本文關(guān)鍵詞：腦苷肌肽干預(yù)后轉(zhuǎn)基因AD模型小鼠海馬的蛋白質(zhì)組學(xué)研究

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【摘要】：目的:阿爾茨海默病(AD)是一種隱襲起病呈進行性發(fā)展的神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病,與年齡有相關(guān)性,嚴重影響老年人的生活質(zhì)量,也給照料者造成負擔(dān)。AD發(fā)病機制及影響因素復(fù)雜,涉及基因變異、蛋白修飾異常、淀粉樣蛋白沉積、神經(jīng)營養(yǎng)及可塑性改變、氧化應(yīng)激、細胞凋亡、能量代謝紊亂、細胞結(jié)構(gòu)失衡等。病理研究發(fā)現(xiàn)AD患者或動物模型海馬神經(jīng)元有明顯損傷,直接影響記憶及空間定位等生理功能,海馬是癡呆患者較早發(fā)生病理改變的部位。關(guān)于AD的治療,目前臨床一線治療藥物也僅限于多奈哌齊和美金剛,而且只能緩解癥狀,并不能逆轉(zhuǎn)或阻止病情進展。腦苷肌肽因其神經(jīng)修復(fù)作用被廣泛應(yīng)用于各種中樞及周圍神經(jīng)系統(tǒng)損傷性疾病。國內(nèi)較普遍應(yīng)用腦苷肌肽治療阿爾茨海默病,臨床觀察有一定的療效,但其作用機制亦不明確。蛋白質(zhì)組學(xué)最初被定義為一個基因組所表達的蛋白質(zhì),然而產(chǎn)生蛋白質(zhì)的細胞組織是動態(tài)的,并且容易受到外環(huán)境的影響。因而目前認為蛋白質(zhì)組是一個已知的細胞在某一特定時刻所包括所有亞型和修飾的全部蛋白質(zhì)。蛋白質(zhì)組學(xué)就是從整體角度分析細胞內(nèi)動態(tài)變化的蛋白質(zhì),包括其組成、表達水平與修飾狀態(tài),了解蛋白質(zhì)之間的相互作用與聯(lián)系,提示蛋白質(zhì)的功能與細胞的活動規(guī)律。鑒于轉(zhuǎn)基因小鼠模型所引起的病理改變相對單一,產(chǎn)生病理變化所經(jīng)歷時間較短,能夠更好地模擬AD病理改變和臨床特點,已成為目前國內(nèi)外研究AD病因及發(fā)病機制和臨床治療策略較理想的動物模型。本研究通過對正常對照組、模型組及腦苷肌肽干預(yù)后APPswe/PS1d E9雙轉(zhuǎn)基因AD模型小鼠海馬組織進行比較蛋白質(zhì)組學(xué)研究,鑒定差異表達蛋白并分析其生物學(xué)功能,幫助我們深入理解阿爾茨海默病的病理機制及腦苷肌肽對腦組織的保護作用機制,為探討阿爾茨海默病臨床診治的新思路提供實驗依據(jù)。方法:選取5月齡APPswe/PS1d E9雙轉(zhuǎn)基因AD模型小鼠共24只,隨機分組:模型組(Tg)、腦苷肌肽干預(yù)組(Tg+CEGI-6.6)各12只,同月齡相同遺傳背景C57/BL6J小鼠12只作為對照組。腦苷肌肽干預(yù)組給予腹腔注射腦苷肌肽6.6m L/kg/d,模型組及對照組給予等劑量的生理鹽水。30天后,分別處死動物,取小鼠大腦海馬組織,提取蛋白質(zhì)進行肽段TMT標(biāo)記,并進行LC-LTQ-MS/MS分析以及質(zhì)譜數(shù)據(jù)檢索,對所得差異蛋白進行生物學(xué)功能分析。結(jié)果:1運用TMT定量結(jié)合LC-MS/MS技術(shù)檢測,并采用國際比較流行的常規(guī)的分析表達差異蛋白點標(biāo)準(zhǔn),即1.5倍以上的變化幅度是可信的。得出:腦苷肌肽干預(yù)組與模型組比較,得出可信差異蛋白122個,其中表達上調(diào)的蛋白有56個(Table1),表達下調(diào)的蛋白有66個(Table2);腦苷肌肽干預(yù)組與正常對照組比較,得出可信差異蛋白143個,其中表達上調(diào)的蛋白有51個(Table3),表達下調(diào)的蛋白有92個(Table4)。2 GeneCoDis3分析差異蛋白的生物學(xué)過程,腦苷肌肽干預(yù)組小鼠大腦海馬組織差異蛋白的功能主要涉及細胞結(jié)構(gòu)維持、細胞膜運輸、細胞能量代謝、細胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、脂質(zhì)代謝、蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)運、蛋白質(zhì)水解、細胞增殖及凋亡、炎癥、氧化應(yīng)激、免疫反應(yīng)調(diào)節(jié)等生物過程。結(jié)論:1運用蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)鑒定出APP/PS1小鼠及腦苷肌肽干預(yù)后的差異表達蛋白,初步建立APP/PS1小鼠及腦苷肌肽治療后小鼠海馬組織的蛋白質(zhì)組數(shù)據(jù)庫,這些蛋白質(zhì)主要涉及細胞結(jié)構(gòu)維持、胞膜運輸、細胞能量代謝、細胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、脂質(zhì)代謝、蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)運及水解、細胞增殖及凋亡、炎癥、氧化應(yīng)激、免疫反應(yīng)調(diào)節(jié)等生物過程。這些過程與神經(jīng)退行性疾病尤其是AD的發(fā)病機制及病理過程密切相關(guān),深入探究有利于我們進一步理解這些疾病的內(nèi)在本質(zhì)。2腦苷肌肽對APP/PS1小鼠神經(jīng)細胞損傷有一定保護作用,其機制可能是通過穩(wěn)定細胞骨架結(jié)構(gòu),維持突觸穩(wěn)定性,減緩神經(jīng)節(jié)苷脂退化速度,抑制炎癥反應(yīng)及氧化應(yīng)激等方面發(fā)揮其對神經(jīng)元的保護作用。
【關(guān)鍵詞】：阿爾茨海默病 轉(zhuǎn)基因小鼠 腦苷肌肽 蛋白質(zhì)組學(xué) LC/MS TMT定量標(biāo)記
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R-332;R749.16
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• 英文摘要6-9
• 前言9-11
• 材料與方法11-15
• 結(jié)果15-16
• 附表16-26
• 討論26-36
• 結(jié)論36-37
• 參考文獻37-43
• 綜述 微管相關(guān)蛋白與神經(jīng)退行性疾病43-53
• 參考文獻49-53
• 致謝53-54
• 個人簡歷54

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前8條

1 許玉霞;王洪權(quán);趙紅;郭景春;朱粹青;;海馬注射β-淀粉樣蛋白前體蛋白抗體誘導(dǎo)神經(jīng)元的退行性變及學(xué)習(xí)記憶障礙(英文)[J];生物化學(xué)與生物物理進展;2011年10期

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本文編號：861365