【摘要】：目的牙周炎和牙髓根尖周病的發(fā)病因素和病理過程雖不完全相同,但牙周袋內(nèi)和感染牙髓內(nèi)都存在以厭氧菌為主的混合感染,它們所引起的炎癥和免疫反應(yīng)有許多相似之處,二者的感染和病變可以相互擴(kuò)散和影響,導(dǎo)致牙周牙髓聯(lián)合病變的發(fā)生。關(guān)于牙周炎和牙髓根尖周病作為獨(dú)立的病變形態(tài)的細(xì)菌學(xué)研究,數(shù)量很多,涉及方面亦很廣泛。而介于二者“交叉地帶”的牙周牙髓聯(lián)合病變的細(xì)菌學(xué)研究要相對(duì)的少一些,而且這些研究多以傳統(tǒng)的細(xì)菌培養(yǎng)為基本手段,對(duì)已知細(xì)菌進(jìn)行檢測(cè)和相關(guān)研究,對(duì)于未能人工培養(yǎng)的細(xì)菌和未知菌的關(guān)注很少,而相關(guān)研究表明,口腔中不能被培養(yǎng)出來的微生物種類和數(shù)量遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于能夠培養(yǎng)的微生物,因此我們可以認(rèn)為之前以培養(yǎng)為研究手段的研究結(jié)果,并不能了解牙髓炎和根尖周炎微生物群體的全貌�，F(xiàn)代微生物技術(shù)中的變性梯度凝膠技術(shù)(Denaturing Gradient Gel Electrophoresis, DGGE)可比較直觀的呈現(xiàn)某種環(huán)境中微生物的群落情況與變化,并獲取不可培養(yǎng)細(xì)菌和未知菌的基因組資源,為進(jìn)一步深入了解牙周牙髓聯(lián)合病變的微生物種群全貌提供了新的手段。 本文利用變性梯度凝膠電泳技術(shù)觀察牙周牙髓聯(lián)合病變患牙牙周組織和根管中原始菌群分布狀況及其異同,并通過克隆測(cè)序技術(shù)來試圖探討兩部位可能存在的優(yōu)勢(shì)菌,為該病變的進(jìn)一步研究奠定一定的細(xì)菌學(xué)基礎(chǔ)。方法 1、牙周牙髓聯(lián)合病變菌群結(jié)構(gòu)的研究 從13例牙周牙髓聯(lián)合病變患牙分別采集患牙根尖1/3處牙周細(xì)菌和根管牙髓細(xì)菌,提取細(xì)菌總DNA,以其為模板擴(kuò)增16SrRNA基因可變區(qū),再進(jìn)行變性梯度凝膠電泳,觀察菌種條帶分布情況。用QuantityOne軟件對(duì)DGGE圖譜進(jìn)行相似系數(shù)(Dice Coefficient)計(jì)算和聚類分析。應(yīng)用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 2、牙周牙髓聯(lián)合病變具體菌種的研究 對(duì)DGGE凝膠中有代表性的條帶進(jìn)行切膠回收,隨后克隆測(cè)序,通過BLAST序列比對(duì),了解某些條帶對(duì)應(yīng)的細(xì)菌菌種。結(jié)果 1、13例樣本的DGGE圖譜條帶數(shù)的配對(duì)t檢驗(yàn)結(jié)果顯示牙周、牙髓樣本的菌種條帶數(shù)之間有明顯的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p0.01)。Spearman等級(jí)相關(guān)分析顯示二者之間無正相關(guān)性。同牙的牙周、牙髓菌種條帶相似系數(shù)(Dice Coefficient)為13.1%-62.5%不等。 2、DGGE凝膠條帶回收克隆測(cè)序BLAST("g98%序列相似度)的結(jié)果顯示：牙周牙髓聯(lián)合病變患牙根尖區(qū)1/3處牙周菌種可能有Campylobacter, Fusobacterium, Neisseria, Peptostreptococcus, Veillonella, Aggregatibacter, Enterobacter, Haemophilus等,該處對(duì)應(yīng)根管中菌種可能有Mogibacterium, Corynebacterium, Neisseria, Actinomyces等。約50%測(cè)序序列BLAST結(jié)果序列相似度95%。 結(jié)論 1、牙周牙髓聯(lián)合病變(牙周來源)中牙周組織和鄰近根管牙髓組織中菌種總數(shù)之間沒有正相關(guān)性。二者存在共有菌,但不是所有的牙周細(xì)菌都會(huì)出現(xiàn)在鄰近的根管中；根管中的細(xì)菌也不是完全來自于鄰近的牙周組織,其局部環(huán)境中原著的細(xì)菌可能在該病變過程中發(fā)生再繁殖。 2、牙周牙髓聯(lián)合病變牙周組織和根管中可能存在目前尚未被認(rèn)知的優(yōu)勢(shì)菌種。
【學(xué)位授予單位】：山東大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2012
【分類號(hào)】：R781.4

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前3條

1 王凱;周莉;;對(duì)牙周-牙髓聯(lián)合病變分型的思考[J];華西口腔醫(yī)學(xué)雜志;2008年01期

2 張明珠;徐杰;彭藝;吳劍花;邵聰吉;雷雅燕;;牙周牙髓聯(lián)合病變與常見牙周病原微生物感染的關(guān)系研究[J];上海交通大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2011年04期

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本文編號(hào)：2604761