發(fā)布時間：2017-05-03 02:10

  本文關(guān)鍵詞：線粒體分裂和融合蛋白在快速老化小鼠海馬及額葉的增齡性表達研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：阿爾茨海默病（Alzheimer’s disease，AD）是一種以進行性智能衰退為主要表現(xiàn)的中樞神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病，其主要病理特征為老年斑和神經(jīng)原纖維纏結(jié)，同時伴有神經(jīng)元缺失和膠質(zhì)增生。AD的病因及發(fā)病機制目前尚未完全清楚，可能與β-淀粉樣蛋白沉積、tau蛋白過度磷酸化、膠質(zhì)細胞的炎癥反應(yīng)、apoE基因的多態(tài)性以及線粒體功能障礙等有關(guān)。隨著社會人口的老齡化，AD病人日益增多，其已經(jīng)成為繼心血管病、癌癥、中風(fēng)后的第四大死亡原因。 由于AD的發(fā)病機制較為復(fù)雜，人們制作了很多AD的動物模型，但客觀準(zhǔn)確地說，沒有任何一種模型能夠全面地再現(xiàn)、模擬、復(fù)制出AD的主要病理、生化、神經(jīng)遞質(zhì)及行為學(xué)等方面的全部特征性變化。其中快速老化小鼠SAMP8相對來說是一種較為理想的AD動物模型，該小鼠既有學(xué)習(xí)記憶功能障礙等衰老特征，又有淀粉樣蛋白沉積、老年斑及免疫功能紊亂等AD的一些重要特征。SAMR1為同系的正常老化小鼠，常作為SAMP8的正常對照。 越來越多的研究證據(jù)表明，AD的發(fā)病可能與線粒體的分裂和融合異常有關(guān)。線粒體是一種動態(tài)變化的細胞器，其在細胞內(nèi)的數(shù)量和形態(tài)在不斷地發(fā)生變化，這種高度動態(tài)現(xiàn)象是由兩種相反的過程：線粒體分裂和線粒體融合來進行調(diào)控的。事實上，線粒體分裂和融合的高度動態(tài)平衡不僅調(diào)控著線粒體的形態(tài)、長短、大小和數(shù)量，而且也調(diào)控著其功能和分布。因此，線粒體分裂和融合的異常會對神經(jīng)元的功能產(chǎn)生明顯的影響。在哺乳動物中，線粒體的分裂主要是由動力樣蛋白1(dynamin-like protein1，DLP1)和線粒體分裂蛋白1(fission1，F(xiàn)is1)來調(diào)控的，而融合則是由線粒體融合蛋白1(mitofusin1，Mfn1)、線粒體融合蛋白2(mitofusin2，Mfn2)及視神經(jīng)萎縮蛋白1(opticatrophy1，OPA1)來調(diào)控的。 目的：本研究通過應(yīng)用實時熒光定量反轉(zhuǎn)錄PCR及Western blot的方法，觀察線粒體分裂和融合蛋白在SAMP8及SAMR1小鼠海馬及額葉的增齡性表達變化，藉以推測線粒體分裂和融合異常在AD發(fā)病中所起的作用，以期為AD的發(fā)病機制提供部分理論基礎(chǔ)和實驗依據(jù)，也為其治療提供新的思路。 方法：選用4、8、10、12月齡健康雄性SAMP8及SAMR1小鼠各6只，應(yīng)用實時熒光定量反轉(zhuǎn)錄PCR及Western blot的方法，觀察線粒體分裂和融合蛋白DLP1、Fis1、Mfn1、Mfn2及OPA1在SAMP8及SAMR1小鼠海馬及額葉的增齡性表達變化。 結(jié)果：RT-qPCR結(jié)果顯示SAMP8及SAMR1小鼠的海馬及額葉組織在各時間點均表達DLP1、Fis1、Mfn1、Mfn2及OPA1mRNA。與SAMR1組相比，DLP1和Fis1mRNA在SAMP8小鼠海馬的表達4月齡時降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），8月齡和10月齡時表達升高，但差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），12月齡時表達升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），DLP1及Fis1mRNA在兩組小鼠額葉的增齡性表達變化趨勢與海馬相同，提示隨著年齡的增長，，線粒體分裂增多。與SAMR1組相比，Mfn1和Mfn2mRNA在SAMP8小鼠海馬的表達4月齡時升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），8月齡時兩組差別不大，無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），10月齡及12月齡時表達均升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），Mfn1和Mfn2mRNA在兩組小鼠額葉的增齡性表達變化趨勢與海馬相同，提示隨著年齡的增長，線粒體融合也增多。與SAMR1組相比，OPA1mRNA在SAMP8小鼠海馬的表達在4、10和12月齡時均升高，8月齡時兩組差別不大，但均無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），OPA1mRNA在兩組小鼠額葉的增齡性表達變化趨勢與海馬相同，提示隨著年齡的增長，OPA1mRNA的表達變化不明顯。Western blot的結(jié)果顯示Fis1、Mfn1和Mfn2蛋白在兩組小鼠的海馬組織各時間點均有表達。與SAMR1組相比，F(xiàn)is1蛋白在SAMP8小鼠海馬的表達4月齡時降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），8月齡和10月齡時表達升高，但差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），12月齡時表達明顯升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），提示隨著年齡的增長，線粒體分裂增多。與SAMR1組相比，Mfn1和Mfn2蛋白在SAMP8小鼠海馬的表達4月齡時升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），8月齡時兩組差別不大，無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），10月齡及12月齡時表達均升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）提示隨著年齡的增長，線粒體融合也增多。 結(jié)論：本實驗的研究結(jié)果表明，隨著年齡的增長，在SAMP8小鼠的海馬及額葉中存在著線粒體分裂和融合蛋白的表達異常，DLP1和Fis1的表達升高，Mfn1和Mfn2的表達也升高，而OPA1的表達則無明顯變化，說明隨著老化的出現(xiàn)，線粒體分裂和融合的動態(tài)平衡被破壞，提示線粒體的分裂和融合參與了AD的病理生理過程中。
【關(guān)鍵詞】：線粒體分裂 線粒體融合 阿爾茨海默病 快速老化小鼠 DLP1 Fis1 Mfn1 Mfn2 OPA1
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號】：R749.16
【目錄】：

• 中文摘要4-7
• 英文摘要7-10
• 英文縮寫10-11
• 前言11-12
• 材料與方法12-24
• 結(jié)果24-26
• 附圖26-31
• 附表31-35
• 討論35-38
• 結(jié)論38
• 參考文獻38-42
• 綜述42-56
• 參考文獻48-56
• 致謝56-57
• 個人簡歷57

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 劉蓉;葉蘭;徐運;;阿爾茨海默病中β淀粉樣多肽與線粒體異常及靶向治療[J];國際神經(jīng)病學(xué)神經(jīng)外科學(xué)雜志;2010年03期

2 于春艷;李洪巖;康勁松;鐘加滕;孫連坤;;線粒體分裂融合基因在氧化應(yīng)激誘導(dǎo)宮頸癌Hela細胞損傷中的作用[J];中國婦幼保健;2009年33期

3 郝希純;王東明;;Drp1蛋白調(diào)節(jié)線粒體分裂機制及其在疾病中的作用[J];廣東醫(yī)學(xué);2011年08期

4 漆正堂;郭維;張媛;賀杰;丁樹哲;;不同運動方式對大鼠骨骼肌線粒體融合分裂基因及Mfn2、Drp1蛋白表達的影響[J];中國運動醫(yī)學(xué)雜志;2011年02期

5 張子怡;張勇;;線粒體動態(tài)變化與線粒體質(zhì)量控制:運動的適應(yīng)與調(diào)節(jié)[J];中國運動醫(yī)學(xué)雜志;2011年09期

6 劉世榮;何維;;SUMO化修飾:一種多功能的蛋白質(zhì)翻譯后修飾方式[J];醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)雜志;2006年03期

7 舒世華;;線粒體棒狀結(jié)構(gòu)的來源和功能[J];青海醫(yī)學(xué)院通訊;1979年02期

8 董明;Ⅰ型脊髓灰質(zhì)炎病毒中和抗原決定簇在白喉病毒融合蛋白中的表達[J];國際生物制品學(xué)雜志;1990年02期

9 何淳;盧圣棟;;基因工程蛋白質(zhì)產(chǎn)物的純化[J];醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)雜志;1991年02期

10 金冬雁;曾慶;周圓;徐榮輝;李玉英;侯云德;;一種兼具抗病毒活性及pHSA結(jié)合活性的蛋白——乙型肝炎病毒前S2肽段與人α2a型干擾素的融合蛋白[J];科學(xué)通報;1993年02期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 楊軼;劉居理;楊敏;;線粒體融合和分裂與心臟疾病[A];中國藥理學(xué)會第十一次全國學(xué)術(shù)會議�？痆C];2011年

2 楊軼;楊敏;;線粒體融合與分裂:治療缺血性心臟疾病的新靶點?[A];2011年中國藥學(xué)大會暨第11屆中國藥師周論文集[C];2011年

3 張真真;吳勝男;邢達;;實時監(jiān)測線粒體分裂蛋白Drp1在UV誘導(dǎo)細胞凋亡中的轉(zhuǎn)位[A];第七屆全國光生物學(xué)學(xué)術(shù)會議論文摘要集[C];2010年

4 張勇;;線粒體重構(gòu)與運動和健康[A];2009全國運動生理學(xué)發(fā)展與學(xué)科建設(shè)研討會論文集[C];2009年

5 王玉梅;劉暢;蒙沖;郭風(fēng)云;;HEV ORF_2重組菌菌種的穩(wěn)定性及融合蛋白的應(yīng)用[A];新世紀(jì) 新機遇 新挑戰(zhàn)——知識創(chuàng)新和高新技術(shù)產(chǎn)業(yè)發(fā)展（上冊）[C];2001年

6 陳金頂;廖明;辛朝安;;鵝Ⅰ型禽副粘病毒株融合蛋白(F)基因的克隆及序列分析[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會禽病學(xué)會分會第十次學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2000年

7 楊素榮;姚明輝;;細胞因子GM-CSF、IL-3和GM-CSF/IL-3融合蛋白對輻射致Tf-1細胞凋亡的影響[A];中國藥理學(xué)會第八次全國代表大會暨全國藥理學(xué)術(shù)會議論文摘要匯編[C];2002年

8 龔朝輝;金勇豐;張耀洲;;CTB和胰島素融合蛋白在家蠶中表達的研究[A];華東六省一市生物化學(xué)與分子生物學(xué)會2003年學(xué)術(shù)交流會論文摘要集[C];2003年

9 李芳芳;;重癥肌無力單鏈抗體融合蛋白的酵母菌表達及特異性鑒定[A];第六屆全國免疫學(xué)學(xué)術(shù)大會論文集[C];2008年

10 楊燕凌;;酶(蛋白)融合技術(shù)研究[A];華東地區(qū)農(nóng)學(xué)會學(xué)術(shù)年會暨福建省科協(xié)第七屆學(xué)術(shù)年會農(nóng)業(yè)分會場論文集[C];2007年

中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 記者 朱敏麗　通訊員 潘越;中國醫(yī)藥城首批融合蛋白試劑出口[N];泰州日報;2010年

2 吳紅梅;我省首批融合蛋白試劑出口美國[N];新華日報;2010年

3 金陵;融合蛋白試劑首次出口美國[N];中國醫(yī)藥報;2010年

4 記者 張曄　通訊員 劉寧春;一種有效治療冠心病的融合蛋白發(fā)現(xiàn)[N];科技日報;2009年

5 記者 魏巍 通訊員 沈季;吉大一抗腫瘤新藥進入臨床試驗階段[N];長春日報;2005年

6 通訊員 沈季 記者 張兆軍;抗腫瘤融合蛋白進入臨床試驗[N];科技日報;2005年

7 馮衛(wèi)東;抑制蛋白相互作用可成為治癌新方法[N];科技日報;2009年

8 ;吉大抗腫瘤生物工程新藥進入臨床試驗[N];中國高新技術(shù)產(chǎn)業(yè)導(dǎo)報;2005年

9 董丹　劉昱輝 吳元華;基因工程生產(chǎn)降鈣素研究方興未艾[N];中國醫(yī)藥報;2007年

10 本報記者　 賴強;單抗藥物期待中國加速度[N];醫(yī)藥經(jīng)濟報;2006年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 張文斌;線粒體融合、分裂在細胞寒冷應(yīng)激中作用及其機制的初步研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2008年

2 李夏春;人全長Tau蛋白過度表達對線粒體分裂融合動態(tài)及細胞退變的影響[D];華中科技大學(xué);2013年

3 門秀麗;Drp-1基因參與高糖誘導(dǎo)胰島β細胞凋亡的相關(guān)機制研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2007年

4 王東;煙草和衣藻中ftsZ基因的克隆及功能分析[D];中國科學(xué)院植物研究所;2001年

5 漆正堂;骨骼肌線粒體對不同訓(xùn)練方式的適應(yīng)及其基因應(yīng)答機制的研究[D];華東師范大學(xué);2009年

6 詹明;P66Shc介導(dǎo)的線粒體動力學(xué)變化在糖尿病腎病腎小管氧化損傷中的研究[D];中南大學(xué);2012年

7 柏亞鐸;犬瘟熱病毒、犬冠狀病毒入侵宿主細胞機制研究[D];中國農(nóng)業(yè)大學(xué);2005年

8 張懷;人Hepcidin融合表達載體的構(gòu)建、在大腸桿菌中的表達及制備研究[D];北京化工大學(xué);2005年

9 王玉梅;嵌合降鈣素基因的構(gòu)建及表達[D];中國海洋大學(xué);2005年

10 徐海燕;人BAFF基因轉(zhuǎn)染細胞及其單克隆抗體的生物學(xué)特性[D];蘇州大學(xué);2005年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 褚麗芳;線粒體分裂和融合蛋白在快速老化小鼠海馬及額葉的增齡性表達研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2013年

2 韓敬哲;雷帕霉素對SOD1轉(zhuǎn)基因小鼠線粒體質(zhì)量控制機制的影響[D];河北醫(yī)科大學(xué);2012年

3 白江濤;抗氧化劑SS31肽調(diào)節(jié)海馬組織線粒體分裂和融合失衡改善快速老化小鼠學(xué)習(xí)和記憶功能的研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2013年

4 許靜;血管性癡呆小鼠海馬組織線粒體動力學(xué)變化及左旋丁基苯肽的干預(yù)作用[D];河北醫(yī)科大學(xué);2013年

5 邱小雪;癲癇持續(xù)狀態(tài)大鼠海馬線粒體分裂、融合變化的研究[D];山東大學(xué);2013年

6 王潔;3-甲基腺嘌呤和氯喹對維生素K3誘導(dǎo)人宮頸癌細胞凋亡的影響[D];吉林大學(xué);2013年

7 于敏;TRAF1引起線粒體聚集的抗凋亡生物學(xué)效應(yīng)及其機制研究[D];華中科技大學(xué);2009年

8 于敏;TRAF1引起線粒體聚集的抗凋亡生物學(xué)效應(yīng)及其機制研究[D];華中科技大學(xué);2009年

9 蘇城昌;釀酒酵母HET1基因與線粒體分配關(guān)系初探[D];復(fù)旦大學(xué);2010年

10 高娟;肌萎縮側(cè)索硬化中線粒體的動力學(xué)變化[D];河北醫(yī)科大學(xué);2012年

  本文關(guān)鍵詞：線粒體分裂和融合蛋白在快速老化小鼠海馬及額葉的增齡性表達研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：342119