在阿爾茲海默癥（Alzheimer’s disease,AD）中,寡聚態(tài)Aβ會造成突觸傳遞受損,其機制之一為神經(jīng)遞質釋放異常。在本項研究中,我們發(fā)現(xiàn)寡聚態(tài)Aβ引起的代謝型谷氨酸受體（metabotropic glutamate receptor 5,mGluR5）過度激活會使磷脂酰肌醇 4,5 二磷酸（phosphatidylinositol 4,5-bisphosphate,PIP2）水平降低,最終造成神經(jīng)遞質的釋放幾率下降。而抑制mGluR5的激活,可以阻止外源性寡聚態(tài)Aβ42引起的PIP2含量減少,使神經(jīng)遞質的釋放幾率明顯回升。通過在原代培養(yǎng)的小鼠海馬神經(jīng)元中加入外源性寡聚態(tài)Aβ42,我們發(fā)現(xiàn)PIP2在軸突上的分布顯著下降,并且電生理實驗結果顯示寡聚態(tài)Aβ42能夠抑制小鼠海馬CA1區(qū)錐體神經(jīng)元微小興奮性突觸后電流（excitatory postsynaptic currents,mEPSCs）的頻率和神經(jīng)遞質釋放幾率,而神經(jīng)遞質釋放位點的數(shù)量并沒有發(fā)生變化。進一步的研究表明,抑制調控PIP2水解的磷脂酶C（phospholipase C,PLC）,可以阻斷寡聚態(tài)Aβ42造成的PI... 

【文章來源】：浙江大學浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

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【學位級別】：博士

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圖３．１寡聚態(tài)Ａ｜ｉ４２明顯抑制海馬ＣＡ１區(qū)錐體神經(jīng)元ｍＥＰＳＣｓ的幅度和鏔率

共聚焦熒光顯微鏡進行拍攝記錄。染色結果顯示與對照組相比，在孵育液中急性??給予４００?ｎＭ寡聚態(tài)八卩４２處理２０?ｍｉｎ后，海馬神經(jīng)元的活性突觸終末扣數(shù)量并沒??有明顯變化（圖３．２?Ａ，Ｂ）。這一結果表明，納摩爾級寡聚態(tài)Ａｐ４２對ｍＥＰＳＣｓ頻??率的影響與突觸前遞質釋放位點的數(shù)量無關。??Ａ?ＡＰ?Ｂ??圖３．２寡聚態(tài)Ａｐ？對離體海馬神經(jīng)元活性突觸終末扣數(shù)量沒有明顯影響。（Ａ）離體培養(yǎng)的海??馬神經(jīng)元對照姐和寡聚態(tài)Ａ（３４２處理組活性突觸終末扣ＦＭ１－４３標記的典型圖。Ｂａｒ＝５０?ｐｎ。??（Ｂ）對照組與寡聚態(tài)Ａｐ４２處理組海馬神經(jīng)元活性突觸終末扣ＦＭ１－４３標記的數(shù)量統(tǒng)計圖。??對照繼，ｎ?＝?１１；寡聚態(tài)?Ａ０４２?處理組，ｎ?＝?１１。／－ｔｅｓｔ。Ｄａｔａ?ａｒｅ?ｍｅａｎ?土?ＳＥＭ。??３．３納摩爾級寡聚態(tài)Ａｐ４２對小鼠海馬ＣＡ１區(qū)興奮性突觸前遞質釋放??幾率有明顯抑制作用??由于寡聚態(tài)Ａｐ４２對突觸前遞質釋放位點數(shù)量沒有影響，那么ｍＥＰＳＣｓ頻率的??降低很有可能是突觸遞質釋放幾率的變化造成的。我們在小鼠海馬腦片上進行了??雙脈沖異化（ｐａｉｒｅｄ－ｐｕ丨ｓｅ?ｆａｃｉｌｉｔａｔｉｏｎ，?ＰＰＦ）實驗，即用全細胞模式記錄ＣＡ１區(qū)錐??體神經(jīng)元時，在距記錄細胞３００?（ａｍ的位置上放置雙極刺激電極，通過給予相差５０??１９??

?實驗結果??ｍｓ的兩個刺激后記錄到的兩個ＥＰＳＣｓ?（圖３．３Ａ）。這兩個ＥＰＳＣ幅度的比值與神??經(jīng)遞質釋放幾率成反比關系，因而可以用這一比值對遞質釋放幾率進行間接估計。??我們發(fā)現(xiàn)，與對照組小鼠相比，在給予寡聚態(tài)Ａｐ４２后，ＰＰＦ?ｒａｔｉｏ明顯增加（圖３．３??Ａ），這間接表明寡聚態(tài)Ａｐ４２可能造成了小鼠海馬神經(jīng)元突觸遞質釋放幾率的降低。??為了直接證明寡聚態(tài)Ａｐ４２對神經(jīng)遞質釋放幾率的抑制作用，我們用一種重復??刺激的方式對突觸前待釋放囊泡池（ｒｅａｄｉｌｙ?ｒｅｌｅａｓａｂｌｅ?ｐｏｏｌ，?ＲＲＰ）的大小和神經(jīng)遞??質釋放幾率進行了估算（圖３．３Ｂ）。將刺激記錄得到的ＥＰＳＣ幅度做成累積曲線圖??（圖３．３?Ｂ），然后對最后２０個刺激的線性增加區(qū)進行線性回歸計算，與縱坐標的??交點數(shù)值即代表ＰＰＲ的大小，與此同時，遞質釋放幾率等于第一個ＥＰＳＣ的幅度??值與ＲＲＰ的大小的比值。結果表明

【參考文獻】：
博士論文
[1]EFR3A調節(jié)寡聚態(tài)Aβ誘導的鼠海馬興奮性神經(jīng)遞質釋放異常的機制[D]. 何洋.浙江大學 2017
[2]星形膠質細胞在免疫刺激誘發(fā)的幼年小鼠癲癇發(fā)作易感中的作用及機制[D]. 秦花萍.浙江大學 2016



本文編號：3064354