本文關(guān)鍵詞：應(yīng)用IVIG中抗Aβ寡聚體的抗體治療阿爾茨海默病的實(shí)驗(yàn)研究

  更多相關(guān)文章： 阿爾茨海默病 β淀粉樣蛋白 靜脈注射免疫球蛋白 寡聚體 抗寡聚體抗體

【摘要】：阿爾茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)是一種主要造成學(xué)習(xí)和記憶等認(rèn)知功能損傷的中樞神經(jīng)系統(tǒng)紊亂疾病,其主要病理特征包括成熟的Aβ纖維在腦內(nèi)沉積形成的老年斑(senile plaques,SP)、異常過度磷酸化的微管相關(guān)蛋白(tau蛋白)在神經(jīng)元內(nèi)聚集形成的神經(jīng)元纖維纏(neurofibrillary tangles,NFT)、神經(jīng)元丟失導(dǎo)致的腦萎縮、膠質(zhì)增生以及炎癥。越來越多的研究表明,由Aβ單體聚集形成的可溶性寡聚體對(duì)AD病的發(fā)生起著關(guān)鍵作用。研究發(fā)現(xiàn)靜脈注射免疫球蛋白(intravenous immunoglobulin,IVIG)可以顯著改善攜帶APOE-e4基因的AD病人的記憶力。但是,IVIG對(duì)AD病人發(fā)揮作用的機(jī)制尚不清楚。本研究中,我們運(yùn)用藍(lán)膠或Aβ寡聚體親和層析從IVIG中分離純化特異識(shí)別Aβ寡聚體抗體,并在體內(nèi)和體外研究了這兩類抗體的特性。體外研究結(jié)果表明,這兩類寡聚體抗體都能夠抑制Aβ的聚集和Aβ寡聚體誘導(dǎo)產(chǎn)生的神經(jīng)細(xì)胞毒性。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明,與對(duì)照組相比,親和藍(lán)膠層析純化獲得的寡聚體抗體(Blue-NAbs)、Aβ寡聚體親和層析純化獲得的寡聚體抗體(Oli-NAbs)以及IVIG能夠明顯改善APPswe/PS1d E9轉(zhuǎn)基因小鼠的空間記憶和認(rèn)知能力,減少小鼠腦內(nèi)的可溶性和寡聚化的Aβ水平。進(jìn)一步研究表明,較高濃度的Blue-NAbs則能夠有效減少小鼠腦內(nèi)的老年斑數(shù)量和不可溶性Aβ溶水平,較高濃度的Oli-NAbs則顯著抑制小膠質(zhì)細(xì)胞和星形膠質(zhì)細(xì)胞的激活以及下調(diào)了促炎癥細(xì)胞因子TNF-α和IL-6的釋放。總之,IVIG中低濃度的寡聚體抗體能夠改善AD鼠的空間記憶能力、減少其腦內(nèi)的可溶性的Aβ寡聚體水平,但是若要降低不可溶性的Aβ水平、老年斑的數(shù)量或緩解AD鼠腦內(nèi)的炎癥反應(yīng),則需要高濃度的寡聚體抗體。IVIG來源于成千上萬健康人的血漿,當(dāng)中包含了千萬種針對(duì)不同抗原的低濃度的抗體。從IVIG中分離純化天然的寡聚體抗體(NAbs-Aβo)不會(huì)影響正常的IVIG的功能。相比于IVIG,通過親和層析富集獲得的抗體對(duì)AD小鼠的治療效果更好。天然的寡聚體抗體作為一種安全制劑,在治療AD病人時(shí)將比IVIG更為切實(shí)可行。
【關(guān)鍵詞】：阿爾茨海默病 β淀粉樣蛋白 靜脈注射免疫球蛋白 寡聚體 抗寡聚體抗體
【學(xué)位授予單位】：安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R749.16
【目錄】：

• 摘要3-4
• Abstract4-8
• 英文縮寫詞表8-9
• 1 文獻(xiàn)綜述9-16
• 1.1 阿爾茨海默癥簡(jiǎn)介9-10
• 1.2 AD的發(fā)病機(jī)理10-14
• 1.2.1 APP的水解及AβOs的生成10-11
• 1.2.2 AβOs的毒性機(jī)制11-14
• 1.3 阿爾茨海默病的治療策略14-16
• 2 引言16-18
• 3 材料和方法18-27
• 3.1 實(shí)驗(yàn)材料和儀器18-20
• 3.1.1 IVIG及試劑盒18
• 3.1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物、細(xì)胞和抗體18
• 3.1.3 其他實(shí)驗(yàn)材料18-19
• 3.1.4 主要儀器設(shè)備19
• 3.1.5 主要溶液的配置19-20
• 3.2 實(shí)驗(yàn)方法20-27
• 3.2.1 Aβ40 與Aβ42 的處理20
• 3.2.2 IVIG中特異抗AβOs抗體的純化20-22
• 3.2.3 ThT檢測(cè)純化獲得的AβOs抗體對(duì)Aβ42 聚集的影響22
• 3.2.4 兩種AβOs抗體與Aβ 單體、寡聚體、纖維的結(jié)合特性分析22
• 3.2.5 兩種AβOs抗體對(duì)于Aβ 誘導(dǎo)的細(xì)胞毒性的影響（MTT）22-23
• 3.2.6 AD轉(zhuǎn)基因小鼠的實(shí)驗(yàn)方法23-27
• 4 結(jié)果與分析27-43
• 4.1 AβOs抗體體外藥效學(xué)研究27-31
• 4.1.1 兩種Aβ 抗體與Aβ 單體、寡聚體、纖維的結(jié)合特性分析27-29
• 4.1.2 AβOs抗體抑制Aβ42 的聚集29-30
• 4.1.3 AβOs抗體降低AβOs誘導(dǎo)的細(xì)胞毒性30-31
• 4.2 AβOs抗體對(duì)AD轉(zhuǎn)基因小鼠的治療作用31-43
• 4.2.1 AβOs抗體改善AD小鼠的記憶、認(rèn)知能力及緩解突觸的損傷31-33
• 4.2.2 AβOs抗體減少AD小鼠腦內(nèi)不可溶Aβ 的水平33-35
• 4.2.3 AβOs抗體減少AD轉(zhuǎn)基因小鼠腦內(nèi)可溶性Aβ 及AβOs的水平35-37
• 4.2.4 AβOs抗體抑制小鼠腦內(nèi)膠質(zhì)細(xì)胞增生37-40
• 4.2.5 AβOs抗體減少了AD轉(zhuǎn)基因小鼠腦內(nèi)TNF-α、IL-1β 和IL-6 的產(chǎn)生40-41
• 4.2.6 AβOs抗體未導(dǎo)致腦內(nèi)微出血和淋巴細(xì)胞浸潤41-43
• 5 討論43-46
• 6 結(jié)論46-47
• 6.1 研究總結(jié)46
• 6.2 需要進(jìn)一步開展的工作46-47
• 參考文獻(xiàn)47-53
• 致謝53-54
• 作者簡(jiǎn)介54

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