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糞腸球菌對(duì)大鼠實(shí)驗(yàn)性根尖周炎TRAF-6的表達(dá)影響研究

發(fā)布時(shí)間:2020-03-28 09:55
【摘要】:目的:研究糞腸球菌在大鼠根尖周炎過(guò)程中,對(duì)腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子-6(TRAF-6)的表達(dá)影響。 方法:選取成年雄性SD大鼠39只,以右下頜第一磨牙為研究對(duì)象,將36只鼠隨機(jī)均分成兩個(gè)實(shí)驗(yàn)組,A組將牙合?面開(kāi)髓,髓腔直接暴露于口腔環(huán)境中;B組牙合面開(kāi)髓后,封入糞腸球菌懸液。余下3只鼠不做任何處理,為健康對(duì)照組。A、B兩組再分別分為2W、4W、6W三個(gè)亞組,每組6只。分別在術(shù)后2W、4W、6W時(shí)拍攝X線片和CBCT;在2W、4W、6W三個(gè)時(shí)間點(diǎn),每組取3只鼠,以心內(nèi)灌流固定法處死大鼠,取下頜第一磨牙及其近遠(yuǎn)中的根尖周牙槽骨,制作冰凍切片,進(jìn)行HE染色、免疫組化染色及酶組化染色;同時(shí),取每組另外3只鼠,刮取下頜第一磨牙根尖周組織,提取組織總RNA,進(jìn)行RT-PCR反應(yīng)。對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果利用SPSS統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行t檢驗(yàn)和方差分析。? 結(jié)果: 1.X線片及CBCT結(jié)果 A、B組術(shù)后2W,X線片及CBCT均未見(jiàn)根尖周牙槽骨異常;術(shù)后4W及6W,X線片及CBCT顯示根尖周牙槽骨吸收,根尖周陰影明顯,確認(rèn)成功建立大鼠根尖周炎模型。對(duì)照組未見(jiàn)根尖周陰影。 2. HE染色結(jié)果 A、B組術(shù)后2W時(shí),根管內(nèi)牙髓全部壞死,根尖周區(qū)域可見(jiàn)大量巨噬細(xì)胞和中性粒細(xì)胞浸潤(rùn);術(shù)后4W時(shí),淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)增多,在根尖周的牙槽骨區(qū)域出現(xiàn)Howship陷窩,術(shù)后6W時(shí)淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)更多,且根尖周牙槽骨出現(xiàn)膿腔。對(duì)照組根尖周的牙槽骨區(qū)域未見(jiàn)異常。 3.免疫組化染色結(jié)果 術(shù)后2W、4W、6W,TRAF-6在A組、B組的根尖周牙槽骨區(qū)域的破骨細(xì)胞中均呈陽(yáng)性表達(dá);并且TRAF-6陽(yáng)性表達(dá),分別在A組、B組的2W、4W、6W三個(gè)亞組中,逐漸降低,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。同時(shí),TRAF-6陽(yáng)性表達(dá),在術(shù)后2W、4W、6W三個(gè)時(shí)間點(diǎn),均是B組高于A組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。 4.酶組化染色結(jié)果 A組與B組術(shù)后2W,第一磨牙根尖周區(qū)域的牙槽骨內(nèi)可見(jiàn)大量TRAP染色陽(yáng)性的破骨細(xì)胞;術(shù)后4W,破骨細(xì)胞數(shù)量迅速下降;術(shù)后6W,僅見(jiàn)少量破骨細(xì)胞;對(duì)照組根尖周區(qū)域的牙槽骨僅可見(jiàn)少量的破骨細(xì)胞。A組與B組術(shù)后2W與4W、2W與6W、4W與6W之間破骨細(xì)胞的表達(dá)有明顯差異,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。且B組破骨細(xì)胞數(shù)量大于A組,有明顯差異,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。 5.RT-PCR結(jié)果 A組、B組在術(shù)后2W時(shí),TRAF-6的mRNA表達(dá)都高于4W及6W,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);但4W組與6W組之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05) 結(jié)論: 1.腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子-6(TRAF-6)參與了根尖周炎的整個(gè)過(guò)程,TRAF-6的表達(dá)情況與根尖周炎密切相關(guān)。 2.腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子-6(TRAF-6)與糞腸球菌感染為主的根尖周炎其密切相關(guān);糞腸球菌可能使TRAF-6的表達(dá)高于常規(guī)的由髓腔直接暴露引起的根尖周炎過(guò)程中TRAF-6的表達(dá)。 3.在以糞腸球菌感染為主的根尖周炎過(guò)程中,糞腸球菌可能加快了破骨細(xì)胞的分化,也促進(jìn)了根尖周骨吸收的進(jìn)程。
【圖文】:

下頜第一磨牙,根尖,牙周膜,觀察圖


12圖1 術(shù)后4W X線片觀察圖1顯示大鼠右側(cè)下頜第一磨牙牙周膜明顯增寬,近遠(yuǎn)中根尖區(qū)均出現(xiàn)明顯陰影。圖2 術(shù)后4W CT觀察圖2顯示術(shù)后4W,右側(cè)下頜第一磨牙近遠(yuǎn)中根尖區(qū)可見(jiàn)一類圓形低密度影,大小約1cm×1cm,邊界清晰,所示其他骨質(zhì)未見(jiàn)異常;左側(cè)為正常對(duì)照組,,下頜第一磨牙根尖區(qū)無(wú)陰影出現(xiàn),所示骨質(zhì)未見(jiàn)異常。圖3 髓腔直接暴露組與根管內(nèi)封入糞腸球菌組不同時(shí)間點(diǎn)TRAF-6的表達(dá)變化* P<0.05,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義TRAF-6陽(yáng)性細(xì)胞在各組(2W、4W、6W)之間差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

下頜第一磨牙,根尖,觀察圖,低密度


圖1 術(shù)后4W X線片觀察圖1顯示大鼠右側(cè)下頜第一磨牙牙周膜明顯增寬,近遠(yuǎn)中根尖區(qū)均出現(xiàn)明顯陰影。圖2 術(shù)后4W CT觀察圖2顯示術(shù)后4W,右側(cè)下頜第一磨牙近遠(yuǎn)中根尖區(qū)可見(jiàn)一類圓形低密度影,大小約1cm×1cm,邊界清晰,所示其他骨質(zhì)未見(jiàn)異常;左側(cè)為正常對(duì)照組,下頜第一磨牙根尖區(qū)無(wú)陰影出現(xiàn),所示骨質(zhì)未見(jiàn)異常。圖3 髓腔直接暴露組與根管內(nèi)封入糞腸球菌組不同時(shí)間點(diǎn)TRAF-6的表達(dá)變化* P<0.05,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義TRAF-6陽(yáng)性細(xì)胞在各組(2W、4W、6W)之間差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
【學(xué)位授予單位】:大連醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2011
【分類號(hào)】:R781.34

【參考文獻(xiàn)】

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1 張曄;;破骨細(xì)胞分化過(guò)程中的信號(hào)傳導(dǎo)[J];國(guó)外醫(yī)學(xué)(老年醫(yī)學(xué)分冊(cè));2001年02期

2 徐利東;李衛(wèi)星;李霞;任娟;程玨;;LPS介導(dǎo)的人牙周膜成纖維細(xì)胞損傷過(guò)程中TRAF-6基因的表達(dá)[J];山西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2008年04期

3 張郁,蔭俊,史俊南,肖明振,馬偉光,陳建元,吳軍正;破骨細(xì)胞和成骨細(xì)胞的培養(yǎng)和鑒定[J];牙體牙髓牙周病學(xué)雜志;1992年04期

4 王興強(qiáng),楊富生,葛前進(jìn);雙因子對(duì)體外培養(yǎng)大鼠破骨細(xì)胞的誘導(dǎo)作用[J];牙體牙髓牙周病學(xué)雜志;2003年11期

5 趙守亮;破骨細(xì)胞形成和骨吸收機(jī)理[J];牙體牙髓牙周病學(xué)雜志;1996年01期



本文編號(hào):2604291

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