【摘要】： 目的:口腔頜面部的惡性腫瘤在我國以舌癌、牙齦癌、頰癌等較為常見,然而其發(fā)病原因是由多種因素造成的,如環(huán)境因素、精神因素、免疫因素等。其中免疫因素備受眾多學(xué)者的關(guān)注�？谇活M面部惡性腫瘤患者的免疫功能無論在早期或晚期病變均有可能比正常人群有所降低,以晚期病例尤為顯著。因此,機體的免疫狀態(tài)在惡性腫瘤的發(fā)生發(fā)展過程中有一定的參考價值。Fas/FasL是細胞凋亡的一條重要途徑,細胞凋亡失控是腫瘤發(fā)生的一個重要因素,故Fas/FasL引導(dǎo)的細胞凋亡成為近年來醫(yī)學(xué)研究的熱點,Fas及其配體FasL系統(tǒng)的異常表達,不僅參與了腫瘤發(fā)生過程中細胞凋亡異常的調(diào)節(jié),而且與腫瘤免疫逃逸機制有關(guān)。Fas、FasL的表達情況,是機體的免疫系統(tǒng)與腫瘤凋亡系統(tǒng)相互較量的一個重要環(huán)節(jié),本試驗旨在通過流式細胞術(shù)精確的檢測口腔癌患者治療前后外周血中T淋巴細胞各亞型的表達情況,主要是對CD4、Fas及FasL的檢測,探討Fas及FasL在口腔癌患者的發(fā)病機制所起的作用,使口腔癌的發(fā)病機制在免疫學(xué)的角度上得到進一步的深入了解,并為口腔癌的綜合治療提供一定的理論依據(jù)。 方法:各取新鮮靜脈血100μl,分別加入FITC標(biāo)記的CD3單克隆抗體,FITC標(biāo)記的CD4單克隆抗體,PE標(biāo)記的CD8單克隆抗體及PE標(biāo)記的CD56單克隆抗體各10μl,PE標(biāo)記的Fas單克隆抗體10μl、FITC標(biāo)記的CD4單克隆抗體與PE標(biāo)記的Fas單克隆抗體各10μl、PE標(biāo)記的FasL單克隆抗體10μl、FITC標(biāo)記的CD4單克隆抗體與PE標(biāo)記的FasL單克隆抗體各10μl,在室溫下避光孵育1小時,向其內(nèi)加入紅細胞裂解液,裂解紅細胞5分鐘,加入PBS液洗去血紅蛋白,并重新懸浮于1mlPBS中,以流式細胞儀檢測T淋巴細胞各表型占淋巴細胞總量的百分比和T淋巴細胞上Fas+及FasL+T淋巴細胞所占的百分比及CD4+/Fas+和CD4+/FasL+T淋巴細胞所占的比例,并計算CD4+T細胞/CD8+T細胞的比值。 結(jié)果: 1.治療前后口腔癌患者各項免疫指標(biāo)的變化 1.1口腔癌患者術(shù)后外周血中CD3+、CD4+、CD8+、CD56+T淋巴細胞所占比例分別為63.23±4.96%, 42.37±3.96%,24.46±3.86%,14.60±5.17% CD4+/CD8+比值范圍為1.77±0.34,CD3的表達較術(shù)前略有提高,但無統(tǒng)計學(xué)意義(P㧐0.05),與健康對照組相比,明顯降低(P㩳0.05);CD4的表達較術(shù)前明顯提高,但低于正常對照組(P㩳0.05);CD8的表達明顯比術(shù)前低(P㩳0.05),但與正常對照組的差別已無顯著性,CD4/CD8比值與術(shù)前相比明顯回升,但仍未恢復(fù)至正常對照組水平(P㩳0.05),CD56的表達與術(shù)前比較明顯降低(P㩳0.05),與對照組比較無統(tǒng)計學(xué)意義。 1.2口腔癌患者經(jīng)替加氟加奧沙利鉑化療,三周后再次采集患者外周血,檢測其外周血中CD3+、CD4+、CD8+、CD56+T淋巴細胞所占比例分別為63.56±9.68%,37.55±9.13%,25.79±6.74%,18.61±8.23%,CD4+/CD8+比值范圍為1.57±0.43;CD3的表達與化療前無明顯差別(P㧐0.05),CD4的表達較化療前明顯升高(P㩳0.05),CD8的表達較化療前明顯降低(P㩳0.05),CD4/CD8比值較化療前明顯升高(P㩳0.05),CD56的表達較化療前無明顯變化。 2治療前后口腔癌患者外周血中Fas、FasL的變化 2.1口腔癌患者術(shù)后外周血中CD4+/Fas+、Fas+、CD4+/FasL+、FasL+ T淋巴細胞的比例分別為6.30±1.67%、1.98±0.93%、0.70±0.28%、0.99±0.28%。CD4+/Fas+在術(shù)后的表達與術(shù)前對比有明顯降低(P㩳0.05);但Fas+的表達與術(shù)前比較無統(tǒng)計學(xué)意義(P㧐0.05);CD4+/FasL+、FasL+的表達較術(shù)前均有明顯提高(P㩳0.05)。 2.2口腔癌患者經(jīng)替加氟加奧沙利鉑化療,三周后再次采集患者外周血,其外周血中CD4+/Fas+、Fas+、CD4+/FasL+、FasL+ T淋巴細胞的比例分別為8.36±2.12%、2.01±1.19%、0.62±0.19%、0.95±0.23%。CD4+/Fas+、Fas+的表達較化療前明顯升高(P㩳0.05),CD4+/FasL+、FasL+的表達較化療前無明顯變化(P㧐0.05)。 3不同臨床因素與CD4+/Fas+、CD4+/FasL+表達的關(guān)系 3.1口腔癌患者外周血中CD4+/Fas+、CD4+/FasL+的表達明顯高于正常對照組(P㩳0.05),Ⅲ+Ⅳ期患者的表達明顯高于Ⅰ和Ⅱ期的患者(P㩳0.05);淋巴結(jié)出現(xiàn)轉(zhuǎn)移的口腔癌患者CD4+/Fas+的表達明顯高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者(P㩳0.05),但CD4+/FasL+的表達在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者與無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者之間無明顯差異。腫瘤直徑大于3cm組CD4+/Fas+的表達明顯高于腫瘤直徑不超過3cm組的表達(P㩳0.05),而CD4+/FasL+的表達與腫瘤直徑大小無明顯相關(guān)性。 3.2年齡、性別、吸煙因素的不同與口腔癌患者外周血中Fas和FasL的表達無明顯相關(guān)性。 結(jié)論: 1口腔癌患者與健康人比較輔助性T淋巴細胞降低,抑制性T淋巴細胞增多,機體免疫功能存在不同程度的降低,手術(shù)及化療均可以解除部分免疫抑制現(xiàn)象,手術(shù)及化療對于口腔癌患者的治療是有效的。 2口腔癌患者外周血中Fas的表達與腫瘤分期、是否有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移以及腫瘤的大小可能有關(guān),或許可以作為口腔癌診斷的一個免疫學(xué)標(biāo)記物。 3 Fas/FasL系統(tǒng)在機體內(nèi)是一把雙刃劍,免疫淋巴細胞可借助它清除機體的腫瘤細胞,同時,腫瘤細胞亦可以通過高表達FasL,與機體活化的T淋巴細胞結(jié)合使其凋亡,對機體進行反攻,具體發(fā)病機制較復(fù)雜,有待進一步深入研究。
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2010
【分類號】：R739.8

【參考文獻】

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本文編號：2621413