【摘要】：目的： 代謝性谷氨酸受體第5亞型(mGluR5)是一組新型的G蛋白偶聯(lián)受體,存在于哺乳動物的腦和脊髓中,通過興奮性神經(jīng)中樞參與炎癥和神經(jīng)病理性疼痛的傳遞過程,mGluR5受體的活化會增強(qiáng)疼痛的狀態(tài)。mGluR5受體選擇性拮抗劑(MPEP)有鎮(zhèn)痛作用。牙髓分布著密集的感覺神經(jīng),一旦受到刺激就會傳遞疼痛信號發(fā)生疼痛,這些神經(jīng)來自腦內(nèi)的三叉神經(jīng)。近年來有實驗研究表明在正常牙髓冠髓的成牙本質(zhì)細(xì)胞中分布有mGluR5,但在炎癥牙髓或正常牙髓的其他部位mGluR5的表達(dá)及分布情況尚不明確,本實驗利用免疫組化的方法檢測了正常牙髓各部位和炎癥牙髓冠髓mGluR5的表達(dá)及分布情況；利用圖像分析系統(tǒng),對其表達(dá)強(qiáng)度進(jìn)行了半定量分析,探討了mGluR5在正常牙髓和炎癥牙髓中的作用和意義,為臨床上牙髓炎的靶向治療提供一種新的思路。 方法： 1.收集山東大學(xué)口腔醫(yī)院口腔頜面外科的患者因正畸或其他治療需要而拔除的健康前磨牙或第三磨牙5例,作為牙髓健康組；臨床及病理確診的急性牙髓炎和慢性牙髓炎組各5例,將每個標(biāo)本進(jìn)行連續(xù)組織切片,作HE染色和免疫組化染色,以磷酸鹽緩沖液(phosphatic buffer solution, PBS)代替一抗作陰性對照。 2.對免疫組化的結(jié)果進(jìn)行圖像分析：利用IPP5.0圖像分析系統(tǒng),自切片染色中心區(qū)域上下左右各選擇相同面積有代表性的區(qū)域,檢測平均光密度(mean optical density, MOD),對表達(dá)強(qiáng)度進(jìn)行半定量分析。 3.采用SPSS軟件對實驗結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)處理：mGluR5表達(dá)的光密度值以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(X±S)表示。顯著性檢驗采用單因素方差分析,組間比較采用LSD檢驗。P0.05有統(tǒng)計學(xué)意義。 結(jié)果： 1.肉眼觀察結(jié)果：健康牙髓紅潤有光澤,體積較大,組織柔韌性好,容易從硬組織上剝脫。炎癥牙髓體積較小,脆性大、易斷裂。 2.HE染色結(jié)果：正常牙髓冠髓成牙本質(zhì)細(xì)胞呈高柱狀,在頸部和根中部呈立方狀,而在根尖區(qū)呈扁平狀；慢性牙髓炎成牙本質(zhì)細(xì)胞排列不規(guī)則,細(xì)胞層的連續(xù)性被破壞,牙髓組織中有大量的慢性炎細(xì)胞浸潤,主要為淋巴細(xì)胞和漿細(xì)胞；急性牙髓炎齲損下方成牙本質(zhì)細(xì)胞的連續(xù)性被破壞,牙髓血管擴(kuò)張充血,血管通透性增加,液體滲出,組織水腫,沿血管壁周圍有中性粒細(xì)胞浸潤。 3.免疫組化結(jié)果：正常牙髓冠部、頸部到根部牙髓及炎癥牙髓的冠髓成牙本質(zhì)細(xì)胞中mGluR5的表達(dá)呈現(xiàn)陽性,其分布情況為：正常牙髓由冠部、頸部到根部mGluR5表達(dá)強(qiáng)度依次降低；急性牙髓炎、慢性牙髓炎及正常牙髓的冠髓mGluR5表達(dá)強(qiáng)度依次降低。 4.mGluR5免疫組化結(jié)果的平均光密度檢測：按α=0.05的檢驗水準(zhǔn),正常牙髓冠部、頸部和根部mGluR5平均光密度值有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),LSD法組間兩兩比較P值均小于0.001,表明正常牙髓由冠部、頸部到根部mGluR5表達(dá)量依次降低；急性牙髓炎、慢性牙髓炎和正常牙髓冠髓的mGluR5平均光密度值有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),LSD法組間兩兩比較P值均小于0.001,表明急性牙髓炎、慢性牙髓炎及正常牙髓的冠髓mGluR5表達(dá)量依次降低。 結(jié)論： 1.正常牙髓和炎癥牙髓的成牙本質(zhì)細(xì)胞中存在mG1uR5的表達(dá)。 2.正常牙髓由冠部、頸部到根部mGluR5表達(dá)強(qiáng)度依次降低；急性牙髓炎、慢性牙髓炎及正常牙髓的冠髓mGluR5表達(dá)強(qiáng)度依次降低。 3.提示mGluR5在牙髓疼痛的傳遞過程中具有一定的作用。推斷應(yīng)用mGluR5受體選擇性拮抗劑(如MPEP)可阻斷牙髓疼痛的傳遞,為臨床上牙髓炎的靶向治療提供了一種新的思路。
【圖文】：

正常牙髓冠髓HE染色(xZOO)

正常牙髓冠髓HE染色(x4OO)
【學(xué)位授予單位】：山東大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2011
【分類號】：R780.2

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：2604744