MAP4K3-mTOR信號(hào)在甘草查而酮A誘導(dǎo)的鱗癌細(xì)胞自噬與凋亡中的作用研究
本文選題:甘草查爾酮A 切入點(diǎn):口腔鱗癌細(xì)胞 出處:《口腔醫(yī)學(xué)研究》2017年12期 論文類型:期刊論文
【摘要】:目的:探索MAP4K3-mTOR信號(hào)級(jí)聯(lián)在甘草查而酮A誘導(dǎo)的人口腔鱗癌細(xì)胞自噬與凋亡中的作用。方法:分別采用0、25、50μmol/L甘草查爾酮A刺激人口腔鱗癌SCC-25系細(xì)胞,并于刺激后0、6及24h收集細(xì)胞,采用Western blot檢測MAP4K3、AKT、mTOR通路分子,細(xì)胞自噬標(biāo)識(shí)分子LC3-II、beclin1,以及細(xì)胞凋亡標(biāo)記分子caspase-3、caspase-9及bcl-2等的蛋白表達(dá)水平,采用Annexin V-PI染色檢測細(xì)胞凋亡狀況。結(jié)果:甘草查爾酮A可劑量及時(shí)間依賴性地降低SCC-25細(xì)胞MAP4K3、p-mTOR及p-p70S6蛋白的表達(dá)水平,促進(jìn)其LC3-II、beclin1、caspase-3及caspase-9蛋白表達(dá)水平,并抑制其bcl-2蛋白表達(dá)水平(P0.05)。采用慢病毒過表達(dá)MAP4K3后,p-mTOR、caspase-3及caspase-9蛋白表達(dá)水平顯著增高,LC3-II、beclin1及bcl-2蛋白表達(dá)水平則顯著降低(P0.05)。經(jīng)甘草查爾酮A刺激后,SCC-25細(xì)胞早期凋亡數(shù)與晚期凋亡數(shù)均較對(duì)照組顯著增多,該效應(yīng)可被MAP4K3過表達(dá)處理顯著增強(qiáng)(P0.05)。結(jié)論:甘草查爾酮A可時(shí)間劑量依賴地抑制MAP4K3-mTOR信號(hào)級(jí)聯(lián),并促進(jìn)人口腔鱗癌細(xì)胞的自噬與凋亡,當(dāng)過表達(dá)MAP4K3活化mTOR信號(hào)級(jí)聯(lián)后,鱗癌細(xì)胞自噬活動(dòng)受到抑制,但其凋亡活動(dòng)則顯著增強(qiáng)。
[Abstract]:Aim: to investigate the role of MAP4K3-mTOR signal cascade in the autophagy and apoptosis of human oral squamous carcinoma cells induced by glycyrrhizin A. methods: human oral squamous cell carcinoma (SCC-25) cells were stimulated with 0 ~ 2550 渭 mol/L of glycyrrhizin A and collected at 0 ~ 6 and 24 h after stimulation. Western blot was used to detect the protein expression levels of MAP4K3AK ~ + -mTOR pathway, LC3-IIBbeclin1 and apoptosis marker caspase-3, caspase-9 and bcl-2, respectively. Results: glycyrrhizin A could decrease the expression of MAP4K3, p-mTOR and p-p70S6 protein in SCC-25 cells in a dose-and time-dependent manner, and promote the expression of caspase-3 and caspase-9 protein in SCC-25 cells. The expression of p-mTORcaspase-3 and caspase-9 protein increased significantly after lentivirus overexpression of MAP4K3, and the expression levels of LC3-IIBbeclin1 and bcl-2 protein decreased significantly. The number of early apoptosis and the number of early apoptosis in SCC-25 cells stimulated by licorice chalcone A were significantly decreased. The number of phase apoptosis was significantly higher than that of control group. This effect can be significantly enhanced by MAP4K3 overexpression. Conclusion: glycyrrhizin A can inhibit MAP4K3-mTOR signal cascade in a time-and dose-dependent manner, and promote autophagy and apoptosis of human oral squamous carcinoma cells. When overexpression of MAP4K3 activates mTOR signal cascade, The autophagy activity of squamous carcinoma cells was inhibited, but the apoptotic activity was significantly increased.
【作者單位】: 第四軍醫(yī)大學(xué)唐都醫(yī)院口腔科;
【基金】:國家自然科學(xué)基金(編號(hào):81502337) 陜西省自然科學(xué)基金(編號(hào):2015JM8486)
【分類號(hào)】:R739.8
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本文編號(hào):1622280
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