本文關(guān)鍵詞：SH-SY5Y神經(jīng)細(xì)胞中α7神經(jīng)型尼古丁受體基因沉默對CaM、CaMKⅡ蛋白水平的影響

  更多相關(guān)文章： RNA干擾 α神經(jīng)型尼古丁受體 CaM CaMKⅡ SH-SYY細(xì)胞

【摘要】：目的構(gòu)建穩(wěn)定的α7 n AChR沉默的神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞(SH-SY5Y)細(xì)胞,研究α7神經(jīng)型尼古丁受體(n AChR)基因沉默對鈣調(diào)蛋白(Ca M)、鈣調(diào)素依賴性蛋白激酶Ⅱ(Ca MKⅡ)水平的影響,了解α7 n AChR神經(jīng)保護(hù)作用及其與阿爾茨海默病(AD)發(fā)病機(jī)制的關(guān)系。方法將α7 n AChR shRNA重組質(zhì)轉(zhuǎn)染到SH-SY5Y,用含嘌呤霉素的培養(yǎng)液篩選,挑選陽性克隆后采用實(shí)時熒光定量PCR和蛋白質(zhì)印跡方法(Western-blot)檢測細(xì)胞中α7n AChR mRNA及蛋白表達(dá)水平的變化;Western-blot方法測定Ca M、Ca MKⅡ蛋白表達(dá)水平。結(jié)果獲得穩(wěn)定轉(zhuǎn)染α7 n AChR shRNA重組質(zhì)粒的細(xì)胞克隆株,與對照組相比,α7 n AChR mRNA及蛋白表達(dá)量分別減少了95%和80%。Ca M、Ca MKⅡ蛋白表達(dá)量分別減少了48.5%和35%。結(jié)論成功構(gòu)建了α7 n AChR mRNA沉默的SH-SY5Y細(xì)胞細(xì)胞株,α7 n AChR沉默降低了Ca M、Ca MKⅡ的蛋白水平,可能影響信號通路轉(zhuǎn)導(dǎo),這可能與阿爾茨海默病(AD)的發(fā)病有一定的關(guān)系。
【作者單位】： 貴州醫(yī)科大學(xué)分子生物學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;貴州醫(yī)科大學(xué)病理學(xué)教研室;
【關(guān)鍵詞】： RNA干擾 α神經(jīng)型尼古丁受體 CaM CaMKⅡ SH-SYY細(xì)胞
【基金】：國家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(81360178) 教育部“長江學(xué)者和創(chuàng)新團(tuán)隊發(fā)展計劃資助”(IRT13058) 貴州省科技廳重大專項(xiàng)(黔科合重大專項(xiàng)字2014[6008]),貴州省科技廳項(xiàng)目(201344,黔科合SY字[2013]3020)
【分類號】：R749.16
【正文快照】： 阿爾茨海默病(AD)是一種老年人最常見的中樞神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病,從中年期到晚年期緩慢發(fā)生的記憶損傷和認(rèn)知功能障礙[1,2]。膽堿能系統(tǒng)功能障礙是早期AD較突出的基本特征,在AD發(fā)生中具有顯著作用[3]。神經(jīng)型尼古丁受體又稱煙堿乙酰膽堿受體(Neuronal acetylcholine receptors,

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 王桂君;姚玉勝;王洪新;;Ca~(2+)/CaMKⅡ信號通路在腫瘤壞死因子-α誘導(dǎo)心肌肥大中的作用[J];中國藥理學(xué)通報;2010年03期

2 孫臣友;戚雙雙;孫淑紅;周鵬;崔懷瑞;唐茂林;;姜黃素對快速老化小鼠學(xué)習(xí)與記憶功能及海馬Ca~(2+)/CaMKⅡ水平的影響[J];中國中西醫(yī)結(jié)合雜志;2011年03期

3 趙鵬軍 ,李奮 ,朱飛云 ,潘俊 ,楊歡喜 ,錢龍華 ,孫錕;慢性缺氧對幼鼠心肌細(xì)胞CaM、CaMKⅡ的影響[J];臨床兒科雜志;2005年06期

4 王青山;侯麗艷;張翠麗;楊曦偉;宋福永;謝克勤;;2,5-己二酮對大鼠大腦中CaM及CaMKⅡα影響[J];中國公共衛(wèi)生;2008年11期

5 任銳,李百祥;染鋁對大鼠大腦皮層中CaM和CaMKⅡ蛋白表達(dá)影響[J];毒理學(xué)雜志;2005年S1期

6 王凈凈;張曉霞;;愈癇靈對致癇大鼠海馬神經(jīng)元CaM和CaMKⅡα表達(dá)的影響[J];湖南中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報;2006年05期

7 劉鵬;偉忠民;;細(xì)胞內(nèi)Ca~(2+)濃度和CaMKⅡ?qū)W(xué)習(xí)和記憶的作用與影響的研究進(jìn)展[J];遼寧醫(yī)學(xué)院學(xué)報;2009年01期

8 張尤新;葉麗平;包翠芬;趙艷;;急性染鉛對大鼠海馬Ca~(2+)-CaMKⅡ信號通路影響[J];中國公共衛(wèi)生;2010年09期

9 柯俊;張存泰;馬業(yè)新;;CaMKⅡ與心肌肥厚[J];中國心血管病研究雜志;2006年12期

10 姚文鳴;吳鑒明;;急性酒精染毒小鼠的學(xué)習(xí)記憶與海馬CaMKⅡ的表達(dá)[J];皖南醫(yī)學(xué)院學(xué)報;2010年04期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 任銳;李百祥;;染鋁對大鼠大腦皮層中CaM和CaMKⅡ蛋白表達(dá)影響[A];中國毒理學(xué)會第四屆全國學(xué)術(shù)會議論文（摘要）集[C];2005年

2 于卓;周兆年;楊黃恬;;CaMKⅡ在間歇性低氧抗心肌缺血/再灌注損傷中的作用[A];第六屆海峽兩岸心血管科學(xué)研討會論文摘要集[C];2007年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前4條

1 單良;碘缺乏和甲狀腺功能減退對大鼠仔鼠小腦發(fā)育的損傷及CaMKⅡ、CaM和CaN表達(dá)影響的研究[D];中國醫(yī)科大學(xué);2009年

2 李鵬;唑來膦酸對破骨細(xì)胞分化中鈣離子振蕩和CaMKⅡ、CaMKⅣ、NFATc1基因表達(dá)的影響[D];華北理工大學(xué);2015年

3 劉鵬;出生前后慢性鋁暴露對年輕大鼠海LTP及細(xì)胞內(nèi)Ca~（2+）濃度和CaMKⅡ表達(dá)的影響[D];中國醫(yī)科大學(xué);2008年

4 廖雙;甲醛暴露對大鼠學(xué)習(xí)記憶及海馬CaMKⅡ表達(dá)的影響[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2010年

，

本文編號：593640