研究背景 阿爾茨海默病(Alzheimer disease,AD)是老年期癡呆最常見的類型,是一種以進(jìn)行性認(rèn)知功能障礙和記憶力損害為主的中樞神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病,具有較高的致殘性。AD的主要病理改變是:大腦皮層及海馬區(qū)的β淀粉樣蛋白(Amyloidβ-peptide,Aβ)在胞外積累并形成老年斑( senile plaque, SP)、腦神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)tau蛋白異常聚集形成的神經(jīng)原纖維纏結(jié)( neurofibrillary tangle, NFT)、神經(jīng)元突觸功能異常及錐體神經(jīng)細(xì)胞的丟失。其患病率隨年齡增長(zhǎng)而上升,因此,隨著人類平均壽命延長(zhǎng)和人口老齡化的出現(xiàn),AD對(duì)人類健康的危害變得日益突出,已成為當(dāng)前老年醫(yī)學(xué)面臨的最為嚴(yán)峻的問題之一。流行病學(xué)資料顯示,長(zhǎng)期服用阿司匹林的人群中AD的患病率明顯低于未服用者。如果能進(jìn)一步證實(shí)阿司匹林在AD防治中的作用,闡明其機(jī)制,將有利于AD的預(yù)防與治療。 研究目的 本研究在體內(nèi)條件下用側(cè)腦室定向注射β淀粉樣蛋白(Aβ)模擬AD的基本病理改變,用阿司匹林進(jìn)行干預(yù),測(cè)試大鼠在Morris水迷宮中的逃避潛伏期,并用ELISA檢測(cè)大鼠腦組織內(nèi)IL-6、IL-1β和TNFα,用Western Blot方法檢測(cè)NF-κB及iNOS蛋白。同時(shí)觀察阿司匹林對(duì)AD模型海馬CA1區(qū)神經(jīng)元的影響。在本研究基礎(chǔ)上,探討阿司匹林對(duì)AD是否具有防治作用及其機(jī)制,以期為將來臨床應(yīng)用阿司匹林防治AD提供部分實(shí)驗(yàn)室依據(jù)。 研究方法 本研究主要涉及的實(shí)驗(yàn)技術(shù):Western Blot方法、morris水迷宮、側(cè)腦室定向注射術(shù)、雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)。將50只大鼠隨機(jī)分為5組,每組10只:(1)高劑量阿司匹林干預(yù)組:大鼠予含阿司匹林2mg/ml的蒸餾水溶液喂服,自由進(jìn)食。3周后側(cè)腦室內(nèi)注射Aβ溶液5μl,再予含阿司匹林2mg/ml的蒸餾水溶液喂服3周,自由進(jìn)食。(2)中劑量阿司匹林干預(yù)組:大鼠予含阿司匹林1mg/ml的蒸餾水溶液喂服,自由進(jìn)食。3周后側(cè)腦室內(nèi)注射Aβ溶液5μl,再予含阿司匹林1mg/ml的蒸餾水溶液喂服3周,自由進(jìn)食。(3)低高劑量阿司匹林干預(yù)組:大鼠予含阿司匹林0.5mg/ml的蒸餾水溶液喂服,自由進(jìn)食。3周后側(cè)腦室內(nèi)注射Aβ溶液5μl,再予含阿司匹林0.5mg/ml的蒸餾水溶液喂服3周,自由進(jìn)食。(4)模型組:大鼠予蒸餾水喂服,3周后側(cè)腦室內(nèi)注射Aβ溶液5μl,再予蒸餾水喂服,自由進(jìn)食;(5)假手術(shù)組:大鼠予蒸餾水喂服,3周后側(cè)腦室內(nèi)注射無菌生理鹽水5μl,再予蒸餾水喂服,自由進(jìn)食。第6周結(jié)束時(shí),使用morris水迷宮測(cè)試大鼠學(xué)習(xí)記憶能力改變。然后處死大鼠使用ELISA方法檢測(cè)大鼠腦組織內(nèi)IL-6、IL-1β、6和TNFα水平。用Western Blot方法檢測(cè)NF-κB及iNOS蛋白。海馬區(qū)腦組織制作病理切片,HE染色后觀察神經(jīng)元損傷情況。 研究結(jié)果 1、術(shù)后3周,模型組逃避潛伏期較假手術(shù)組明顯延長(zhǎng),分別為42.96±17.51s、27.21±13.23s,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。阿司匹林各劑量干預(yù)組逃避潛伏期較模型組縮短,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。2、海馬CA1區(qū)染色顯示模型組海馬CA1區(qū)神經(jīng)元數(shù)量明顯減少,細(xì)胞排列紊亂,結(jié)構(gòu)疏松。而不同劑量的阿司匹林干預(yù)組,海馬CA1神經(jīng)元數(shù)目和細(xì)胞排列較整齊。3、Aβ側(cè)腦室定向注射導(dǎo)致NF-κB蛋白表達(dá)的增加,同時(shí)上調(diào)IL-1β、TNFα的水平。4、各不同劑量阿司匹林干預(yù)組,NF-κB蛋白表達(dá)、IL-1β、TNFα水平較模型組均減少,但I(xiàn)L-6無明顯下降。 結(jié)論 側(cè)腦室定向注射Aβ25-35能引起AD樣病理改變,引起海馬神經(jīng)元損傷,使大鼠學(xué)習(xí)記憶能力下降。阿司匹林干預(yù)可改善AD模型大鼠的學(xué)習(xí)記憶能力。阿司匹林可能是通過抑制NF-κB信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的激活,下調(diào)IL-1β、IL-6、TNFα等的釋放,從而對(duì)AD模型大鼠學(xué)習(xí)記憶能力起到保護(hù)作用。
【學(xué)位單位】：第二軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位年份】：2011
【中圖分類】：R749.16
【部分圖文】：

學(xué)位論文物自由游泳 2min。正式實(shí)驗(yàn)每天訓(xùn)練 1 次，每次 2入水點(diǎn)選擇一個(gè)，將動(dòng)物面向池壁放入水中，記錄動(dòng)避潛伏期(escape latency)。如果動(dòng)物在 2min 內(nèi)未找到 1-2 天為訓(xùn)練，后 3 天數(shù)據(jù)作為學(xué)習(xí)和記憶成績(jī)。胡毓洪：阿司匹林在阿爾茨海默病防治中的抗炎機(jī)制研究

大鼠進(jìn)行水迷宮試驗(yàn)

SD大鼠頭骨（背側(cè)面）（楊安峰等，《大鼠的解剖與組織》）
【引證文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 林珍;周德喜;解丹;孔令娜;房城伯;詹磊;黃成;李俊;;脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染TRPM7 siRNA對(duì)Aβ_(25-35)誘導(dǎo)SH-SY5Y細(xì)胞分泌炎癥因子的影響[J];中國(guó)藥理學(xué)通報(bào);2013年06期

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前1條

1 趙鑫;高濃度阿司匹林通過抑制NF-κB和p-38激活蛋白的活性降低小鼠RAW264.7細(xì)胞中LPS誘導(dǎo)的促炎細(xì)胞因子的表達(dá)[D];延邊大學(xué);2013年

本文編號(hào)：2846189