目的:研究可卡因—安非他明調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄肽（cocaine-amphetamine-regulated transcript,CART）抗體在嗎啡依賴和復(fù)吸中的作用。方法:用分子生物學(xué)的技術(shù)克隆將CART_55-102序列克隆到pGEX-4T3原核表達(dá)載體多克隆位點(diǎn),構(gòu)建GST—CART_55-102融合表達(dá)載體。在原核細(xì)胞中表達(dá)并純化融合蛋白GST—CART_55-102,免疫學(xué)方法制備CART_55-102多克隆抗體,用親和層析技術(shù)純化CART_55-102抗體,蛋白印記技術(shù)鑒定親和層析純化抗體的特異性,用行為學(xué)方法分別觀察純化后兔源性CART_55-102抗體對(duì)嗎啡誘導(dǎo)的小鼠條件性位置偏愛的影響。結(jié)果:GST—CART_55-102在大腸桿菌中能以上清的形式大量表達(dá),并能用GST親和層析方法獲得純度大于90%的GST—CART_55-102。商業(yè)化CART單抗可識(shí)別該融合蛋白,表明該融合蛋白具有CART單抗所識(shí)別的抗原表位。We... 

【文章來源】：中國人民解放軍海軍軍醫(yī)大學(xué)上海市 211工程院校

【文章頁數(shù)】：72 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

pGEX一4T3一CART55.:

123456圖2.PCR法擴(kuò)增ACRTos一102psk一CART克隆上擴(kuò)增出CART55一:。:片段。第2泳道:NDAMarker(DL2000)。7片段第1，2，3，

pGEx一4T3一以RT

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號(hào)：3287887