中樞血管緊張素Ⅱ在淀粉樣蛋白生成中的作用研究
【學(xué)位單位】：南京醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2011
【中圖分類】：R749.16
【部分圖文】：
圖 1：根據(jù) takara 公司說明書制定的 real-time PCR 反應(yīng)條件.3.3 分析：根據(jù) ΔΔCT 公式法計算各組之間特定基因的相對表達量。.4 組織總蛋白提取.4.1 組織勻漿：取 50 mg 腦組織至 5 mL 勻漿管中，加入 1 mL RIPA 后在冰盒上勻漿 10 sec。后置冰盒上裂解 30 min。.4.2 離心：將上述裂解液轉(zhuǎn)移到 1.5 mL EP 管中，在 12 500 rpm 下離心 10 min。.4.3 組織蛋白濃度測定：取 5 uL 蛋白樣品加入到 95 uL 生理鹽水中，再加入 3mL 考馬斯亮藍(lán) G250 染液。30 min 內(nèi)上機檢測。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各管蛋白樣品濃度。.4.4 蛋白變性：在上述各蛋白樣品管中加入 1/5 體積 5*蛋白上樣緩沖液后，放入 100℃中煮沸 10 min。
圖 4：AT1R(A)、APP(B)、ADAM 10(C)、BACE 1(C)、PS 1(C)的定量 PCR 檢測結(jié)果2. 中樞 Ang II 刺激可以下調(diào)全長 APP 蛋白水平但上調(diào)其 mRNA 水平識別 APP 氨基末端片段的抗體通常也能識別全長 APP 整蛋白。在本研究中，我們采用這種抗體來分析全長 APP 的蛋白水平（包括成熟 APP 和成熟前APP）。這種抗體的有效性在最近的研究中得到了證實[38-40]。WB 結(jié)果（圖 5AC）顯示中樞 Ang II 可以引起大鼠腦組織中全長 APP 蛋白水平顯著下降：相對于對照組，低劑量組和中劑量組下降了 50%（P<0.01），高劑量組下降了 70%28
南京醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文（P<0.01）。而不同劑量的 Ang II 均可引起大鼠腦組織中的 APP mRNA 水平呈2 倍左右的增長（圖 4 B ，P<0.01）。這些效應(yīng)能被氯沙坦阻斷（P>0.05），證實中樞 Ang II 在其中的介導(dǎo)作用。
【共引文獻】
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本文編號：2814454
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