【摘要】：目的： 根面齲是危害老年人口腔健康的常見慢性細(xì)菌感染性疾病,隨著我國老年人人口數(shù)量的逐年上升,根面齲的發(fā)病率也呈明顯上升趨勢(shì)。根面齲發(fā)展速度快,能在較短時(shí)間內(nèi)發(fā)展成牙髓炎或根尖周炎,也是造成老年人牙折、牙齒喪失的重要原因,嚴(yán)重影響了老年人的日常生活。如何有效防治老年人根面齲已經(jīng)成為一個(gè)社會(huì)性問題。附著在牙根面的菌斑生物膜是根面齲發(fā)生的根本原因,預(yù)防的關(guān)鍵在于清除這部分菌斑生物膜。 光動(dòng)力療法(photodynamic therapy, PDT)是利用特定波長的光激活光敏劑產(chǎn)生光化學(xué)效應(yīng),從而殺傷病原微生物或病變組織的一種新療法。近年來,光動(dòng)力療法在治療感染性疾病方面的作用越來越受到重視,它可選擇性殺傷病原微生物而不傷及周圍正常組織。本研究首先利用波長532nm的半導(dǎo)體激光器和光敏劑血卟啉單甲醚(hematoporphyrin monomethylether, HMME)對(duì)三種主要根面齲致病菌粘性放線菌、變形鏈球菌、乳酸桿菌混懸液進(jìn)行光動(dòng)力作用,篩選出光動(dòng)力療法的最佳效應(yīng)參數(shù),然后在體外建立早期根面齲模型,通過觀察光動(dòng)力療法對(duì)菌斑生物膜的殺傷、鈣離子溶出量及根面齲表面形態(tài)影響,探討其對(duì)早期根面齲的抑制作用,為臨床應(yīng)用光動(dòng)力療法抑制早期根面齲提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 方法： 1.粘性放線菌(A.viscosus ATCC19246)、變形鏈球菌(S.mutans UA159).乳酸桿菌(L.acidophilus ATCC4356)復(fù)蘇厭氧培養(yǎng)48h,調(diào)整濃度制備成1×108CFU/mL的混合菌懸液。 2.波長532nm、功率密度0.14W/cm2半導(dǎo)體激光器分別照射30s、60s、90s與不同濃度光敏劑血卟啉單甲醚(hematoporphyrin monomethylether, HMME)20μg/ml、40μg/ml、60μg/ml進(jìn)行組合,對(duì)混合菌懸液進(jìn)行作用,選擇出光動(dòng)力療法的最佳效應(yīng)參數(shù)。 3.收集因正畸拔除的前磨牙25顆及全唾液,利用以上三種致齲菌體外構(gòu)建早期根面齲模型。用光動(dòng)力療法最佳效應(yīng)參數(shù)進(jìn)行作用,菌落計(jì)數(shù),評(píng)價(jià)光動(dòng)力療法對(duì)早期根面齲表面菌斑生物膜的殺傷作用。 4.原子吸收分光光度計(jì)測(cè)定光動(dòng)力療法作用后早期根面齲的鈣離子溶出量,評(píng)價(jià)光動(dòng)力療法對(duì)早期根面齲的抑制作用。 5.掃描電子顯微鏡觀察光動(dòng)力療法對(duì)根面牙骨質(zhì)表面形態(tài)影響。結(jié)果： 1.在本實(shí)驗(yàn)條件下,光動(dòng)力療法的最佳效應(yīng)參數(shù)為：光敏劑HMME濃度40μg/ml；波長532nm、功率密度0.14W/cm2半導(dǎo)體激光器連續(xù)照射時(shí)間為60s。 2.光動(dòng)力療法對(duì)早期根面齲表面菌斑生物膜的殺傷實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,與生理鹽水陰性對(duì)照組相比：?jiǎn)渭児饷魟┙M根面致齲菌數(shù)量無顯著性差異(P0.05),殺菌率僅為1.23%；激光照射組和洗必泰組均能使根面致齲菌數(shù)量減少(P0.05),殺菌率分別為56.96%和60.62%,但二者之間無顯著性差異(P0.05)；PDT組可使根面致齲菌數(shù)量顯著減少(P0.05),殺菌率高達(dá)98.70%。 3.原子吸收分光光度計(jì)測(cè)定鈣離子溶出量結(jié)果顯示,在48小時(shí)內(nèi),各組鈣離子溶出量(ug/mL)隨時(shí)間的延長而增加。與生理鹽水陰性對(duì)照組相比：?jiǎn)渭児饷魟┙M各時(shí)間點(diǎn)的鈣離子溶出量無顯著差異(P0.05)；單純激光照射組與洗必泰陽性對(duì)照組均能使鈣離子溶出量減少(P0.05),但二者之間無顯著性差異(P0.05)；PDT組各時(shí)間點(diǎn)的鈣離子溶出量均顯著減少(P0.05)。PDT組與單純激光照射組相比各時(shí)間點(diǎn)的鈣離子溶出量仍顯著減少(P0.05)。 4.掃描電子顯微鏡圖像顯示,光動(dòng)力療法組牙骨質(zhì)表面結(jié)構(gòu)完整,無細(xì)菌粘附,裂隙及陷窩減少,并有裂隙愈合痕跡,周圍見微小鈣化物沉積。進(jìn)而表明,光動(dòng)力療法對(duì)早期根面齲菌斑生物膜中致病菌有很好的殺菌效果,不但阻止了根面牙骨質(zhì)繼續(xù)脫礦,而且促進(jìn)了根面牙骨質(zhì)的再礦化。 結(jié)論： 1.在光敏劑HMME濃度40μg/ml；波長532nm、功率密度0.14W/cm2半導(dǎo)體激光器連續(xù)照射60s參數(shù)下,光動(dòng)力療法對(duì)體外游離的根面齲致病菌有很好的殺滅作用。 2.光動(dòng)力療法可有效殺滅牙根表面菌斑生物膜中的致齲菌,可減少早期根面齲的鈣離子溶出量,不但阻止了根面牙骨質(zhì)繼續(xù)脫礦,而且促進(jìn)了根面牙骨質(zhì)的再礦化。光動(dòng)力療法可有效抑制早期根面齲,在根面齲的預(yù)防中具有廣泛的臨床應(yīng)用前景。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：天津醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號(hào)】：R781.1

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2300219