第一部分大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的分離、培養(yǎng)和鑒定【目的】探討大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（Mesenchymal stem cells, MSCs）的體外分離、純化、傳代、鑒定,為進(jìn)行細(xì)胞移植提供功能穩(wěn)定的種子細(xì)胞�！痉椒ā繜o菌條件下取幼年SD大鼠的股骨,采用全骨髓培養(yǎng)結(jié)合細(xì)胞貼壁法分離純化MSCs。待細(xì)胞生長鋪滿塑料瓶底80%-90%左右時(shí),用0.25%胰蛋白酶控制消化30-60S后進(jìn)行傳代。倒置相差顯微鏡下觀察原代及傳代后的細(xì)胞的形態(tài)。通過向骨細(xì)胞分化誘導(dǎo)方法對擴(kuò)增后的MSCs進(jìn)行鑒定�！窘Y(jié)果】大鼠MSCs在體外可以分離培養(yǎng)擴(kuò)增,分離培養(yǎng)的MSCs形態(tài)呈長梭形,為貼壁生長的成纖維樣細(xì)胞,傳代后的細(xì)胞形態(tài)趨于均一。經(jīng)誘導(dǎo)MSCs能分化為成骨細(xì)胞,茜素紅S可見鈣結(jié)節(jié)陽性�！窘Y(jié)論】全骨髓培養(yǎng)結(jié)合細(xì)胞貼壁法可以成功的建立大鼠MSCs體外分離和培養(yǎng)體系,且培養(yǎng)的MSCs純度高,活力強(qiáng),性狀穩(wěn)定。MSCs具有多向分化潛能,可通過誘導(dǎo)向成骨細(xì)胞分化。第二部分血管性癡呆大鼠模型的制備【目的】探討制備理想的血管性癡呆（Vascular dementia,VD）動(dòng)物模型方法�！痉椒ā坎捎瞄g隔7天先后結(jié)扎雙側(cè)的頸... 

【文章來源】：廣西醫(yī)科大學(xué)廣西壯族自治區(qū)

【文章頁數(shù)】：67 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
英文縮寫表
中文摘要
英文摘要
前言
第一部分 大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的分離、培養(yǎng)和鑒定
    1 材料與方法
        1.1 材料
        1.2 方法
    2 結(jié)果
        2.1 MSCs的原代和傳代培養(yǎng)
        2.2 生長曲線的繪制
        2.3 MSCs 向成骨細(xì)胞分化的誘導(dǎo)
    3 討論
第二部分 血管性癡呆大鼠模型的制備
    1 材料和方法
        1.1 主要儀器設(shè)備
        1.2 M o r r i s 水迷宮行為學(xué)檢測
        1.3 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及分組
        1.4 VD 模型的制作
        1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
    2 結(jié)果
        2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物一般情況
        2.2 VD 模型行為學(xué)檢測結(jié)果
    3 討論
第三部分 大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植 對血管性癡呆大鼠模型的療效觀察及 BDNF 檢測
    1 材料
        1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組及處理
        1.2 主要儀器和試劑
    2 方法
        2.1 MSCs 的標(biāo)記和計(jì)數(shù)
        2.2 行為學(xué)檢測
        2.3 腦脊液的采集
        2.4 海馬和額葉皮質(zhì)組織勻漿制備
        2.5 ELISA 法測定 BDNF 濃度
        2.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    3 結(jié)果
        3.1 MSCs移植對VD大鼠學(xué)習(xí)記憶的影響
        3.2 B D N F 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作
        3.3 BDNF 的含量變化
    4 討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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[2]熒光染料CFSE標(biāo)記大鼠間充質(zhì)干細(xì)胞的體外研究[J]. 李艷菊,鄧蘭,黃睿,郭坤元.  南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2009(01)
[3]Immunosuppressive effects of rat mesenchymal stem cells:involvement of CD4+ CD25+ regulatory T cells[J]. Zhou Ye,Yan Wang,Hai-Yang Xie and Shu-Sen Zheng Key Laboratory of Combined Multi-organ Transplantation,Ministry of Public Health;Key Laboratory of Organ Transplantation,Zhejiang Province;and Department of Hepatobiliary and Pancreatic Surgery,First Affiliated Hospital,Zhejiang University School of Medicine,Hangzhou 310003,China.  Hepatobiliary & Pancreatic Diseases International. 2008(06)
[4]大鼠血管性癡呆模型的改良[J]. 鄭敏,趙驥,陳紅光,王幫華,鮑翠玉.  咸寧學(xué)院學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2008(04)
[5]骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植對腦梗塞大鼠神經(jīng)功能恢復(fù)及突觸素表達(dá)的影響[J]. 翁金森,劉楠,杜厚偉,陳榮華,張逸仙,王杰華,黃華品.  細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志. 2008(01)
[6]Brain-derived neurotrophic factors increase the proliferation and differentiation of endogenous neural stem cells in mouse models of cerebral infarction[J]. Surindar Cheema.  Neural Regeneration Research. 2007(03)
[7]經(jīng)皮穿刺延髓池抽取兔和大鼠腦脊液的方法[J]. 富宏,陶迎紅,王學(xué)美,楊金霞,劉庚信.  中國比較醫(yī)學(xué)雜志. 2006(11)
[8]Effects of Co-grafts Mesenchymal Stem Cells and Nerve Growth Factor Suspension in the Repair of Spinal Cord Injury[J]. 方煌,王俊芳,陳安民.  華中科技大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)英德文版). 2006(02)
[9]骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞透過新生大鼠血腦屏障的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 官曉清,余加林,李祿全,劉官信.  中華兒科雜志. 2004(12)
[10]大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的分離純化與初步鑒定[J]. 張本斯,王凡,鄧力,羊惠君,李瑞祥.  中國組織化學(xué)與細(xì)胞化學(xué)雜志. 2003(02)



本文編號：3030847