【摘要】：目的：觀察大蒜素對(duì)照品二烯丙基化三硫(dially trisulfide,DATS)體外對(duì)生物膜中糞腸球菌的殺滅或抑制作用。 方法：1、采用倍比稀釋法測(cè)定DATS和鹽酸多西環(huán)素對(duì)糞腸球菌標(biāo)準(zhǔn)菌株最小抑菌濃度(MIC)和最小殺菌濃度(MBC)。2、采用MTT法測(cè)定不同時(shí)間點(diǎn)的糞腸球菌活性,繪制細(xì)菌生長曲線；在96孔細(xì)胞培養(yǎng)板上培養(yǎng)細(xì)菌,形成不同生長周期的細(xì)菌生物膜,MTT法測(cè)定不同濃度的DATS或鹽酸多西環(huán)素對(duì)不同時(shí)期細(xì)菌生物膜的抑菌率。3、在牙本質(zhì)片上培養(yǎng)細(xì)菌,激光共聚焦顯微鏡(CLSM)觀察細(xì)菌生物膜形成過程中的形態(tài)特點(diǎn)；CLSM觀察不同濃度的DATS或鹽酸多西環(huán)素對(duì)不同生長周期細(xì)菌成熟生物膜的抗菌效果。 結(jié)果：1、實(shí)驗(yàn)組DATS對(duì)糞腸球菌的最小抑菌濃度(MIC)為1280μg/ml,最小殺菌濃度(MBC)為2560μg/ml;鹽酸多西環(huán)素對(duì)糞腸球菌MIC為80μg/ml,MBC為160μg/ml。2、1280μg/ml DATS對(duì)對(duì)數(shù)期和饑餓期生物膜中糞腸球菌抑菌率約71%,顯著高于對(duì)穩(wěn)定期生物膜中糞腸球菌的抑菌率58%,其差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);2560μg/ml DATS和5120μg/ml DATS抗生物膜糞腸球菌效果顯著優(yōu)于1280μg/ml DATS,其差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);5120μg/ml DATS對(duì)饑餓期生物膜糞腸球菌的抑菌率達(dá)97%,顯著高于其他濃度的DATS對(duì)各期生物膜糞腸球菌的抑菌率或該濃度DATS對(duì)其他兩期的抑菌率,結(jié)果均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)；對(duì)照組鹽酸多西環(huán)素的濃度增高時(shí)抑菌率增大,80μg/ml的鹽酸多西環(huán)素抗對(duì)數(shù)期或饑餓期生物膜糞腸球菌的抑菌率與5120μg/ml DATS比較,差異性不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),但該濃度鹽酸多西環(huán)素對(duì)穩(wěn)定期生物膜糞腸球菌的抑菌率優(yōu)于DATS組,差異性具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。3、糞腸球菌生物膜具有立體空間結(jié)構(gòu),生物膜由紅染區(qū)(死細(xì)菌)與綠染區(qū)(活細(xì)菌)組成。對(duì)數(shù)期、穩(wěn)定期、饑餓期生物膜均經(jīng)歷粘附、發(fā)展、成熟三個(gè)階段,從粘附期至成熟期生物膜厚度增加,更結(jié)實(shí)致密；相同階段生物膜,饑餓期較對(duì)數(shù)期、穩(wěn)定期細(xì)菌密度低,結(jié)構(gòu)疏松,表面粗糙。實(shí)驗(yàn)組DATS和對(duì)照組多西環(huán)素均能使糞腸球菌生物膜的激光共聚焦顯微影像紅染面積增加,即能殺滅或抑制生物膜糞腸球菌；且隨濃度增加,紅染面積增大,細(xì)菌生物膜更分散疏松。 結(jié)論：1、DATS對(duì)生物膜中的糞腸球菌具有明顯殺滅或抑制作用。2、DATS能破壞糞腸球菌的生物膜結(jié)構(gòu),殺滅生物膜內(nèi)部的細(xì)菌。3、DATS對(duì)饑餓期糞腸球菌生物膜殺滅作用良好。
【學(xué)位授予單位】：中南大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：R780.2

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2600824