【摘要】：目的多種長鏈非編碼RNA可影響人牙周膜細(xì)胞的生理反應(yīng),而尼古丁作為吸煙相關(guān)性牙周炎的主要危險因素,可引起人牙周膜細(xì)胞內(nèi)多種細(xì)胞因子的變化。文中旨在探究尼古丁對人牙周膜細(xì)胞(h PDLCs)核內(nèi)長鏈非編碼RNA NEAT1表達(dá)水平和白細(xì)胞介素(IL)-8表達(dá)水平的影響。方法體外培養(yǎng)h PDLCs,第4代細(xì)胞用于后續(xù)實驗。將細(xì)胞隨機(jī)分為對照組、α-BTX組和尼古丁+α-BTX組。對照組:不加任何刺激的人牙周膜細(xì)胞;尼古丁組:10-5mol/L尼古丁刺激細(xì)胞4 h;α-BTX組:10-8mol/Lα-BTX刺激細(xì)胞;尼古丁+α-BTX組:10-5mol/L尼古丁+10-8mol/Lα-BTX共同刺激。qRT-PCR檢測細(xì)胞NEAT1及下游IL-8 mRNA表達(dá)水平;ELISA檢測培養(yǎng)基中IL-8蛋白表達(dá)情況。結(jié)果牙周膜組織塊原代培養(yǎng)3周后可見組織塊周圍細(xì)胞成放射狀排列,穩(wěn)定傳代后鏡下觀察可見h PDLCs呈長梭形或紡錘形,輪廓清晰,貼壁生長。與尼古丁組比較,其余3組h PDLCs NEAT1-1、NEAT1-2和IL-8 mRNA表達(dá)均降低(P0.05)。尼古丁組培養(yǎng)上清中IL-8蛋白表達(dá)水平較對照組顯著升高,約為對照組的4.8倍[(1226.0±163.0)pg/m L vs(256.4±49.3)pg/m L,P0.05],而α-BTX組和尼古丁+α-BTX組的IL-8蛋白表達(dá)水平較對照組差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論尼古丁可促進(jìn)h PDLCs NEAT1和IL-8的表達(dá),提示NEAT1可能通過促進(jìn)早期炎性反應(yīng)參與吸煙相關(guān)性牙周炎的發(fā)生發(fā)展。
[Abstract]:Objective multiple long chain noncoding RNA can affect the physiological response of human periodontal ligament cells. Nicotine, as the main risk factor of smoking associated periodontitis, can cause the change of many cytokines in human periodontal ligament cells. The aim of this study was to investigate the effects of nicotine on the expression of long chain non-coding RNA NEAT1 and interleukin (IL) 8 in (h PDLCs) nucleus of human periodontal ligament cells. Methods the 4 th passage of h PDLCs, cells were cultured in vitro for further experiment. The cells were randomly divided into control group, 偽-BTX group and nicotine-偽-BTX group. Control group: human periodontal ligament cells without any stimulation; nicotine group: 10-5mol/L nicotine stimulated cells for 4 h; 偽-BTX group: 10-8mol/L 偽-BTX stimulated cells; Nicotine 偽-BTX group: 10-5mol/L nicotine 10-8mol/L 偽-BTX was co-stimulated. QRT-PCR was used to detect the expression of NEAT1 and IL-8 mRNA downstream, and ELISA was used to detect the expression of IL-8 protein in culture medium. Results after 3 weeks of primary culture of periodontal ligament tissue mass, the cells around the tissue mass could be seen to be radially arranged. After stable passage, it was observed that h PDLCs was fusiform or spindle-shaped, with clear outline and adherent growth. Compared with nicotine group, the expression of h PDLCs NEAT1-1,NEAT1-2 and IL-8 mRNA in the other three groups were decreased (P0.05). The expression of IL-8 protein in the culture supernatant of nicotine group was significantly higher than that in the control group, which was 4.8-fold of that in the control group [(1226.0 鹵163.0) pg/m L vs (256.4 鹵49.3 pg/m L (P0.05)]. The expression of IL-8 protein in 偽-BTX group and nicotine 偽-BTX group was not significantly higher than that in control group (P0.05). Conclusion nicotine can promote the expression of h PDLCs NEAT1 and IL-8, suggesting that NEAT1 may be involved in the occurrence and development of smoking-related periodontitis by promoting early inflammatory response.
【作者單位】： 軍事口腔醫(yī)學(xué)國家重點實驗室國家口腔疾病臨床醫(yī)學(xué)研究中心 陜西省口腔疾病臨床醫(yī)學(xué)研究中心 第四軍醫(yī)大學(xué)口腔醫(yī)院兒童口腔科;第四軍醫(yī)大學(xué)微生物學(xué)教研室;
【基金】：國家自然科學(xué)基金(81170964,81470743,81670988)
【分類號】：R781.4

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本文編號：2322209