慢性應(yīng)激對Wistar大鼠牙周組織影響的實驗研究

發(fā)布時間：2020-04-02 20:01

【摘要】：牙周病(periodontal disease)是人類最常見的口腔疾病之一,對口腔健康有很大的危害,是導(dǎo)致牙齒缺失的主要原因之一。眾所周知,微生物是牙周病的始動因素,然而,僅有牙周微生物的存在并不一定導(dǎo)致牙周病的發(fā)生,還與機體的防御機制、機體的局部和全身因素有關(guān)。應(yīng)激是牙周病的危險因素之一。應(yīng)激在牙周病的發(fā)生、發(fā)展中的作用已經(jīng)被人們重視。應(yīng)激可以通過影響免疫系統(tǒng)的功能來降低機體的抵抗力進而容易罹患疾病。慢性應(yīng)激可以引起機體長久的情緒化心理狀態(tài),這些情緒的波動會引起一些有害的口腔習(xí)慣,例如吸煙、磨牙癥等都會對牙周組織造成損傷,成為牙周病發(fā)生的促進因素。細胞粘附分子(cellular adhesion molecule ,CAM)是由細胞合成,是細胞與細胞之間以及細胞與基質(zhì)之間粘附的重要物質(zhì)。CAM可以促進白細胞向炎癥部位聚集,而且影響T細胞和B細胞的活化和效應(yīng),在牙周病的炎癥過程中,對免疫細胞的定向移動起了非常重要的作用。細胞粘附分子在牙周病的發(fā)生、發(fā)展過程起到了很關(guān)鍵的作用。細胞間粘附分子-1(intercellular adhesion molecule ,ICAM-1)作為細胞粘附分子中免疫球蛋白超家族中的一種,在牙周血管和牙齦上皮中均有表達。隨著炎癥程度的增加,牙周細胞中表達ICAM-1的量也隨之增加,是判斷牙周病炎癥程度的一項客觀指標。通過測定牙周組織中細胞表達ICAM-1的多少,就可以判定牙周炎癥程度的強弱。目的探討慢性應(yīng)激與牙周病之間的關(guān)系及慢性應(yīng)激在牙周病發(fā)生發(fā)展過程中的作用。方法 1、健康、雄性,鼠齡6w的wistar大鼠20只(山西醫(yī)科大學(xué)實驗動物中心提供),按隨機分組法分成四組,分別是應(yīng)激組(A)、結(jié)扎+應(yīng)激組(B)、結(jié)扎組(C)、對照組(D),每組五只。用0000的尼龍絲線結(jié)扎B、C兩組大鼠下頜左側(cè)切牙牙頸部,用1%的白砂糖水和糖水浸泡過的大鼠飼料喂養(yǎng)。對A、B組大鼠在室溫下的水浴內(nèi)進行游泳應(yīng)激,A組大鼠用自來水和標準大鼠飼料喂養(yǎng)。D組大鼠作為對照組,不做游泳應(yīng)激和絲線結(jié)扎,自來水和標準大鼠飼料喂養(yǎng)。 2、8w后測量每組每只大鼠的體重,然后處死動物,截取包括實驗牙齒及牙周組織的下頜骨制作蘇木素伊紅(Hematoxylin esin,HE)染色和ICAM-1免疫組織化學(xué)(Immunohisto-chemistry,IHC)染色。所得的實驗數(shù)據(jù)采用spss17.0軟件進行處理,用均數(shù)±標準差( x_±s)表示。采用t檢驗比較每兩組大鼠數(shù)據(jù)的統(tǒng)計學(xué)差異。結(jié)果肉眼觀察下,A、D組大鼠下頜左切牙牙齦顏色粉紅,牙齦不腫脹,牙周組織正常。B、C組大鼠牙齦顏色暗紅,牙齦腫脹,邊緣圓鈍,質(zhì)地松軟。HE染色顯微鏡下觀察,B、C組大鼠上皮釘突增生,纖維結(jié)締組織水腫,可見中性粒細胞和炎癥細胞浸潤,A、D組大鼠無上皮釘突,牙周膜排列一致,未見有中性粒細胞及炎癥細胞浸潤。IHC染色結(jié)果顯示,B組和C組大鼠牙周組織中表達ICAM-1細胞百分數(shù)明顯高于A組和D組(p0.05),B組與C組牙周中ICAM-1的細胞表達沒有統(tǒng)計學(xué)上的差別,A組與D組相比同樣沒有統(tǒng)計學(xué)上的差別。A組與B組大鼠的平均體重明顯低于C組和D組大鼠的平均體重(p0.05),A組與B組的體重相比沒有明顯的統(tǒng)計學(xué)差別,C組與D組的體重相比同樣沒有明顯的統(tǒng)計學(xué)差別。結(jié)論牙周微生物是牙周病的始動因子,但是僅有牙周微生物的存在不足以引起牙周病的發(fā)生,也不足以解釋牙周病的復(fù)雜性。在本次實驗中單純的慢性應(yīng)激沒有引起大鼠牙周組織的炎癥反應(yīng),也沒有加重大鼠牙周組織的炎癥。慢性應(yīng)激可能是宿主牙周生態(tài)系平衡的一個破壞因素。在分子水平上慢性應(yīng)激對牙周病的作用機制有待進一步研究。
【圖文】：

應(yīng)激