姜黃素聯(lián)合紫杉醇對人口腔鱗癌細(xì)胞的增殖抑制和凋亡誘導(dǎo)作用
本文選題:口腔鱗癌 + 姜黃素��; 參考:《山東大學(xué)》2017年碩士論文
【摘要】:姜黃素(curcumin)是從姜科、天南星科植物根莖中提取的一種天然色素,最早作為食品添加劑用于食品加工行業(yè)。近年研究發(fā)現(xiàn),它具備抗癌、抗自由基、消炎、醫(yī)治耐藥性結(jié)核病的作用,其防癌抗癌的作用已經(jīng)引起醫(yī)學(xué)界的廣泛興趣,有研究表明它能參與抑制多種腫瘤細(xì)胞的生長,并且具有明顯的誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡的作用。紫杉醇(paclitaxel)目前主要用于乳腺癌、卵巢癌的治療,關(guān)于聚合微管蛋白,紫杉醇有強(qiáng)化作用,可以減弱腫瘤細(xì)胞的過度增殖,還可以增強(qiáng)腫瘤的放射敏感度,。越來越多的學(xué)者正在廣泛研究其對機(jī)體多部位癌變的增殖抑制作用。本研究擬探討姜黃素、紫杉醇以及姜黃素聯(lián)合紫杉醇對離體人口腔鱗癌細(xì)胞增殖的抑制作用及細(xì)胞調(diào)亡作用,探索聯(lián)合用藥對人口腔鱗狀細(xì)胞癌的疊加治療效應(yīng),從而為姜黃素聯(lián)合紫杉醇治療人口腔鱗狀細(xì)胞癌提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。研究目的探索姜黃素聯(lián)合紫杉醇在抑制人口腔鱗癌細(xì)胞增殖和促進(jìn)人口腔鱗癌細(xì)胞凋亡中的疊加效應(yīng)。研究方法1.培養(yǎng)CAL27細(xì)胞系:復(fù)蘇人口腔鱗狀細(xì)胞癌CAL27細(xì)胞,進(jìn)行體外胰酶的消化傳代,察看培養(yǎng)后CAL27細(xì)胞系的狀態(tài)和活性,選擇處于對數(shù)生長期的CAL27細(xì)胞作為實(shí)驗(yàn)對象。2.觀察不同濃度姜黃素或紫杉醇或二者聯(lián)合用藥對CAL27細(xì)胞增殖的影響。利用有差異濃度和種類的姜黃素、紫杉醇及二者聯(lián)合用藥作用于CAL27細(xì)胞,MTT法檢測姜黃素、紫杉醇及聯(lián)合用藥對CAL27細(xì)胞增殖活性的影響。3.觀察不同濃度姜黃素、紫杉醇和二者聯(lián)合用藥對CAL27細(xì)胞調(diào)亡的影響。利用有差異濃度和種類的姜黃素、紫杉醇、及二者聯(lián)結(jié)用藥作用于CAL27細(xì)胞,TUNEL法檢測不同組CAL27細(xì)胞調(diào)亡情況的差異。4.通過Western-blot實(shí)驗(yàn)探討姜黃素、紫杉醇及聯(lián)合用藥對凋亡蛋白分子Bcl-2、Bax和活性caspase-3的表達(dá)的影響。研究結(jié)果1.人口腔鱗癌細(xì)胞培育增殖穩(wěn)定,呈貼壁生長,形態(tài)正常,腫瘤細(xì)胞較快增殖,約在培養(yǎng)第2天時達(dá)到對數(shù)生長期。姜黃素、紫杉醇單用于CAL27細(xì)胞時,藥物濃度的提高能夠強(qiáng)化對鱗癌細(xì)胞的增殖抑制作用,表現(xiàn)為濃度依賴性。2.姜黃素或紫杉醇單獨(dú)作用于CAL27細(xì)胞時,細(xì)胞的增殖抑制作用隨著時間增加而漸進(jìn)加強(qiáng),具有一定的時間依賴性。3.MTT實(shí)驗(yàn)表明在相同作用時間內(nèi),同濃度姜黃素聯(lián)合紫杉醇相比單獨(dú)用藥能顯著抑制CAL27細(xì)胞的增殖。4.TUNEL實(shí)驗(yàn)表明在相同作用時間內(nèi),同濃度姜黃素聯(lián)合紫杉醇相比單獨(dú)用藥能顯著增加CAL27細(xì)胞的凋亡數(shù)目。5.Western-blot實(shí)驗(yàn)表明在相同作用時間內(nèi),同濃度姜黃素聯(lián)合紫杉醇相比單獨(dú)用藥使,Bcl-2蛋白表達(dá)明顯下調(diào)、Bax2蛋白及活性Caspase-3蛋白表達(dá)明顯上調(diào)。結(jié)論1.姜黃素或紫杉醇都有抑制CAL27細(xì)胞增殖的效應(yīng),聯(lián)合用藥具有疊加效應(yīng)。2.姜黃素或紫杉醇均能誘導(dǎo)CAL27細(xì)胞細(xì)胞凋亡聯(lián)合用藥具有疊加效應(yīng)。3.姜黃素或紫杉醇均能下調(diào)Bcl-2蛋白的表達(dá),上調(diào)Bax蛋白及活性Caspase-3蛋白的表達(dá),聯(lián)合用藥作用更加顯著,并可以降低蛋白Bcl-2/Bax的比率。
[Abstract]:Curcumin (curcumin) from Zingiberaceae, a natural pigment extracted from Araceae plant roots, the earliest as a food additive used in food processing industry. Recent studies have found that it has anti-cancer, anti-inflammatory, anti free radical, treat drug resistant tuberculosis, its anti-cancer effect has aroused widespread interest in the medical profession. Research has shown that it can participate in the inhibition of tumor cell growth, and significantly induce apoptosis of tumor cells. Paclitaxel (paclitaxel) is mainly used for breast cancer, ovarian cancer, on the polymerization of tubulin, taxol has strengthening effect, can reduce the excessive proliferation of tumor cells, but also can enhance the tumor radiation sensitivity. More and more scholars are widely studied for many parts of the body malignant proliferation. This study intends to explore the effect of curcumin, curcumin and paclitaxel Effect of paclitaxel on apoptosis inhibition and cell proliferation of in vitro human oral squamous cell carcinoma, to explore the therapeutic effect of combined use of superposition of human oral squamous cell carcinoma, so as to provide experimental basis for curcumin combined with paclitaxel in the treatment of oral squamous cell carcinoma. The purpose of the study is to explore the effect of curcumin and paclitaxel in inhibiting and promoting effect of superposition apoptosis of human oral squamous cell carcinoma in the proliferation of human oral squamous cell carcinoma. Methods: 1. CAL27 cells: recovery of human oral squamous cell carcinoma CAL27 cells in vitro, trypsin digestion and passage, and inspect the state activity of cultured CAL27 cell lines, at the logarithmic growth phase CAL27 cells as experimental object to observe effects of different concentrations of.2. curcumin or paclitaxel or combination of the two drugs on the proliferation of CAL27 cells. The curcumin concentration and the kind of difference, and the two combined with paclitaxel Drugs acting on CAL27 cells, and detected MTT, paclitaxel and combination effects on the proliferation of CAL27 cells were observed by.3. of different concentrations of curcumin, effects of paclitaxel and combination of the two drugs on apoptosis of CAL27 cells by curcumin. There are different, and concentration of paclitaxel, and two drugs acting on CAL27 connection cells, TUNEL method was used to detect the different group of CAL27 cell death of.4. Western-blot by different experimental study of curcumin, Bcl-2 paclitaxel and combination of apoptosis proteins, Bax and activity of Caspase-3 was studied. The results of 1. human oral squamous carcinoma cell proliferation is fostering stable, adherent growth, normal morphology, rapid proliferation of tumor cells and about second days in culture reached the logarithmic growth phase. Curcumin and paclitaxel for CAL27 cells, the increase of drug concentration can strengthen the squamous cell carcinoma cell proliferation inhibition, table The concentration dependence of.2. curcumin or paclitaxel alone in CAL27 cells, cell proliferation inhibition increased with time and gradual strengthening, time-dependent.3.MTT experiments show that at the same time, compared with the same concentration of curcumin combined with paclitaxel on proliferation of.4.TUNEL experimental drug alone can significantly inhibit CAL27 cells showed that in the same time, compared with the same concentration of curcumin combined with paclitaxel alone could significantly increase the apoptosis of.5.Western-blot CAL27 cells showed that the number of experiments at the same time, the same concentration of curcumin combined with paclitaxel monotherapy compared to Bcl-2 protein expression, down-regulation of Bax2 protein and activity of Caspase-3 protein expression was significantly up-regulated. Conclusion curcumin or paclitaxel 1. alcohol has the effect of inhibiting the proliferation of CAL27 cells, in combination with the superimposed effect of curcumin or paclitaxel were.2. The expression can induce the apoptosis of CAL27 cells in combination with.3. additive effect curcumin or paclitaxel can regulate Bcl-2 protein, up-regulated Bax protein expression and activity of Caspase-3 protein, the combination effect is more significant, and can reduce the rate of protein Bcl-2/Bax.
【學(xué)位授予單位】:山東大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2017
【分類號】:R739.8
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,本文編號:1743266
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