤;人體的口腔防線[N];家庭醫(yī)生報(bào);2006年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 彭飛;620nm非相干紅光對(duì)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的光生物調(diào)節(jié)作用[D];華中科技大學(xué);2011年

2 于美嬌;系統(tǒng)歸巢的間充質(zhì)干細(xì)胞在牙周組織修復(fù)再生過(guò)程中的作用研究[D];山東大學(xué);2011年

3 李東杰;人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞促進(jìn)創(chuàng)面愈合及體外誘導(dǎo)分化為表皮樣細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)研究[D];中國(guó)人民解放軍軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院;2011年

4 李寶軍;脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞體外誘導(dǎo)及復(fù)合PLGA體內(nèi)異位成軟骨的實(shí)驗(yàn)研究[D];中南大學(xué);2007年

5 朱雅姝;Flk-1~+間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)腫瘤細(xì)胞增殖的抑制作用及其分子機(jī)制研究[D];中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2008年

6 吳桂珠;脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞治療壓力性尿失禁的實(shí)驗(yàn)研究[D];福建醫(yī)科大學(xué);2010年

7 熊卉;轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1基因體外轉(zhuǎn)染兔顳下頜關(guān)節(jié)滑膜間充質(zhì)干細(xì)胞向纖維軟骨轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)研究[D];武漢大學(xué);2010年

8 苗宗寧;胎盤間充質(zhì)干細(xì)胞與絲素蛋白/羥基磷灰石材料在骨創(chuàng)傷修復(fù)中的實(shí)驗(yàn)研究[D];蘇州大學(xué);2010年

9 梁偉;人骨髓Flk-1~+間充質(zhì)干細(xì)胞抗DNA損傷物質(zhì)影響作用研究[D];中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2008年

10 趙迎澤;BMP9通過(guò)MAPKs通路調(diào)控間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化及其機(jī)制的初步研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2010年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 李成華;口腔黏膜間充質(zhì)干細(xì)胞存在及在口腔扁平苔蘚中變化的初步研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2010年

2 章守琴;人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞支持造血的體外研究[D];昆明醫(yī)學(xué)院;2010年

3 陳芳;臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞修復(fù)化療所致卵巢顆粒細(xì)胞損傷的體外實(shí)驗(yàn)[D];暨南大學(xué);2010年

4 張茜真;人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞的分離、鑒定以及干細(xì)胞特異性轉(zhuǎn)錄因子誘導(dǎo)其重編程的研究[D];浙江理工大學(xué);2010年

5 陳義;臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)及體外重建角膜后板層的初步研究[D];暨南大學(xué);2010年

6 唐子濱;納米級(jí)膠原基骨材料復(fù)合自體脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞用于兔后外側(cè)脊柱融合的實(shí)驗(yàn)研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2010年

7 齊凱;人臍帶來(lái)源間充質(zhì)干細(xì)胞分離培養(yǎng)方法的優(yōu)化初探[D];山西醫(yī)科大學(xué);2011年

8 馬蘭蘭;不同胎齡人臍帶血間充質(zhì)干細(xì)胞的研究[D];中國(guó)醫(yī)科大學(xué);2010年

9 田毅;人臍帶Wharton's jelly間充質(zhì)干細(xì)胞的生物學(xué)特性以及其與腦腫瘤干細(xì)胞共培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)研究[D];鄭州大學(xué);2010年

10 張福麗;間充質(zhì)干細(xì)胞治療肺動(dòng)脈高壓研究進(jìn)展（附肺動(dòng)脈高壓發(fā)病機(jī)制進(jìn)展）[D];山西醫(yī)科大學(xué);2011年

，

本文編號(hào)：2624190