【摘要】：牙種植體早期的研究多重在種植體-骨結(jié)合界面，很少有研究將重點(diǎn)放在種植體-軟組織結(jié)合界面上。盡管牙種植體當(dāng)今有著較高成功率，但仍然有種植體失敗的報(bào)道。臨床數(shù)據(jù)表明，由于穿齦部位的愈合不良等問題，17%的修復(fù)重建病人會而出現(xiàn)感染。牙種植體-軟組織結(jié)合的穿齦部位的愈合不良是導(dǎo)致種植體周圍炎的重要因素，因此，牙種植體材料表面結(jié)構(gòu)的處理很重要。 有文獻(xiàn)報(bào)道，不同的牙種植體表面對于牙齦軟組織和細(xì)菌的反應(yīng)情況也有所不同。鈦表面微弧氧化處理骨結(jié)合良好，但是穿齦部位的反應(yīng)情況卻很少報(bào)道。 本課題旨在對微弧氧化純鈦種植體表面穿齦部位進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究，著重于觀察微弧氧化純鈦種植體表面結(jié)構(gòu)對于人牙齦上皮上皮細(xì)胞和常見致病菌變形鏈球菌的生物學(xué)行為的影響，希望能為微弧氧化處理的純鈦種植體臨床應(yīng)用提供更多的研究依據(jù)。 實(shí)驗(yàn)方法和結(jié)果 首先，采用商業(yè)純鈦制備出具有特征性微孔樣結(jié)構(gòu)的純鈦種植體實(shí)驗(yàn)試件，并通過對正畸導(dǎo)萌術(shù)中切取的正常人牙齦上皮細(xì)胞進(jìn)行了原代培養(yǎng)，獲得了較高純度的足量人牙齦上皮細(xì)胞（hGEC）。在此基礎(chǔ)上，將試件分為微弧氧化組（MAO）和純鈦拋光組（P），，進(jìn)一步觀察人牙齦上皮細(xì)胞在微弧氧化處理的純鈦材料表面的黏附、增殖、表皮生長因子表達(dá)及相關(guān)基因表達(dá)水平的差別，來評價(jià)微弧氧化表面處理技術(shù)對于純鈦種植體和牙齦軟組織界面的影響，并進(jìn)一步對變形鏈球菌在材料表面的黏附與增殖情況作了初步研究。 結(jié)果發(fā)現(xiàn)： 1、掃描電鏡下通過對細(xì)胞形態(tài)的觀察表明人牙齦上皮細(xì)胞在兩組試樣表面的細(xì)胞黏附情況都比較好，兩組間在相同視野內(nèi)的黏附細(xì)胞數(shù)量上也未見明顯差別。 2、MTT法檢測的人牙齦上皮細(xì)胞在不同處理的純鈦表面黏附情況表明，微弧氧化處理純鈦表面（MAO）在接種細(xì)胞0.5小時(shí)、1小時(shí)、2小時(shí)等時(shí)間點(diǎn)其表面人牙齦上皮細(xì)胞數(shù)量略高于拋光處理純鈦表面（P），但均沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P0.05）。 3、MTT法檢測人牙齦上皮細(xì)胞在不同處理純鈦表面的增殖情況表明，微弧氧化處理純鈦表面（MAO組）在接種細(xì)胞后的第1天和第2天，其細(xì)胞增殖迅速，且細(xì)胞數(shù)量明顯高于（P 0.05）拋光處理純鈦表面（P組），但第5天開始，兩組試件表面細(xì)胞增殖速度都有所放緩，且兩組表面細(xì)胞數(shù)量之間沒有顯著差異（P0.05）。 4、通過酶聯(lián)免疫吸附分析法檢測微弧氧化處理純鈦和拋光純鈦對人牙齦上皮細(xì)胞分泌表皮生長因子影響情況的檢查結(jié)果，所得數(shù)據(jù)顯示兩組試件表面接種人牙齦上皮細(xì)胞并培養(yǎng)7天后，所得產(chǎn)物中表皮生長因子的表達(dá)量之間沒有明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P0.05）。 5、凝膠電泳圖和半定量分析結(jié)果可見，兩組試件人牙齦上皮細(xì)胞培養(yǎng)后第一天均有Itgβ1、E-cad和PCNA的表達(dá)；Itgβ1和PCNA在第1、3、5天的同一時(shí)間點(diǎn)內(nèi)不同表面處理組間的表達(dá)水平?jīng)]有明顯差別（p0.05）；E-cad在第1天微弧氧化處理表面表達(dá)水平高于拋光組（p 0.05），但第3、5天的表達(dá)水平在兩種處理表面無顯著差異（p0.05）；EGF在第1天兩組試件表面的表達(dá)水平極低，隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長，在第3天和第5天其表達(dá)水平明顯升高，但在不同表面處理的兩組間沒有顯著差異（p0.05）。 6、對接種于不同處理純鈦表面變形鏈球菌的觀察顯示：i.在拋光處理的純鈦表面變形鏈球菌的黏附增殖的數(shù)量較少，多沿拋光表面紋理痕跡成小團(tuán)簇狀散在分布，隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長，試件表面變形鏈球菌的數(shù)量也逐漸增多。ii.在微弧氧化處理的純鈦表面，變形鏈球菌多以微弧氧化處理形成的表面空隙為中心向周圍鋪散分布中，其黏附與增殖的數(shù)量較多，且隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長，表面細(xì)菌的數(shù)量也逐漸增多。iii.拋光處理純鈦組，其表面變形鏈球菌數(shù)量在培養(yǎng)4小時(shí)組和培養(yǎng)24小時(shí)組之間存在顯著差異（p 0.05），但在培養(yǎng)4小時(shí)組和培養(yǎng)8小時(shí)組之間、培養(yǎng)8小時(shí)組和培養(yǎng)24小時(shí)組之間的變形鏈球菌數(shù)量均沒有明顯差別（p0.05）。iv.微弧氧化處理組，其表面變形鏈球菌的數(shù)量在培養(yǎng)4小時(shí)組和培養(yǎng)8小時(shí)組之間，培養(yǎng)4小時(shí)組和培養(yǎng)24小時(shí)組之間差異明顯，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p 0.05），培養(yǎng)8小時(shí)組和培養(yǎng)24小時(shí)組之間無明顯差異（p0.05）。v.組間比較數(shù)據(jù)結(jié)果顯示，4h，8h，24h三個(gè)時(shí)間點(diǎn)微弧氧化處理純鈦表面的細(xì)菌計(jì)數(shù)結(jié)果均明顯高于拋光處理組（p 0.05）。 結(jié)論： 1、MTT法檢測在最初2小時(shí)內(nèi)，兩種處理表面細(xì)胞黏附數(shù)目相當(dāng)，說明在最早期黏附階段，微弧氧化處理未顯現(xiàn)出對于人牙齦上皮細(xì)胞的黏附促進(jìn)作用。 2、MTT法檢測的1天、3天、5天、7天細(xì)胞增殖情況及E-cad、EGF基因在細(xì)胞培養(yǎng)第1天和第3天的表達(dá)水平差異表明，微弧氧化處理對人牙齦上皮細(xì)胞較早期的黏附與增殖有一定的積極影響。 3、微弧氧化處理的表面由于具有較高的粗糙度和表面能，更有利于變形鏈球菌的初期黏附。 4、綜合上述結(jié)果，我們認(rèn)為微弧氧化處理對于人牙齦上皮細(xì)胞黏附與增殖的促進(jìn)作用不強(qiáng)，但具有很強(qiáng)的細(xì)菌吸附能力，故而不適于作為種植體穿齦部和基臺部的表面處理技術(shù)。
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【學(xué)位授予單位】：第四軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R783.6

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前2條

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本文編號：2256099