發(fā)布時間：2019-06-13 08:55

【摘要】：正畸治療是通過適量矯治力的作用使牙齒在牙槽骨中向正確的方向和位置移動的過程。正畸力可通過牙周膜組織傳導(dǎo)至牙槽骨，張力側(cè)新骨形成，壓力側(cè)破骨吸收，從而實現(xiàn)骨改建。隨著牙周膜成纖維細胞和成骨細胞表達的ephrinB2被成功檢測，通過EphB4-ephrinB2的作用促進張力側(cè)成骨的觀點被國內(nèi)外學(xué)者提出。利用EphB4-ephrinB2特異性結(jié)合的特點，通過EphB4特異性抑制劑的應(yīng)用可以明確在正畸牙移動過程張力側(cè)成骨所涉及的多種信號通路中EphB4-ephrinB2信號所發(fā)揮的作用。 目的：以人成骨肉瘤MG63細胞株為研究對象，檢測EphB4信號特異性抑制劑NVP-BHG712在體外實驗中對其增殖活性和堿性磷酸酶活性的影響，從而為進一步應(yīng)用該抑制劑探究EphB4-ephrinB2信號對正畸牙移動過程中張力側(cè)成骨的作用打下基礎(chǔ)。通過對眾多已知參與到信號通路中的分子進行調(diào)控或進一步探究信號傳導(dǎo)的分子基礎(chǔ)可以加深對正畸過程中骨改建機制的理解，為改善治療策略或更為精確合理的控制牙齒移動提供理論依據(jù)。 方法：凍存的MG63細胞株復(fù)蘇后培養(yǎng)，以5×103/孔接種于24孔培養(yǎng)板。實驗組設(shè)置NVP-BHG712濃度分別為6.25ng/ml、12.5ng/ml、25ng/ml、37.5ng/ml及62.5ng/ml，另設(shè)不含NVP-BHG712為對照組。利用MTT法檢測加入NVP-BHG712后第1、2、3天各組吸光度值，以探求NVP-BHG712對MG63增殖活性的影響。同時利用堿性磷酸酶活性檢測結(jié)合BCA法蛋白檢測計算各組堿性磷酸酶活性值，以探求NVP-BHG712對MG63堿性磷酸酶活性的影響。采用配對t檢驗方法，，P0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。 結(jié)果：MTT結(jié)果顯示，隨著時間的推移，各組細胞數(shù)均逐漸增加。3天組當NVP-BHG712濃度為6.25ng/ml時所測OD值高于對照組（P0.05），其余各實驗組與對照組相比均無差異。結(jié)合堿性磷酸酶活性檢測和BCA法蛋白濃度檢測，通過計算，結(jié)果顯示，在第1、3、5、7天各濃度實驗組與對照組相比均無統(tǒng)計學(xué)差異（P0.05）。 結(jié)論： 1.濃度為6.25ng/ml的NVP-BHG712對MG63的增殖有促進作用，濃度為12.5ng/ml、25ng/ml、37.5ng/ml及62.5ng/ml時對MG63的增殖活性沒有影響。 2.濃度為6.25ng/ml、12.5ng/ml、25ng/ml、37.5ng/ml及62.5ng/ml的NVP-BHG712對MG63的ALP活性沒有影響。
[Abstract]:Orthodontic treatment is a process of moving the teeth in the correct direction and position in the alveolar bone by a proper amount of corrective force. The orthodontic force can be transmitted to the alveolar bone, the tension side new bone formation and the pressure side bone-breaking absorption through the periodontal ligament tissue, so that the bone reconstruction can be realized. With the successful detection of the ephrin B2 of the expression of the periodontal ligament fibroblasts and the osteoblast, the viewpoint of promoting the side-to-bone of the tension side by the action of EphB4-ephrin B2 is proposed by the domestic and foreign scholars. The application of EphB4-ephrin to the specific binding of EphB4-ephrin B2 can be used to identify the effect of EphB4-ephrin B2 signal in the various signal paths involved in the tension side of the orthodontic tooth. Objective: To study the proliferation activity and the activity of alkaline phosphatase in human osteosarcoma MG63 cell line. In order to further study the effect of EphB4-ephrin B2 (EphB4-ephrin B2) signal on the tension side-forming of the orthodontic tooth in the process of orthodontic tooth movement, The understanding of the mechanism of bone remodeling in the orthodontic process can be enhanced by regulating or further exploring the molecular basis of a plurality of molecules known to be involved in the signal pathway, providing a theoretical basis for improving the treatment strategy or more precisely and reasonably controlling the movement of the teeth. Methods: The cryopreserved MG63 cell line was recovered and cultured in 5%103/ well for 24 wells. The concentration of NVP-BHG712 in the experimental group was 6.25 ng/ ml, 12.5 ng/ ml,25 ng/ ml, 37.5 ng/ ml and 62.5 ng/ ml, respectively. The absorbance values of group 1,2 and 3 after NVP-BHG712 were detected by MTT method to explore the proliferative activity of NVP-BHG712 on MG63. The activity of alkaline phosphatase in each group was calculated by using alkaline phosphatase activity test and BCA method to explore the activity of NVP-BHG712 on the alkaline phosphatase activity of MG63. The effect of the paired t-test method is that the difference between P0.05 is the difference. Results: The results showed that the number of cells in each group increased gradually over time. The OD value of the three-day group was higher than that of the control group when the concentration of NVP-BHG712 was 6.25 ng/ ml (P0.05). The results showed that there was no statistical difference between the experimental group and the control group at 1,3,5 and 7 days with the detection of the activity of alkaline phosphatase and the detection of the concentration of the BCA protein. 0.0 5). Conclusion:1. The concentration of NVP-BHG712 with a concentration of 6.25 ng/ ml can promote the proliferation of MG63. The concentration is 12.5 ng/ ml,25 ng/ ml, 37.5 ng/ ml and 62.5 ng/ ml. No effect on proliferation activity.2. NVP-BHG712 vs. MG6 with a concentration of 6.25 ng/ ml, 12.5 ng/ ml,25 ng/ ml, 37.5 ng/ ml and 62.5 ng/ ml
【學(xué)位授予單位】：吉林大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R783.5

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本文編號：2498411