【摘要】：實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?探討寡核苷酸MT01(一種根據(jù)人線粒體DNA序列設(shè)計(jì)的寡脫氧核苷酸)進(jìn)入人牙周膜細(xì)胞的機(jī)制，為寡核苷酸MT01能夠抑制牙槽骨吸收奠定實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。 實(shí)驗(yàn)方法： 體外培養(yǎng)并鑒定人牙周膜細(xì)胞，Cy5染色的MT01（工作濃度為1.0μg/ml）與人牙周膜細(xì)胞共培養(yǎng)15分鐘，30分鐘，1小時(shí)，3小時(shí)，6小時(shí)，12小時(shí)，24小時(shí)，36小時(shí)及48小時(shí)。激光共聚焦顯微鏡觀察記錄以上9個(gè)時(shí)間點(diǎn)MT01進(jìn)入人牙周膜細(xì)胞的情況，對(duì)不同時(shí)間點(diǎn)人牙周膜細(xì)胞內(nèi)MT01的熒光強(qiáng)度進(jìn)行比對(duì)分析。采用SPSS17.0軟件，配對(duì)樣本t檢驗(yàn)方法統(tǒng)計(jì)學(xué)分析兩組間結(jié)果，P＜0.05有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，P＜0.01有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果： 1.0μg/ml MT01進(jìn)入人牙周膜細(xì)胞15分鐘，30分鐘，，1小時(shí)，3小時(shí)，6小時(shí)，12小時(shí)，24小時(shí)，36小時(shí)及48小時(shí)熒光強(qiáng)度分別為：1484±128，1771±206，2773±1364，1874±121，2437±293，3170±297，2442±273，2285±45，2119±374。其中12小時(shí)實(shí)驗(yàn)組熒光強(qiáng)度與15分鐘、30分鐘、6小時(shí)，48小時(shí)實(shí)驗(yàn)組熒光強(qiáng)度相比較均有顯著差異（P＜0.01）。其余組間比較均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。 實(shí)驗(yàn)結(jié)論： 1.寡核苷酸MT01無(wú)需載體,通過胞吞作用快速進(jìn)入人牙周膜細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)，并且一定濃度的寡核苷酸MT01進(jìn)入人牙周膜細(xì)胞呈時(shí)間依賴性：12小時(shí)達(dá)到峰值。 2.寡核苷酸MT01分布在人牙周膜細(xì)胞內(nèi)兩端，具有細(xì)胞極性。
[Abstract]:Objective: to investigate the mechanism of oligonucleotide MT01 (oligodeoxynucleotides) which is designed according to the sequence of human mitochondrial DNA (DNA) into human periodontal ligament cells, and to provide the experimental basis for the inhibition of alveolar bone resorption by oligonucleotide MT01. Methods: human periodontal ligament cells were cultured and identified in vitro. MT01 stained by Cy5 (working concentration was 1.0 渭 g/ml) was co-cultured with human periodontal ligament cells for 15 minutes, 30 minutes, 1 hour, 3 hours, 6 hours, 12 hours, 24 hours, 36 hours and 48 hours. Laser confocal microscopy observed the entry of MT01 into human periodontal ligament cells at the above nine time points and compared the fluorescence intensity of MT01 in human periodontal ligament cells at different time points. Using SPSS17.0 software and paired sample t-test method, the results of two groups were statistically different (P < 0. 05, P < 0. 01, P < 0. 01). The results showed that the fluorescence intensity of 1.0 渭 g/ml MT01 in human periodontal ligament cells for 15 minutes, 30 minutes, 1 hour, 3 hours, 6 hours, 12 hours, 24 hours, 36 hours and 48 hours was 1484 鹵128,1771 鹵2662773 鹵1364U, 2437 鹵2931737 鹵2972442 鹵2732442 鹵273282285 鹵451a 2119 鹵3744h, respectively. The fluorescence intensity of the experimental group at 12 hours was significantly different from that of the experimental group at 15 minutes, 30 minutes, 6 hours and 48 hours (P < 0.01). There was no statistical difference between the other groups. Experimental conclusions: 1. Oligonucleotide MT01 was rapidly entered into the cytoplasm of human periodontal ligament cells by endocytosis without carrier, and a certain concentration of oligonucleotide MT01 entered into human periodontal ligament cells in a time-dependent manner: the peak value was reached at 12 hours. Oligonucleotide MT01 is distributed at both ends of human periodontal ligament cells and has cell polarity.
【學(xué)位授予單位】：吉林大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號(hào)】：R781.4

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2279108