目的 研究GLP-1類似物利拉魯肽對(duì)H202誘導(dǎo)的神經(jīng)母細(xì)胞瘤SH-SY5Y細(xì)胞的AD樣神經(jīng)退行性變的保護(hù)作用。 方法 本研究以人神經(jīng)母細(xì)胞瘤SH-SY5Y細(xì)胞作為研究對(duì)象,分為四組分別給予不同的藥物處理即對(duì)照組(Con)、氧化損傷組(H202處理24小時(shí))、治療組(利拉魯肽Lira預(yù)處理組)、P13K抑制劑Wortmannin(Wt)阻斷組(應(yīng)用利拉魯肽前給予1uM Wortmannin預(yù)處理1小時(shí))。后三組細(xì)胞需要加入H202誘導(dǎo)神經(jīng)元氧化損傷模型,而治療組在給予H202損傷前進(jìn)行利拉魯肽預(yù)處理4小時(shí)。MTT實(shí)驗(yàn)檢測各組SH-SY5Y細(xì)胞活性、LDH實(shí)驗(yàn)檢測各組SH-SY5Y細(xì)胞毒性、脂質(zhì)氧化MDA檢測細(xì)胞氧化應(yīng)激水平、annexin-Ⅴ/PI雙染后流式細(xì)胞儀分析不同處理組細(xì)胞凋亡百分比、免疫印跡實(shí)驗(yàn)檢測各組SH-SY5Y細(xì)胞微管相關(guān)蛋白Tau和神經(jīng)絲蛋白(NFs)的磷酸化水平、Bcl-2家族成員凋亡相關(guān)蛋白Bax和存活相關(guān)蛋白Bcl-2的表達(dá)、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白酶caspase-3的表達(dá)以及PI3K-AKt信號(hào)通路中關(guān)鍵的激酶PKB/Akt和GSK-3p的磷酸化水平。 結(jié)果 與Con組相比,氧化損傷(H202)組SH-SY5Y細(xì)胞存活率顯著降低,乳酸脫氫酶(LDH)釋放率增高,細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物MDA水平顯著增高,細(xì)胞凋亡百分比顯著增高,細(xì)胞內(nèi)Tau和NFs蛋白過度磷酸化,Bax水平明顯增高,Bcl-2水平顯著下降,活化的caspase-3增多,PKB/Akt和GSK-3β的磷酸化水平減弱；利拉魯肽干預(yù)治療(Lira)組與氧化損傷(H202)組相比,細(xì)胞存活率顯著增高,乳酸脫氫酶釋放率降低,細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物MDA水平明顯降低,細(xì)胞凋亡百分比顯著下降,細(xì)胞內(nèi)Tau和NFs蛋白的磷酸化水平減弱,Bax水平降低,Bcl-2顯著增多,活化的caspase-3減少以及PKB/Akt和GSK-3p的磷酸化水平顯著提升。而Wortmannin (Wt)阻斷組相比Lira治療組其細(xì)胞存活率顯著降低,細(xì)胞毒性增加,細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物MDA水平增高,細(xì)胞凋亡百分比增高,胞內(nèi)Tau和NFs蛋白過度磷酸化,Bax的表達(dá)明顯增多,Bcl-2的表達(dá)減少,活化的caspase-3增多以及PKB/Akt和GSK-3β的磷酸化水平減弱。 結(jié)論 利拉魯肽能夠?qū)笻202誘導(dǎo)的AD樣神經(jīng)退行性變,其機(jī)制可能通過激活PI3K-AKt信號(hào)傳導(dǎo)通路提高細(xì)胞的存活,抑制細(xì)胞凋亡,改善神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)Tau蛋白與NFs的異常磷酸化進(jìn)而發(fā)揮神經(jīng)保護(hù)性作用。
【學(xué)位單位】：天津醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2014
【中圖分類】：R749.16

【參考文獻(xiàn)】

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1 李玲玲;劉蓉;葉蘭;徐運(yùn);;抗氧化劑在阿爾茨海默病治療中的地位和臨床應(yīng)用前景[J];國際神經(jīng)病學(xué)神經(jīng)外科學(xué)雜志;2009年06期

2 于德紅;魏朝良;包永明;安利佳;;阿爾茨海默病與氧化應(yīng)激[J];生物醫(yī)學(xué)工程學(xué)雜志;2006年05期

本文編號(hào)：2816783