本文選題：牙齦卟啉單胞菌　切入點：脂多糖　出處：《華西口腔醫(yī)學雜志》2015年06期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：目的從基因和蛋白水平研究谷氧還蛋白(Grx)在牙齦卟啉單胞菌脂多糖(LPS)誘導臍靜脈內(nèi)皮細胞(EA-hy926細胞)時的表達變化及其對Akt通路的調(diào)控作用。方法采用牙齦卟啉單胞菌的LPS(1 000 ng·m L-1)對EA-hy926細胞進行不同時間段(4、12、18、24 h)的刺激誘導,采用實時熒光定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應檢測細胞grx1基因的表達變化;然后加入Grx特異性抑制劑氯化亞硝脲(BCNU),使用Western blot法檢測對照組、LPS組(1 000 ng·m L~(-1)LPS刺激12 h)和BCNU組(25μmol·m L-1BCNU預處理30 min+1 000 ng·m L~(-1)LPS刺激12 h)的Grx、Akt、磷酸化Akt蛋白的表達情況。結(jié)果 LPS誘導下,EA-hy926細胞的grx1基因表達量在各個時間段均上調(diào),12 h時grx1表達量最高。LPS誘導12 h時,LPS組的Grx蛋白表達量較對照組明顯升高(P0.05),而BCNU可有效抑制Grx蛋白的表達(P0.05);Akt蛋白表達量在各組間無明顯差異(P0.05),而LPS組的磷酸化Akt活性升高,顯著高于對照組和BCNU組(P0.05),與Grx蛋白的表達趨勢一致。結(jié)論 LPS可以從基因和蛋白水平誘導Grx的表達;Grx是Akt的潛在調(diào)節(jié)因子,可能對LPS刺激下Akt的調(diào)控具有重要意義。
[Abstract]:Objective to investigate the expression of glutathione (Grx) in cultured umbilical vein endothelial cells (EA-hy926) induced by lipopolysaccharide (LPS) from porphyromonas gingivalis at the gene and protein levels. Methods the regulation of Akt pathway was studied by using gingival porphyrin monomonas. EA-hy926 cells were stimulated by LPS(1 (#number0# ng 路m -1) for 1824 h. The expression of grx1 gene was detected by real-time fluorescence quantitative reverse transcriptase polymerase chain reaction. Western blot assay was used to detect the expression of phosphorylated Akt protein in control group (1 000 ng 路mL ~ (-1)) and BCNU group (n = 25 渭 mol 路ml ~ (-1) BCNU for 12 h) treated with 30 min 1 000 ng 路mL ~ (-1) BCNU for 12 h. The expression of grx1 gene in fruit LPS induced HY926 cells was up-regulated at each time point at 12 h. The expression of Grx protein in lipopolysaccharide group was significantly higher than that in control group at 12 h. BCNU could effectively inhibit the surface of Grx protein. There was no significant difference in the expression of P0.05Akt protein among the groups, but the phosphorylated Akt activity in LPS group was higher than that in the control group. Conclusion LPS can induce the expression of Grx from gene and protein levels, which may be a potential regulatory factor for Akt, and may play an important role in the regulation of Akt stimulated by LPS.
【作者單位】： 口腔疾病研究國家重點實驗室華西口腔醫(yī)院牙周病科(四川大學);
【基金】：國家自然科學基金資助項目(81371150) 四川省科技計劃基金資助項目(2011JY0128)
【分類號】：R780.2

【共引文獻】

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