本文選題：BMP- + 地塞米松��； 參考：《中國修復(fù)重建外科雜志》2017年06期

【摘要】：目的通過將BMP-2和地塞米松分別及聯(lián)合作用于體外培養(yǎng)的人牙髓細(xì)胞,探討兩者對牙髓細(xì)胞增殖和分化能力的影響。方法取25歲以下患者因正畸原因拔出的無病變牙牙髓組織,采用組織塊法體外培養(yǎng)人牙髓細(xì)胞并傳至第3代,行波形蛋白和角蛋白免疫細(xì)胞化學(xué)染色鑒定。取生長狀況良好的第3~5代牙髓細(xì)胞分為4組,A、B、C組分別加入100 ng/m L BMP-2、1×10 8 mol/L地塞米松、100 ng/m L BMP-2以及1×10 8 mol/L地塞米松,D組不添加誘導(dǎo)劑作為對照組。培養(yǎng)1、3、5、7 d繪制細(xì)胞生長曲線;培養(yǎng)5、7 d行RT-PCR檢測成牙本質(zhì)細(xì)胞形成標(biāo)記基因表達(dá)情況,包括牙本質(zhì)涎磷蛋白(dentin sialophoshoprotein,DSPP)、牙本質(zhì)基質(zhì)蛋白1(dentin matrix protein 1,DMP-1)、ALP;培養(yǎng)14 d行ALP染色并計算陽性染色面積占總面積比值;培養(yǎng)21 d行茜素紅染色并測定562 nm波長處吸光度(A)值。結(jié)果成功分離培養(yǎng)呈長梭形的人牙髓細(xì)胞,經(jīng)波形蛋白和角蛋白免疫細(xì)胞化學(xué)染色鑒定顯示符合牙髓細(xì)胞的生物學(xué)特征。隨培養(yǎng)時間延長,各組細(xì)胞均逐漸增加,5 d時達(dá)峰值,7 d時降至3 d水平。培養(yǎng)5 d,A、B、C組細(xì)胞顯著多于D組,C組多于A組,A組多于B組,比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。RT-PCR檢測示,培養(yǎng)5 d,A、B、C組ALP、DSPP、DMP-1 m RNA相對表達(dá)量均顯著高于D組,C組顯著高于A、B組,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);A、B組間比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。培養(yǎng)7 d,除A、B、C組DSPP m RNA相對表達(dá)量顯著高于D組(P0.05)外,其余各組間各基因相對表達(dá)量比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。培養(yǎng)14 d ALP染色示,各組可見紫黑色沉淀,其中C組著色程度最深;經(jīng)半定量測定,C組陽性染色面積占總面積比值顯著高于A、B、D組,A、B組高于D組,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);A、B組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。培養(yǎng)21 d茜素紅染色示,C組礦化結(jié)節(jié)呈片狀大面積分布,A、B組呈散在分布,D組無礦化結(jié)節(jié)形成;各組間A值比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論 BMP-2對牙髓細(xì)胞的增殖作用比地塞米松更明顯,兩者對牙髓細(xì)胞分化作用差異不明顯;但與單獨應(yīng)用相比,兩者聯(lián)合應(yīng)用對牙髓細(xì)胞的增殖和分化有明顯促進(jìn)作用。
[Abstract]:Objective to investigate the effects of BMP-2 and dexamethasone on the proliferation and differentiation of human dental pulp cells in vitro. Methods Human dental pulp cells were cultured in vitro by tissue mass method and passed to the third passage, and identified by vimentin and keratin immunocytochemistry. The third generation of dental pulp cells in good growth condition were divided into 4 groups: group C was treated with 100 ng/m L BMP-2O 1 脳 10 8 mol/L dexamethasone 100 ng/m L BMP-2 and group D with 1 脳 10 8 mol/L dexamethasone as control group. The cell growth curve was drawn on the 7th day of culture and the expression of odontoblast marker gene was detected by RT-PCR on the 5th day of culture. It included dentin sialophosho protein DSPP, dentin matrix protein 1(dentin matrix protein 1, DMP-1 and ALP, ALP staining for 14 days and the ratio of positive staining area to total area, and alizarin red staining for 21 days and absorbance at 562 nm. Results Human dental pulp cells were isolated and cultured successfully and identified by vimentin and keratin immunocytochemical staining. The results showed that these cells accord with the biological characteristics of dental pulp cells. With the increase of culture time, the cells of each group increased gradually and reached the peak value at 5 d and decreased to 3 d level at 7 d. After 5 days of culture, the number of cells in group C was significantly more than that in group C and group A was more than that in group A and group B, and the difference was statistically significant (P 0.05). RT-PCR analysis showed that the relative expression of RNA RNA of ALP DSPPmDMP-1 in group C was significantly higher than that in group C (group D) and that in group A (group A) was significantly higher than that in group A (P < 0.05), and the expression of DMP-1 RNA in group B was significantly higher than that in group C (P < 0.05). All the differences were statistically significant. There was no significant difference between group A and group B (P 0.05). After 7 days of culture, the relative expression of DSPP m RNA was significantly higher in group A than that in group D (P 0.05). On the 14th day of culture, ALP staining showed that there was purple black precipitate in each group, among which group C was the most stained, and the ratio of positive staining area to total area in group C was significantly higher than that in group A and B was significantly higher than that in group D by semi-quantitative measurement, and that in group C was higher than that in group D. All the differences were statistically significant. There was no significant difference between group A and group B (P 0.05, P 0.05, P 0. 05, P 0. 05, P 0. 05, P 0. 05). 21 days after culture, alizarin red staining showed that the mineralized nodules in group C were in the form of flaky large areas, and that in group A, there were no mineralized nodules in group D, and there were significant differences in A values among the groups (P 0.05). Conclusion the effect of BMP-2 on the proliferation of dental pulp cells is more obvious than that of dexamethasone, and there is no significant difference between the two groups in the differentiation of dental pulp cells, but the combined use of BMP-2 and dexamethasone can obviously promote the proliferation and differentiation of dental pulp cells.
【作者單位】： 廣西醫(yī)科大學(xué);廣西醫(yī)科大學(xué)附屬口腔醫(yī)院兒童牙病科;
【分類號】：R781

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 汪建樣;殷嫦嫦;鄔亞華;嚴(yán)晨;王子瑤;殷明;;GDF-5和Dex通過Wnt/β-catenin信號通路促進(jìn)rBMSCs體外成軟骨分化[J];基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床;2016年12期

2 劉彩宏;王軍強;;轉(zhuǎn)化生長因子β1在骨形態(tài)發(fā)生蛋白2誘導(dǎo)的人牙周膜干細(xì)胞成骨分化中的作用[J];牙體牙髓牙周病學(xué)雜志;2016年06期

3 林穎;秦偉;鄒瑞;林正梅;;促絲裂原激活蛋白激酶在牙髓干細(xì)胞向成牙本質(zhì)細(xì)胞分化和牙髓損傷修復(fù)中的作用[J];國際口腔醫(yī)學(xué)雜志;2016年03期

4 張悅;胡楊;沈玉鳳;單健良;何雨桐;何惠宇;;bFGF/BMP-2轉(zhuǎn)染大鼠骨髓干細(xì)胞體內(nèi)成牙的研究[J];口腔醫(yī)學(xué)研究;2016年03期

5 周俊;王兆晶;陳文th;陳文霞;;血管內(nèi)皮生長因子和骨形成蛋白2誘導(dǎo)犬恒牙原位牙髓再生[J];中華口腔醫(yī)學(xué)研究雜志(電子版);2016年01期

6 Jing Yang;Ling Ye;Tian-Qian Hui;Dong-Mei Yang;Ding-Ming Huang;Xue-Dong Zhou;Jeremy J Mao;Cheng-Lin Wang;;Bone morphogenetic protein 2-induced human dental pulp cell differentiation involves p38 mitogen-activated protein kinase-activated canonical WNT pathway[J];International Journal of Oral Science;2015年02期

7 郭冕;王宏偉;謝春成;姜振峰;朱敏偉;龍宇;暴洪博;沈紅;黃健萍;林志國;;骨形態(tài)發(fā)生蛋白質(zhì)2介導(dǎo)Smad和絲裂原活化蛋白激酶通路促進(jìn)人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖的實驗研究[J];中華神經(jīng)外科雜志;2015年04期

8 秦偉;高現(xiàn)靈;林正梅;;人骨形成蛋白-2對人牙髓細(xì)胞增殖和分化的影響[J];牙體牙髓牙周病學(xué)雜志;2014年10期

9 宋揚;秦青;高菊榮;王麗穎;劉佳;金作林;;BMP-2、bFGF和Dex聯(lián)合應(yīng)用對犬牙周膜細(xì)胞增殖及礦化結(jié)節(jié)形成能力的影響[J];中華老年口腔醫(yī)學(xué)雜志;2014年02期

10 謝小偉;裴福興;康鵬德;楊靜;沈彬;周宗科;;不同劑量、多療程地塞米松對大鼠成骨細(xì)胞生物活性及Wnt信號通路的影響[J];中國骨質(zhì)疏松雜志;2013年08期

【共引文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 陳鳳;班桂飛;歐永富;陳文霞;;根尖孔大小對牙髓再生組織量的作用研究[J];廣西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報;2017年05期

2 陸彥玲;林田;劉玉瑩;包麗榮;吳煜;;BMP-2和地塞米松對人牙髓細(xì)胞增殖和分化的影響[J];中國修復(fù)重建外科雜志;2017年06期

3 李慶華;費偉;郭駿;劉通;;不同處理方式治療髁突囊內(nèi)骨折繼發(fā)顳下頜關(guān)節(jié)強直動物模型的建立[J];實用醫(yī)院臨床雜志;2017年03期

4 歐永富;陳文霞;周俊;王兆晶;陳文th;陳鳳;班桂飛;;新型動物口腔診療支架的研制及應(yīng)用[J];醫(yī)療衛(wèi)生裝備;2017年04期

5 鄭麗珠;李小兵;張苗;于璐;劉奕杉;;牙髓干細(xì)胞在殼聚糖-纖維蛋白原復(fù)合支架材料上的黏附與增殖[J];中國組織工程研究;2017年10期

6 劉彩宏;王軍強;;轉(zhuǎn)化生長因子β1在骨形態(tài)發(fā)生蛋白2誘導(dǎo)的人牙周膜干細(xì)胞成骨分化中的作用[J];牙體牙髓牙周病學(xué)雜志;2016年06期

7 朱覺新;黃連芳;陳艷;;不同劑量糖皮質(zhì)激素對大鼠骨密度和生物力學(xué)性能的影響[J];醫(yī)用生物力學(xué);2016年01期

8 趙文青;林田;陸彥玲;吳煜;;骨誘導(dǎo)形成蛋白-2誘導(dǎo)牙髓細(xì)胞礦化最佳條件的探究[J];廣西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報;2015年06期

9 盧浩;柳康;張偉;;信號通路在唾液腺發(fā)育中的作用[J];中華老年口腔醫(yī)學(xué)雜志;2015年03期

10 安敏;王兆杰;安榮澤;葉含釗;;成骨細(xì)胞向脂肪細(xì)胞和骨細(xì)胞分化的研究進(jìn)展[J];中國醫(yī)學(xué)創(chuàng)新;2015年06期

【二級參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 王爽;豐培勛;陳悅;石建峰;曹沛;張海娟;;轉(zhuǎn)化生長因子β1對牙周膜干細(xì)胞遷移、粘附及增殖的影響[J];西安交通大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2015年06期

2 車冠華;戴支凱;;大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的培養(yǎng)及初步鑒定[J];臨床合理用藥雜志;2015年10期

3 鄔薇薇;胡楊;何惠宇;韓祥禎;王歡歡;;BMP-2、bFGF基因轉(zhuǎn)染的大鼠骨髓干細(xì)胞與牙胚細(xì)胞在體外混合培養(yǎng)對成牙基因的影響[J];口腔醫(yī)學(xué)研究;2015年01期

4 何穎;劉朋飛;劉曉;樸正根;蔡景蕾;;小鼠牙胚在腎包膜及口腔黏膜環(huán)境下成牙能力的比較研究[J];中國病理生理雜志;2015年01期

5 魏強強;殷嫦嫦;殷明;何丁文;周榮平;梁廣勝;;GDF-5聯(lián)合地塞米松誘導(dǎo)大鼠BMSCs向類髓核樣細(xì)胞分化[J];基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床;2014年08期

6 封艷;粱學(xué)萍;趙今;孫玉亮;鐘良軍;;人牙周膜干細(xì)胞與牙周膜細(xì)胞生物學(xué)特性的比較[J];中國組織工程研究;2014年28期

7 韓祥禎;何惠宇;胡楊;巴嬌嬌;;人骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2重組慢病毒載體轉(zhuǎn)染羊骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞及其成骨調(diào)節(jié)作用[J];中華實用診斷與治療雜志;2014年06期

8 吳麗娜;溫秀杰;劉魯川;行勇軍;劉銳;鄧蔓菁;聶鑫;;外胚間充質(zhì)干細(xì)胞在牙組織工程的應(yīng)用與基因調(diào)控[J];現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展;2014年08期

9 宋揚;秦青;高菊榮;王麗穎;劉佳;金作林;;BMP-2、bFGF和Dex聯(lián)合應(yīng)用對犬牙周膜細(xì)胞增殖及礦化結(jié)節(jié)形成能力的影響[J];中華老年口腔醫(yī)學(xué)雜志;2014年02期

10 巴嬌嬌;何惠宇;胡楊;馬嵋;韓祥禎;;牙胚細(xì)胞體外培養(yǎng)過程中成牙基因的表達(dá)[J];中國組織工程研究;2014年02期

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 王學(xué)俠;氟對離體培養(yǎng)的人牙髓細(xì)胞的毒性作用[J];國外醫(yī)學(xué).口腔醫(yī)學(xué)分冊;2002年01期

2 楊雪超,樊明文;體外持續(xù)培養(yǎng)對人牙髓細(xì)胞分化能力的影響[J];牙體牙髓牙周病學(xué)雜志;2003年02期

3 楊春瑜,劉泓,呂行,金曉明,靳占峰,陳鶴;體外培養(yǎng)人牙髓細(xì)胞的初步實驗觀察[J];哈爾濱醫(yī)科大學(xué)學(xué)報;2004年04期

4 董文波,吳補領(lǐng);蟾酥制劑對人牙髓細(xì)胞的細(xì)胞毒性研究[J];牙體牙髓牙周病學(xué)雜志;2004年09期

5 段建民;菊地寬高;汪維健;片山直;;血小板血漿對人牙髓細(xì)胞增殖的影響[J];牙體牙髓牙周病學(xué)雜志;2006年04期

6 段建民;汪維健;菊地寬高;;低濃度洗滌血小板促進(jìn)人牙髓細(xì)胞增殖的作用機制探討[J];實用口腔醫(yī)學(xué)雜志;2006年05期

7 高潔;劉冬娟;劉月華;;大鼠牙髓細(xì)胞的分離培養(yǎng)及超微結(jié)構(gòu)觀察[J];解剖科學(xué)進(jìn)展;2007年01期

8 張穎麗;姜新朋;張影杰;歐陽紅生;;堿性成纖維細(xì)胞生長因子對人體外培養(yǎng)牙髓細(xì)胞增殖的影響[J];現(xiàn)代口腔醫(yī)學(xué)雜志;2008年02期

9 李政權(quán);李俊;王敏;張紅梅;;體外培養(yǎng)的人牙髓細(xì)胞表型分析[J];臨床口腔醫(yī)學(xué)雜志;2009年03期

10 于清華;高玫梅;韓彥玲;周少云;;酶消化組織塊法培養(yǎng)人牙髓細(xì)胞[J];哈爾濱醫(yī)科大學(xué)學(xué)報;2009年02期

相關(guān)會議論文 前10條

1 邵美瑛;楊惠;程然;程立;胡濤;;內(nèi)毒素誘導(dǎo)牙髓細(xì)胞凋亡及其機制的初步研究[A];全國第三次牙體牙髓病學(xué)臨床技術(shù)研討會論文匯編[C];2009年

2 王倩;盧煜;李小玉;周學(xué)東;黃定明;;牙髓細(xì)胞類型識別受體及炎癥體表達(dá)的初步探討[A];全國第八次牙體牙髓病學(xué)學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2011年

3 莊Y，

本文編號：1842608